胡園園,易若琨,王仲明,聶旭元,騫 宇,趙 欣(重慶第二師范學(xué)院,功能性食品協(xié)同創(chuàng)新中心,重慶 400067)

?

苦蕎中D-手性肌醇的純化及其抗氧化活性研究

胡園園,易若琨,王仲明,聶旭元,騫 宇,趙 欣*
(重慶第二師范學(xué)院,功能性食品協(xié)同創(chuàng)新中心,重慶 400067)

采用超聲浸提法提取苦蕎D-手性肌醇(DCI),通過(guò)高碘酸鈉氧化法測(cè)定DCI含量,利用活性炭柱分離純化苦蕎粗提物,高效液相色譜法(HPLC)分析粗提物和純化產(chǎn)物的組成及含量。以VC、BHT為對(duì)照,通過(guò)對(duì)DPPH自由基、羥自由基、超氧陰離子的體外抗氧化評(píng)價(jià)體系和總還原力的測(cè)定,評(píng)價(jià)對(duì)比苦蕎DCI粗提物和純化產(chǎn)物的抗氧化活性。結(jié)果表明,苦蕎粗提物中D-手性肌醇的含量?jī)H為0.129%,經(jīng)活性炭柱純化后,苦蕎中D-手性肌醇的含量可以達(dá)到27.26%;苦蕎DCI提取物對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子自由基和羥基自由基均具有不同程度的清除作用,同時(shí)具有較好的還原性，且DCI純化產(chǎn)物的抗氧化活性要明顯強(qiáng)于DCI粗提物。

苦蕎,D-手性肌醇,活性炭,高效液相色譜法,抗氧化

研究表明自由基(free radical)是引起癌癥、衰老、心腦血管退變性等疾病的重要原因之一[1]。當(dāng)機(jī)體處于衰老狀態(tài)時(shí),體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量的自由基,而抗氧化劑可以有效地消除自由基,使機(jī)體達(dá)到氧化還原平衡[2]。D-手性肌醇(DCI)為肌醇的一種,具有光學(xué)活性體,屬于B族維生素中水溶性維生素[3],研究表明D-手性肌醇除了具有肌醇促進(jìn)肝臟脂代謝的功能外,還具有胰島素增敏、保護(hù)肝損傷、降血脂和降血糖等多種生理功能[4]。此外,張澤生[5]發(fā)現(xiàn)D-手性肌醇和肌醇均能顯著或極顯著提高小鼠不同組織中超氧化物歧化酶、總超氧化能力和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶的活性,同時(shí)降低丙二醛的含量,對(duì)衰老的小鼠表現(xiàn)出有效的抗氧化效果,但是目前對(duì)于D-手性肌醇體外抗氧化活性的研究未見報(bào)道?？嗍w作為中國(guó)一種傳統(tǒng)的藥食兩用植物資源,不僅含有豐富的生物類黃酮,也含有少量的D-手性肌醇單體[6]。目前關(guān)于苦蕎的研究,多數(shù)集中在對(duì)苦蕎黃酮類化合物的功能活性研究,而苦蕎中DCI的抗氧化活性鮮有報(bào)道。本研究從苦蕎籽粒中提取D-手性肌醇并進(jìn)行純化,然后對(duì)其純化前后的體外抗氧化活性進(jìn)行測(cè)定,以期為苦蕎D-手性肌醇的開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

苦蕎籽粒 寧強(qiáng)縣羌州糧食有限公司提供;鐵氰化鉀、FeSO4、三氯乙酸(TCA)、高碘酸鈉、醋酸鈉、氯化鐵 均為分析純;1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)、氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)、甲基吩嗪甲基硫酸鹽(PMS) 均購(gòu)自天津市富晨化學(xué)試劑廠;色譜級(jí)乙腈 購(gòu)自美國(guó)Honeywell公司;無(wú)水乙醇、水楊酸、抗壞血酸、丁化羥基甲苯(BHT)、H2O2、D-手性肌醇(純度為99%)、粒狀活性炭 均為分析純,購(gòu)自天津市天天化學(xué)試劑廠;蒸餾水和超純水 為實(shí)驗(yàn)室自制。

RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海科恒實(shí)驗(yàn)發(fā)展有限公司;YXJ-2高速臺(tái)式離心機(jī) 常州恒隆儀器有限公司;752N-紫外可見分光光度計(jì) 上海精科;KQ-300DE超聲波清洗器 上海五相儀器儀表有限公司;BPG-9030AH高溫烘箱 上海和呈儀器制造有限公司;EZ-DRY真空冷凍干燥儀 杭州豐漠冷凍設(shè)備制造有限公司;大孔吸附樹脂柱(Φ 30 mm×310 mm) 天津市東麗區(qū)天天化學(xué)試劑廠;MILLI-Q超純水儀 MILLIPORE公司;HH-6B數(shù)顯恒溫水浴鍋 鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司;AL104分析電子天平 瑞士梅特勒-托利多公司;FZ102微型植物粉碎機(jī) 黃驊市中興有限責(zé)任公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 苦蕎中DCI的提取 參照盧丞文[7]的研究,選取超聲波浸提法提取苦蕎中DCI。先取適量的苦蕎籽粒,用粉碎機(jī)粉碎后,粉末過(guò)60目篩,稱取50 g,與體積分?jǐn)?shù)為50%的乙醇溶液按1∶1 (g/mL)的比例混合均勻,并于50 ℃恒溫水浴超聲(功率為175 W)振蕩提取2 h,重復(fù)提取三次,合并提取液,3000 r/min離心10 min,取上清液,于65 ℃恒溫旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到DCI濃縮液,然后置于真空冷凍干燥儀中冷凍干燥(加熱溫度為50 ℃,干燥室壓力為80 Pa),得到苦蕎DCI粗提物粉末,備用。

1.2.2 高碘酸鈉氧化法測(cè)定DCI含量

1.2.2.1 D-手性肌醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 參照文獻(xiàn)[8],稱取適量的D-手性肌醇標(biāo)品,配制成一系列不同濃度(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 mmol/L)的DCI標(biāo)準(zhǔn)水溶液,各取2.0 mL分別加入4.0 mL的醋酸鈉緩沖液(pH4.5)和1.2 mL的高碘酸鈉溶液(0.01 mmol/L)后,于260 nm處測(cè)其吸光度(a),避光,于65 ℃水浴保存2 h,冷卻后,再測(cè)定260 nm吸光度(b),計(jì)算吸光值的變化情況(a-b),并以吸光值變化為縱坐標(biāo),以標(biāo)準(zhǔn)液濃度為橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2.2 D-手性肌醇含量的測(cè)定 稱取適量的苦蕎DCI粗提物,用蒸餾水溶解并于50 mL容量瓶中定容。使用1.2.2.1中的方法測(cè)定吸光值的變化,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算DCI含量。

1.2.3 活性炭柱層析法分離純化D-手性肌醇 參照胡俊君的研究[9],采用30 mm×310 mm的色譜柱,稱取一定量的活性炭顆粒,采用濕法裝柱,將活性炭顆粒浸入過(guò)量的洗脫液中,攪拌均勻后,傾入色譜柱中?；钚蕴款w粒沉淀穩(wěn)定后,稱取1 g DCI粗提物,加入60 mL體積分?jǐn)?shù)50%的乙醇溶液溶解,并將上樣液的pH調(diào)至6～8,用體積分?jǐn)?shù)為4%的乙醇溶液(pH3～4)進(jìn)行洗脫,流速為0.2 mL/min,用帶刻度的試管收集洗脫液,每管收集6 mL,收集液隔管用高碘酸鈉氧化法跟蹤檢測(cè),并于260 nm下測(cè)定吸光度,直至洗脫完全,然后合并洗脫液,減壓蒸餾,真空冷凍干燥(溫度50 ℃,壓力80 Pa)后得到純化后的苦蕎DCI提取物粉末,即DCI純化產(chǎn)物。

1.2.4 HPLC分析苦蕎DCI提取物的組成 參照本課題組已經(jīng)建立的高效液相色譜分析方法[4]。用70%的乙腈水溶液溶解DCI標(biāo)準(zhǔn)品和樣品,使其濃度分別為0.18 mg/mL和1.8 mg/mL,然后用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾,取濾液備用。采用島津公司HPLC儀,示差折光檢測(cè)器,酰胺柱(4.6 mm i.d.×150 mm,5 μm)測(cè)定,洗脫液為體積分?jǐn)?shù)為81%的乙腈溶液,流速為1.0 mL/min,柱溫為30 ℃,檢測(cè)波長(zhǎng)為512 nm,進(jìn)樣量為20 μL。

1.2.5 D-手性肌醇體外抗氧化活性研究

1.2.5.1 DPPH自由基清除能力測(cè)定 參照文獻(xiàn)[10]并稍作修改,評(píng)價(jià)對(duì)比純化前后的苦蕎DCI提取物對(duì)DPPH自由基的清除能力。將3.0 mL DPPH(1 mmol)溶液與1.0 mL不同濃度的樣品溶液分別加入試管中,充分混合,黑暗處理30 min,517 nm處測(cè)定吸光值。抗壞血酸作陽(yáng)性對(duì)照,用蒸餾水做陰性對(duì)照,用甲醇代替DPPH做本底組對(duì)照。清除率按以下方法計(jì)算:

清除率(%)=[1-(Aa-Ab)/A0]×100

式中,Aa為樣品吸光值,Ab為樣品本底吸光值,A0為陰性對(duì)照值。

1.2.5.2 羥基自由基的清除能力測(cè)定 采用Fenton體系法[11]評(píng)價(jià)對(duì)比純化前后的DCI提取物對(duì)羥基自由基的清除能力。向10 mL離心管中依次加入1.0 mL樣品溶液,1.0 mL FeSO4溶液,1.0 mL水楊酸-乙醇溶液和1.0 mL H2O2溶液,37 ℃條件下水浴1 h,然后于510 nm處測(cè)定其吸光值。用蒸餾水做陰性對(duì)照和樣品本底對(duì)照。清除率的計(jì)算:

清除率(%)=[1-(Aa-Ab)/A0]×100

式中,Aa為樣品吸光值,Ab為樣品本底吸光值,A0為空白對(duì)照液的吸光度。

清除率(%)=[1-(Aa-Ab)/A0]×100

式中,Aa為樣品吸光值,Ab為樣品本底吸光值,A0為陰性對(duì)照值。

1.2.5.4 總還原能力測(cè)定 參考文獻(xiàn)[13]并修改,對(duì)DCI粗提物及DCI純化產(chǎn)物的總還原能力做對(duì)比和評(píng)價(jià)。取各濃度的樣品溶液1.0 mL,依次加入2.5 mL的0.2 mol/L磷酸鹽緩沖液(pH6.6)和2.5 mL的1% K3[Fe(CN)6],50 ℃條件下水浴20 min后,再加入10% W/V的TCA(2.5 mL),混勻,并在3000 r/min下離心10 min,取2.0 mL的上清液于試管中,依次加入去離子水(2.0 mL)和0.1%的氯化鐵(0.5 mL),混勻,靜置10 min后,于700 nm處測(cè)定其吸光度值。用蒸餾水代替0.1%氯化鐵溶液做本底對(duì)照。

1.3 數(shù)據(jù)分析

所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)三次,并采用SPSS 13.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 D-手性肌醇標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定

以標(biāo)準(zhǔn)DCI濃度為橫坐標(biāo),其對(duì)應(yīng)吸光值為縱坐標(biāo),繪得DCI標(biāo)準(zhǔn)曲線,建立回歸方程。得到其標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1 所示。

圖1 DCI含量標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig.1 The standard curve of D-chiro-inositol content

2.2 苦蕎粗提物的純化

按照上述1.2.3的方法,采用活性炭柱層析分離苦蕎粗提物中DCI。胡俊君已報(bào)道用體積分?jǐn)?shù)為4%的乙醇洗脫液對(duì)DCI進(jìn)行洗脫效果最佳[9],因此本研究選用體積分?jǐn)?shù)為4%的乙醇溶液作為洗脫液進(jìn)行DCI的洗脫。結(jié)果如圖2所示,活性炭柱層析分離純化得到了DCI的主要洗脫峰,表明洗脫液的成分較純,組分相對(duì)單一。收集所有洗脫液,真空冷凍干燥后得到純度較高的苦蕎DCI純化產(chǎn)物粉末。

圖2 DCI純化產(chǎn)物的活性炭柱層析圖Fig.2 Eluting curve of DCI on activated carbon column

由圖1和表1可知,當(dāng)苦蕎粗提物和純化產(chǎn)物樣品的濃度均為0.05 mg/mL時(shí),其吸光度值分別為0.021和2.75,代入DCI標(biāo)準(zhǔn)曲線中可求得樣品中DCI的濃度,經(jīng)計(jì)算得粗提物中DCI的含量為0.129%(w/w);而經(jīng)過(guò)活性炭柱純化后,純化產(chǎn)物中DCI的含量可以達(dá)到27.26%(w/w),結(jié)果表明通過(guò)活性炭柱可以較好的純化苦蕎中的DCI。

表1 苦蕎DCI的吸光值和純度Table 1 Absorption values and purity of DCI extract from tartary buckwheat

2.3 HPLC分析苦蕎D-手性肌醇提取物的組成

從標(biāo)準(zhǔn)品的高效液相色譜圖(圖3a)中可以清晰地看出,DCI在此實(shí)驗(yàn)條件下可以較好地被分離,色譜峰出峰時(shí)間為3.93 min。由標(biāo)準(zhǔn)品(5～25 μL)的5個(gè)不同進(jìn)樣量HPLC分析,獲得峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積(y)為縱坐標(biāo),以各DCI物質(zhì)的量(μmol,x)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到y(tǒng)=1.1×107x+1.9×105(R2=0.998,n=5)。將粗提物和純化產(chǎn)物分別得到的2個(gè)峰面積代入回歸曲線中,得出各樣品中DCI物質(zhì)的量,并可計(jì)算出各樣品中DCI的含量,結(jié)果顯示與高碘酸鈉氧化法測(cè)定DCI含量的結(jié)果一致。從粗提物樣品的高效液相色譜圖(圖3b)中看出,樣品中含有較多的雜質(zhì),且檢測(cè)峰沒有完全被分離,而純化產(chǎn)物的高效液相色譜圖(圖3c)結(jié)果顯示雜質(zhì)相對(duì)減少,色譜峰較清晰地被分離,且出峰面積顯著增大。結(jié)果表明經(jīng)過(guò)活性炭純化后,部分雜質(zhì)被去除,DCI的含量顯著增加。

圖3 標(biāo)準(zhǔn)品(a)、粗提物樣品(b)與純化產(chǎn)物樣品(c)高效液相色譜圖Fig.3 HPLC chromatography of standards(a)、 crude extracts(b)and purification products(c)

2.4 DCI粗提物與DCI純化產(chǎn)物的體外抗氧化活性對(duì)比

2.4.1 對(duì)DPPH自由基的清除功效 DPPH溶液在紫外-可見光區(qū)具有較強(qiáng)的吸收光譜,加入抗氧化劑后,自由基被清除,使吸收光譜強(qiáng)度減小,且與加入的抗氧化劑的量呈反比,因此可以通過(guò)吸光度的變化計(jì)算DPPH自由基清除率[14]。按1.2.5.1方法,以一定濃度的VC、BHT、DCI粗提物和DCI純化產(chǎn)物為橫坐標(biāo),以吸光度值計(jì)算DPPH·的清除率，為縱坐標(biāo),結(jié)果見圖4。由圖4可知,DCI純化產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基的清除能力遠(yuǎn)小于VC,但稍大于DCI粗提物。當(dāng)濃度為1 mg·mL-1時(shí),VC的清除率可達(dá)到98.66%,DCI純化產(chǎn)物的清除率為58.55%,DCI粗提物的清除率為48.3%,BHT的清除率僅為42.3%,結(jié)果表明經(jīng)活性炭柱純化后,DCI提取物清除DPPH自由基的能力稍有上升。在0.1～1 mg·mL-1范圍內(nèi),隨著樣品濃度的上升,樣品對(duì)DPPH自由基的清除能力均逐漸增強(qiáng),表明苦蕎DCI提取物具有一定的抗氧化活性。

圖4 DCI粗提物與純化產(chǎn)物對(duì)DPPH·的清除能力的比較Fig.4 Comparison between D-chiro-inositol and purified product to the scavenging capacity of DPPH·

2.4.2 對(duì)羥基自由基的清除功效 水楊酸能與Fenton反應(yīng)[15]中生成的·OH作用并產(chǎn)生有色物質(zhì)。在該體系中加入具有清除·OH能力的物質(zhì),可以減少有色物質(zhì)的生成。故可以通過(guò)測(cè)定吸光值的變化來(lái)判定該物質(zhì)的清除·OH的能力,從而分析其抗氧化能力。分別以VC、BHT、DCI粗提物和DCI純化產(chǎn)物的濃度為橫坐標(biāo),所得吸光度值計(jì)算·OH的清除率,為縱坐標(biāo),結(jié)果見圖5。由圖5可知,DCI純化產(chǎn)物對(duì)羥基自由基的清除能力大于DCI粗提物,但弱于VC,BHT清除羥基自由基的能力最弱;且在0.1～1 mg·mL-1范圍內(nèi),隨著濃度的上升,VC、BHT和DCI提取物對(duì)羥基自由基的清除能力均逐漸增強(qiáng),且DCI純化產(chǎn)物的清除能力增加速度最快,結(jié)果表明隨著DCI含量的增加,其抗氧化活性也逐漸增加。當(dāng)DCI純化產(chǎn)物濃度為1 mg·mL-1時(shí),其清除率達(dá)到89.49%,與VC的清除率(99.87%)接近。結(jié)果顯示,DCI提取物對(duì)羥自由基有一定的清除能力。

圖5 DCI粗提物與純化產(chǎn)物清除羥基自由基能力的比較Fig.5 Comparison between D-chiro-inositol and its purified product to the scavenging capacity of hydroxyl radical

圖6 DCI粗提物與純化產(chǎn)物清除超氧陰離子能力的比較Fig.6 Comparison between D-chiro-inositol and purified product to the scavenging capacity of superoxide anion

2.4.4 總還原能力的測(cè)定 樣品的還原力和抗氧化活性有明顯相關(guān)性,還原力測(cè)定依據(jù)樣品能夠提供電子的數(shù)目和難易程度,已知抗氧化劑是通過(guò)還原自身來(lái)清除自由基,物質(zhì)的還原能力越大,其抗氧化性就越強(qiáng)。因此物質(zhì)抗氧化活性的大小可以通過(guò)測(cè)定其還原力的大小來(lái)判斷[17]。分別以VC、BHT、DCI粗提物和DCI純化產(chǎn)物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度值為縱坐標(biāo),計(jì)算總還原力。由圖7知,在0.1～2.0 mg/mL濃度范圍內(nèi),DCI純化產(chǎn)物和粗提物的還原能力均隨著濃度的增加而增強(qiáng),表明苦蕎DCI提取物具有一定的還原力,其中DCI純化產(chǎn)物的還原能力強(qiáng)于DCI粗提物和BHT,但低于VC,且隨著濃度的升高,DCI純化產(chǎn)物與粗提物的還原力差距逐漸增大。當(dāng)DCI純化產(chǎn)物濃度為2.0 mg/mL時(shí),其吸光度為0.486,而DCI粗提物的吸光值僅為0.314,而VC可以達(dá)到0.729,BHT的還原力最弱,其吸光值只有0.258。

圖7 DCI粗提物與純化產(chǎn)物的總還原能力比較Fig.7 Comparison between the D-chiro-inositol and its purified product to total reducing power

3 結(jié)論

采用超聲波浸提法從苦蕎中提取D-手性肌醇,并利用活性炭柱分離純化,得到純度較高的DCI提取物,測(cè)得苦蕎DCI純化產(chǎn)物中D-手性肌醇的含量為27.26%,是粗提物中DCI含量的211.3倍。高效液相色譜分析結(jié)果顯示經(jīng)過(guò)活性炭柱純化后,苦蕎DCI提取物中雜質(zhì)明顯減少,色譜峰分離效果較好。體外抗氧化研究結(jié)果表明,DCI純化產(chǎn)物對(duì)DPPH自由基、超氧陰離子和羥基自由基的清除效果均比DCI粗提物的清除效果好,且具有更好的還原能力。本研究結(jié)果表明,DCI提取物具有較好的體外抗氧化活性,其抗氧化能力隨著濃度的增大而增強(qiáng),且DCI純化產(chǎn)物抗氧化能力大于粗提物,遠(yuǎn)大于BHT,但低于VC,可以作為一種有效的天然抗氧化劑。本研究結(jié)果為深入探究D-手性肌醇抗氧化機(jī)制及開發(fā)DCI抗氧化保健品及膳食補(bǔ)充劑奠定了一定的理論基礎(chǔ)。

[1]Kim W C,Lee D Y,Lee C H,et al. Optimization of narirutin extraction during washing step of the pectin production from citrus peels[J]. Journal of Food Engineering,2004,63(2):19l-197.

[2]Lu Y R,Foo L Y. Antioxidant and radical scavenging activities of polyphenols from apple pomace[J]. Food Chemistry,2000,68:81-85.

[3]張澤生,張夢(mèng)娜,高云峰,等. D-手性肌醇及D-松醇對(duì)緩解HepG2細(xì)胞胰島素抵抗的作用[J]. 中國(guó)食品添加劑,2016(9):58-63.

[4]Hu Y Y,Zhao Y,Ren D Y,et al. Hypoglycemic and hepatoprotective effects of D-chiro-inositol-enriched tartary buckwheat extract in high fructose-fed mice[J]. Food Function,2015,6:3760-3769.

[5]張澤生,梁辰,刁琢,等. 肌醇與D-手性肌醇抗氧化作用的研究[J]. 中國(guó)食品添加劑,2015(5):110-113.

[6]勾秋芬. 不同發(fā)酵條件對(duì)釀酒酵母產(chǎn)D-手性肌醇含量的影響[J]. 產(chǎn)業(yè)與科技論壇,2016(17):51-54.

[7]盧丞文. 蕎麥中D-手性肌醇分離提取與純化研究[D]. 長(zhǎng)春:吉林農(nóng)業(yè)大學(xué),2007.

[8]王利軍,白雪. 蕎麥D-手性肌醇提取工藝的研究[J]. 食品科技,2014(8):208-210.

[9]胡俊君,蔣梅峰,林勤保,等. 苦蕎麩皮中D-手性肌醇的分離純化[J]. 食品工業(yè)科技,2009,30(4):197-199.

[10]郭建軍,雷曉,任道遠(yuǎn),等. 股藍(lán)茶總皂苷的純化及其抗氧化活性研究[J]. 食品工業(yè)科技,2015,36(5):99-107.

[11]Tian L M,Zhao Y,Guo C,et al. A comparative study on the antioxidant activities of an acidic polysaccharide and various solvent extracts derived from herbal Houttuynia cordata[J]. Carbohydrate Polymers,2011,83:537-544.

[12]Wang C C,Chang S C,StephenInbaraj,et al. Isolation of carotenoids,flavonoids and polysaccharides fromLyciumbarbarumL. and evaluation of antioxidant activity[J]. Food Chemistry,2010,120(1):184-192.

[13]周小理,周一鳴. 苦蕎麩皮黃酮純品與粗品抗氧化活性的比較研究[J]. 食品工業(yè)科技,2008,29(10):78-80.

[14]李鉉軍,崔勝云. 抗壞血酸清除DPPH自由基的作用機(jī)理[J]. 食品科學(xué),2011,32(1):86-87.

[15]Song H,Zhang Q,Zhang Z,et al.Invitroantioxidant activity of polysaccharides extracted fromBryopsisplumose[J]. Carbohydrate Polymers,2010,80:1057-1061.

[16]李穎暢,馬春穎,勵(lì)建榮. 藍(lán)莓葉水溶性和醇溶性提取物的抗氧化作用[J].食品與發(fā)酵科技,2014(2):31-35.

[17]張強(qiáng),周正義,王松華,等. 大蒜、生姜、洋蔥水提物抗氧化活性比較[J]. 食品與發(fā)酵工業(yè),2006,32(11):107-110.

Study on purification and antioxidant activity of D-chiro-inositol from tartary buckwheat

HU Yuan-yuan,YI Ruo-kun,WANG Zhong-ming,NIE Xu-yuan,QIAN Yu,ZHAO Xin*

(Chongqing University of Education,Chongqing Collaborative Innovation Center for Functional Food,Chongqing 400067,China)

The D-chiro-inositol was obtained by ultrasonic extraction from tartary buckwheat. The total D-chiro-inositol content was measured by sodium periodate oxidation method. The D-chiro-inositol was purified by activated carbon column. The composition of D-chiro-inositol extractions were analyzed by high performance liquid chromatography(HPLC)method. Moreover,the reducing power of D-chiro-inositol extractions on DPPH,hydroxyl radicals and superoxide anion free radicalinvitrowas measured. Results showed that the content of crude D-chiro-inositol extractions in tartary buckwheat only attained 0.129%,however,the content of purified buckwheat D-chiro-inositol by actived carbon column could be achieved 27.26%. The antioxidant ability of D-chiro-inositol extractions had higher DPPH free radical,superoxide anion free radical and hydroxyl free radical scavenging effects as well as good reducing capacity. Besides,the antioxidant ability of purified product was better than crude extracting from tartary buckwheat.

tartary buckwheat;D-chiro-inositol;activated carbon;HPLC;antioxidant activity

2016-11-28

胡園園(1990-)，女，碩士研究生，助教，主要從事食品加工和植物中天然產(chǎn)物提取分離與功能方面的研究，E-mail:790117529@qq.com。

*通訊作者:趙欣(1981-)，男，博士，教授，主要從事食品生物技術(shù)、食品分子營(yíng)養(yǎng)與功能性食品方面的研究， E-mail:zhaoxin@cque.edu.cn。

重慶市教委科技項(xiàng)目(KJ1714357)；重慶高校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)計(jì)劃資助項(xiàng)目(CXTDX201601040)；重慶市工程技術(shù)研究中心建設(shè)項(xiàng)目(cstc2015yfpt_gcjsyjzx0027)。

TS210.1

A

1002-0306(2017)14-0082-05

10.13386/j.issn1002-0306.2017.14.016