黃業(yè)亞，孫鴻高

(海南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南?？?70203)

尿沉渣定量檢測(cè)白細(xì)胞及細(xì)菌總數(shù)對(duì)尿路感染的診斷價(jià)值

黃業(yè)亞，孫鴻高

(海南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，海南海口570203)

目的探討尿沉渣中白細(xì)胞及細(xì)菌定量計(jì)數(shù)對(duì)尿路感染的診斷價(jià)值。方法選取2014年2～11月在海南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院住院疑似尿路感染患者436例尿液標(biāo)本作為觀察組，80例我院健康體檢人員尿液標(biāo)本作為對(duì)照組，均留取清潔中段尿同時(shí)做細(xì)菌培養(yǎng)和用Cobio XS尿沉渣分析儀進(jìn)行定量檢測(cè)。以尿培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，制作尿沉渣白細(xì)胞及細(xì)菌定量檢測(cè)診斷尿路感染的ROC曲線(xiàn)，利用SPSS19.0軟件繪制ROC曲線(xiàn)，評(píng)價(jià)預(yù)測(cè)價(jià)值，并計(jì)算其靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值和準(zhǔn)確度。結(jié)果觀察組患者的尿沉渣細(xì)菌和白細(xì)胞陽(yáng)性率分別為40.14%和33.26%，對(duì)照組分別為6.25%和5.00%，觀察組明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在436份尿液標(biāo)本中，培養(yǎng)陽(yáng)性118例占27.1%；以尿白細(xì)胞和細(xì)菌量作為診斷的ROC曲線(xiàn)下面積分別為0.786、0.820，臨界值分別為13個(gè)/μL(白細(xì)胞)、111個(gè)/μL(尿細(xì)菌數(shù))；Cobio XS分析白細(xì)胞篩查的靈敏度為76.3%、特異性為82.7%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為62.1%，陰性預(yù)測(cè)值為90.4%、假陽(yáng)性率為17.3%、假陰性率為23.7%。Cobio XS分析細(xì)菌的靈敏度為84.7%、特異性為76.7%、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為57.5%，陰性預(yù)測(cè)值為93.1%、假陽(yáng)性率為23.3%、假陰性率為15.3%。結(jié)論Cobio XS尿全自動(dòng)化分析儀檢測(cè)尿液中白細(xì)胞及細(xì)菌數(shù)用于臨床尿路感染的診斷具有簡(jiǎn)便快速、符合率高、成本低等優(yōu)點(diǎn)，但還存在一定量的假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果，仍不能替代尿培養(yǎng)，可在一定程度上對(duì)大多數(shù)陰性者得以篩除。

尿沉渣分析儀；細(xì)菌培養(yǎng)；白細(xì)胞計(jì)數(shù)；細(xì)菌計(jì)數(shù)；尿路感染

尿路感染是臨床泌尿系統(tǒng)中最為常見(jiàn)的感染性疾病，主要由于尿路受到病原微生物的侵害后，在尿中繁殖和生長(zhǎng)，進(jìn)而引發(fā)該疾病[1]。傳統(tǒng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)是臨床癥狀結(jié)合中段尿培養(yǎng)的細(xì)菌學(xué)檢查[2]，但中段尿培養(yǎng)結(jié)果陰性者常大于50.0%[3]，且培養(yǎng)周期較長(zhǎng)、費(fèi)用也高。因泌尿系統(tǒng)感染性疾病發(fā)病快且患者疼痛較為明顯，如果不及時(shí)治療病情會(huì)發(fā)展成為其他慢性疾病[4]，因此，快速診斷和及早治療尿路感染極其重要。本研究以細(xì)菌培養(yǎng)為金標(biāo)準(zhǔn)，探討Cobio XS尿全自動(dòng)化分析儀檢測(cè)尿沉渣中白細(xì)胞及細(xì)菌定量計(jì)數(shù)對(duì)尿路感染的診斷價(jià)值。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器Cobio XS全自動(dòng)尿沉渣分析儀(匈牙利77Elektronika Muszeriparkft生產(chǎn))，培養(yǎng)基廣州迪景微生物有限公司產(chǎn)品，細(xì)菌鑒定用美華鑒定系統(tǒng)(M120)。

1.2 標(biāo)本來(lái)源選取2014年2～11月在我院住院疑似尿路感染患者436例作為觀察組，其中男性212例，女性224例，同時(shí)選取同期我院健康體檢人員80例作為對(duì)照組，其中男性38例，女性42例。均按無(wú)菌操作原則留取清潔中段尿至無(wú)菌杯中送檢。

1.3 方法

1.3.1 尿培養(yǎng)細(xì)菌計(jì)數(shù)用5μL定量接種環(huán)取尿液1環(huán)接種在血平板上，置37℃培養(yǎng)18～24 h，計(jì)數(shù)菌落，革蘭氏陰性桿菌菌落計(jì)數(shù)＞105cfu/mL，革蘭氏陽(yáng)性菌落數(shù)＞104cfu/mL為細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性。如培養(yǎng)出現(xiàn)有三種以上的細(xì)菌，視為污染棄去[5]。

1.3.2 尿沉渣檢測(cè)在尿培養(yǎng)的同時(shí)用Cobio XS全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿沉渣，尿液留取后控制在2 h內(nèi)完成細(xì)菌培養(yǎng)和尿沉渣檢測(cè)。

1.3.3 尿液細(xì)菌及白細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果的驗(yàn)證將電腦軟件中的圖片調(diào)出，進(jìn)行人工識(shí)別和校正。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，以細(xì)菌培養(yǎng)為標(biāo)準(zhǔn)繪制白細(xì)胞和細(xì)菌檢測(cè)結(jié)果的ROC曲線(xiàn)。以陽(yáng)性似然比最大者為臨界值，計(jì)算最佳臨界值內(nèi)的靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值，假陽(yáng)性率、假陰性率。同時(shí)以此臨界值為標(biāo)準(zhǔn)判定兩組檢測(cè)結(jié)果的陰陽(yáng)性，通過(guò)χ2檢驗(yàn)比較兩組結(jié)果的差異，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 觀察組尿標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果436份疑似尿路感染尿標(biāo)本培養(yǎng)中陰性318例(72.9%)，陽(yáng)性118例(27.1%)，其中革蘭氏陽(yáng)性菌19例(占16.1%)，真菌21例(占17.8%)，革蘭氏陰性菌78例(占66.1%)。

2.2 Cobio XS全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)白細(xì)胞和細(xì)菌的ROC曲線(xiàn)曲線(xiàn)下面積分別為0.786、0.820 (見(jiàn)圖1、表1)。陽(yáng)性似比值最大時(shí)，尿路感染的白細(xì)胞臨界值為13個(gè)/μL，尿液細(xì)菌的臨界值為111個(gè)/μL。95%的可信區(qū)間為0.733～0.839和0.775～0.865。

表1 白細(xì)胞和細(xì)菌定量作為判斷尿路感染指標(biāo)的ROC曲線(xiàn)

圖1 尿沉渣分析儀檢測(cè)白細(xì)胞和細(xì)菌的ROC曲線(xiàn)

2.3 Cobio XS尿液全自動(dòng)有形成份分析儀檢測(cè)結(jié)果兩組尿沉渣檢測(cè)結(jié)果以細(xì)菌＞111個(gè)/μL和白細(xì)胞＞13個(gè)/μL作為臨界值確定陽(yáng)性，436份疑似尿路感染標(biāo)本中檢出的白細(xì)胞陽(yáng)性145例，細(xì)菌陽(yáng)性174例，白細(xì)胞和細(xì)菌同時(shí)檢出陽(yáng)性92例，兩者之間有任意一項(xiàng)陽(yáng)性的226例，見(jiàn)表2。同時(shí)計(jì)算各項(xiàng)指標(biāo)的靈敏度、特異性、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值、假陽(yáng)性率、假陰性率和準(zhǔn)確性，見(jiàn)表3。

表2 尿培養(yǎng)細(xì)菌數(shù)與Cobio XS全自動(dòng)尿沉渣分析儀檢測(cè)尿液細(xì)菌數(shù)和白細(xì)胞的關(guān)系(例)

表3 尿沉渣白細(xì)胞和細(xì)菌數(shù)預(yù)測(cè)尿路感染的價(jià)值(%)

2.4 兩組尿標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果比較觀察組尿標(biāo)本沉渣的細(xì)菌檢測(cè)陽(yáng)性率為40.14%，明顯高于對(duì)照組的6.25%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組尿標(biāo)本沉渣的白細(xì)胞檢測(cè)陽(yáng)性率為33.26%，明顯高于對(duì)照組的5.00%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表4。

表4 兩組尿標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果比較(例)

3 討論

Cobio XS全自動(dòng)尿沉渣分析儀采用智能顯微鏡—圖像分析處理系統(tǒng)，對(duì)尿液沉渣成分進(jìn)行自動(dòng)識(shí)別、分類(lèi)和定量報(bào)告[6]，對(duì)沉渣中的有形成分檢測(cè)快速簡(jiǎn)便、符合率也較高、成本低，對(duì)于尿路感染診斷有一定的價(jià)值。復(fù)檢時(shí)，只需將電腦軟件中的圖片調(diào)出，進(jìn)行人工識(shí)別和校正，可有效地提高尿沉渣分析質(zhì)量。尿培養(yǎng)對(duì)尿路感染診斷是臨床常用方法，特異性高，但時(shí)間長(zhǎng)費(fèi)用高，有一定的局限性。尋找準(zhǔn)確快速的診斷方法，對(duì)尿路感染診斷意義重大。本實(shí)驗(yàn)以細(xì)菌培養(yǎng)為標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)采用COBIO XS尿沉渣分析儀檢測(cè)尿液，利用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件繪制ROC曲線(xiàn)。結(jié)果顯示，以尿白細(xì)胞和細(xì)菌診斷尿路感染的ROC曲線(xiàn)下的面積(AUC)分別為0.786、0.820。兩項(xiàng)指標(biāo)的AUC均大于0.7，說(shuō)明兩項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)篩查尿路感染價(jià)值較大。

本實(shí)驗(yàn)以革蘭氏陰性菌＞105cfu/mL或革蘭氏陽(yáng)性菌＞104cfu/mL為陽(yáng)性；3種以上細(xì)菌的視為污染棄去。在436份疑似尿路感染標(biāo)本中共檢出陽(yáng)性標(biāo)本118例，陽(yáng)性率為26.7%，以大腸埃希菌多見(jiàn)(占55%)，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)相近[7-8]。

本研究結(jié)果顯示，Cobio XS尿沉渣分析儀檢測(cè)，以尿沉渣白細(xì)胞數(shù)＞13個(gè)/μL和細(xì)菌數(shù)＞111個(gè)/μL作為臨界值，436份疑似尿路感染尿培養(yǎng)標(biāo)本的白細(xì)胞陽(yáng)性145例，細(xì)菌陽(yáng)性174例，細(xì)菌和白細(xì)都陽(yáng)92例，細(xì)菌或白細(xì)胞兩者之一陽(yáng)性226例。當(dāng)以白細(xì)胞為篩查指標(biāo)時(shí)，其靈敏度為76.3%，特異性為82.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為62.1%，陰性預(yù)測(cè)值為90.4%，假陽(yáng)性率為17.3%，假陰性率為23.7%，準(zhǔn)確度為81.0%，尤登指數(shù)為0.59，因此，白細(xì)胞計(jì)數(shù)在篩查中有一定的意義。但假陰性率過(guò)高，這可能是白細(xì)胞破裂的原故。當(dāng)以細(xì)菌計(jì)數(shù)作為篩查指標(biāo)時(shí)，其靈敏度84.7%，特異性為76.7%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為57.5%，陰性預(yù)測(cè)值為93.1%，假陽(yáng)性率為23.3%，假陰性率為15.3%，準(zhǔn)確度為78.9%，尤登指數(shù)為0.614。與白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較靈敏度較白細(xì)胞高，但特異性較白細(xì)胞低，假陽(yáng)性率也高。這可能與Cobio XS全自動(dòng)分析儀智能顯微鏡—圖像分析處理系統(tǒng)有關(guān)，因?yàn)榧?xì)菌比較微小，從形態(tài)上區(qū)分易于出錯(cuò)，人工顯微鏡觀察也難于得到滿(mǎn)意的結(jié)果。當(dāng)以尿白細(xì)胞和細(xì)菌均為陽(yáng)性作為篩查指標(biāo)時(shí)，靈敏度為66.1%，特異性為95.6%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為84.8%，陰性預(yù)測(cè)值為88.4%，假陽(yáng)性率為4.4%，假陰性率為33.9%，準(zhǔn)確度為87.6%，尤登指數(shù)為0.617。其靈敏度明顯降低，假陰性率也明顯升高，但特異性明顯提高，假陽(yáng)性率明顯降低。當(dāng)以尿白細(xì)胞或細(xì)菌陽(yáng)性作為篩查指標(biāo)時(shí)其靈敏度為91.5%，特異性為62.9%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為47.8%，陰性預(yù)測(cè)值為95.2%，假陽(yáng)性率為37.1%，假陰性率為8.5%，尤登指數(shù)為0.544。

本研究?jī)山M細(xì)菌檢驗(yàn)結(jié)果比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=33.80，P＜0.05)，兩組白細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=26.28，P＜0.05)。觀察組細(xì)菌的檢出率為40.14%(174/436)，而對(duì)照組的檢出率僅為6.25%(5/80)，說(shuō)明該法檢測(cè)細(xì)菌具有合適的敏感性和很高的特異性(93.75%)。同理，尿沉渣白細(xì)胞在觀察組和對(duì)照組的的陽(yáng)性率分別為33.26%(145/436)和5.00%(4/80)。表明尿沉渣中白細(xì)胞檢測(cè)的特異性較好(95.00%)。

綜上所述，Cobio XS全自動(dòng)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞和細(xì)菌計(jì)數(shù)診斷尿路感染的特異性還不夠理想，不能代替尿液培養(yǎng)法。但因其具有較高的準(zhǔn)確性和特異性，可以作為尿路感染重要的輔助指標(biāo)。當(dāng)尿沉渣白細(xì)胞和細(xì)菌計(jì)數(shù)明顯異常時(shí)，在做尿液培養(yǎng)同時(shí)可預(yù)先治療、控制病情發(fā)展、減少患者痛苦，培養(yǎng)結(jié)果出來(lái)后再進(jìn)行對(duì)癥治療，可以有效地控制尿路感染。由此可見(jiàn)，以尿沉渣白細(xì)胞和細(xì)菌定量分析聯(lián)合診斷尿路感染是較好的輔助診斷，在一定的程度上對(duì)陰性者予以篩除，減少患者的費(fèi)用。檢測(cè)陽(yáng)性者及時(shí)做尿培養(yǎng)，再參照培養(yǎng)結(jié)果對(duì)癥治療，具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

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Diagnostic value of quantitative detection of leukocytes and bacteria in the urine sediment of urinary tract infection.

HUANG Ya-ye,SUN Hong-gao.Department of Clinical Laboratory,the Second Affiliated Hospital of Hainan Medical University,Haikou 570203,Hainan,CHINA

ObjectiveTo explore the diagnostic value of quantitative detection of leukocytes and bacteria in urine sediment of urinary tract infection.MethodsFour hundred and thirty six urine specimens from patients with suspected urinary tract infection hospitalized in our hospital from Feb.2014 to Nov.2014 were investigated as an observation group,and 80 urine specimens from healthy people who underwent health examination in our hospital were enrolled as a control group.All of these clean-catch midstream urine specimens were processed using bacterial culture and quantitative detection by Cobio XS urine sediment analyzer.Using urine culture as gold standard,ROC curves for leukocytes and bacteria were calculated to detect urinary tract infection by using SPSS19.0 software.ROC curve analysis was performed to evaluate predictive values and calculate sensitivity,specificity,positive predictive value,negative predictive value and accuracy.ResultsThe positive rates of urine sediment bacteria and leukocytes in observation group were 40.14%and 33.26%,significantly higher 6.25%and 5.00%in control group respectively(P＜0.05).118 of 436 specimens were positive for uropathogen,accounting for 27.1%.The area under the ROC curve were 0.786 for white blood cell(WBC)and 0.820 for bacteria,and cut-off concentrations were 13 cells/μL(WBC)and 111 cells/μL(urine bacteria) respectively.Cobio XS analysis for WBC indicated a sensitivity of 76.3%,specificity of 82.7%,positive predictive value of 62.1%,negative predictive value of 90.4%,false-positive rate of 17.3%and false-negative rate of 23.7%.Cobio XS analysis for bacteria showed a sensitivity of 84.7%,specificity of 76.7%,positive predictive value of 57.5%,negative predictive value of 93.1%,false-positive rate of 23.3%and false-negative rate of 15.3%.ConclusionCobio XS automated urine sediment analyzer which is capable of quantifying urine leukocytes and bacteria is used in the diagnosis of urinary tract infection with advantages of simple,rapid,high coincidence rate and low cost,while it can also create a number of false-positive and false-negative results.Thus urinalysis can't substitute for a urine culture,but is to some extent used to filter out most of the negative results.

Urine sediment analyzer;Bacterial culture;Leukocytes count;Bacteria count;Urinary tract infection

R446.12+2

A

1003—6350（2017）14—2309—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.14.022

2017-02-14)

黃業(yè)亞。E-mail：huangyeya@126.com