沈海濤， 吳 娜， 王 煜， 陳之光， 劉振寧， 趙 敏△

(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院 1急診科， 2內(nèi)分泌科， 遼寧 沈陽(yáng) 110004)

?；撬釋?duì)百草枯中毒大鼠腎損傷的作用及機(jī)制研究*

沈海濤1， 吳 娜2， 王 煜1， 陳之光1， 劉振寧1， 趙 敏1△

(中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院1急診科，2內(nèi)分泌科， 遼寧 沈陽(yáng) 110004)

目的： 探討不同劑量?；撬釋?duì)百草枯中毒大鼠腎臟氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)的影響。方法: 選取48只雄性SD大鼠隨機(jī)分為陰性對(duì)照組、百草枯染毒組、百草枯染毒+小劑量?；撬峤M和百草枯染毒+大劑量牛磺酸組。采用生化檢測(cè)儀檢測(cè)大鼠血清肌酐及尿素氮水平；比色法檢測(cè)血標(biāo)本中丙二醛(malondialdehyde，MDA)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)水平評(píng)估氧化應(yīng)激狀態(tài)；另以ELISA法檢測(cè)血標(biāo)本中IL-6及細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)水平評(píng)估炎癥反應(yīng)；DHE熒光探針檢測(cè)腎臟活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)水平；Western blot法檢測(cè)大鼠腎臟標(biāo)本絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)中p-P38 MAPK、p-JNK和p-ERK1/2的蛋白水平；并以real-time PCR法檢測(cè)大鼠腎臟內(nèi)TNF-α、TGF-β1及IL-6的mRNA 水平。結(jié)果: 百草枯中毒大鼠血清肌酐及尿素氮增高，?；撬岣深A(yù)后降低了中毒大鼠的肌酐及尿素氮水平，且大劑量?；撬峤M的肌酐及尿素氮水平更低。?；撬岬母深A(yù)不僅明顯減輕了腎臟組織的氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)，同時(shí)也降低了百草枯中毒大鼠腎臟的MAPK活性。結(jié)論: 牛磺酸干預(yù)能減輕百草枯中毒大鼠的腎損傷，其作用機(jī)制可能與下調(diào)了腎臟MAPK活性、減輕了腎臟氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)有關(guān)。

牛磺酸； 百草枯； 腎臟； 氧化應(yīng)激； 炎癥因子

近年來(lái)，百草枯(paraquat，PQ)中毒因其極低的中毒濃度成為臨床中常見(jiàn)農(nóng)藥中毒之一，因病程發(fā)展迅速，病情兇險(xiǎn)，且一直沒(méi)有找到特效解毒劑，所以在臨床上病死率非常高[1]。百草枯除草效果好，不污染環(huán)境，因此在世界范圍內(nèi)廣泛應(yīng)用。百草枯因其性?xún)r(jià)比極高，在我國(guó)市場(chǎng)發(fā)展迅猛，我國(guó)作為農(nóng)業(yè)大國(guó)，是目前全世界生產(chǎn)和使用百草枯最多的國(guó)家。百草枯中毒損傷的靶器宮包括肺臟、腎臟、肝臟等。其中，急性腎臟損傷可發(fā)生在百草枯中毒的早期，嚴(yán)重時(shí)可表現(xiàn)為急性腎功能衰竭,甚至死亡[2]。腎臟最重要的生理功能是排泄，正常情況下毒物及炎性物質(zhì)可以從腎臟大量排出體外。然而百草枯中毒時(shí)，一旦損傷腎臟，會(huì)導(dǎo)致排泄毒物及炎性物質(zhì)的能力減弱，引起百草枯及炎性物質(zhì)在體內(nèi)蓄積，而加重對(duì)肺臟及肝臟等器官的損傷[3]。因此，在百草枯中毒時(shí)，能否對(duì)腎臟的功能進(jìn)行維護(hù)性治療占有很重要的地位，腎臟功能的完整是保證其它臟器有效治療的基礎(chǔ)。

目前認(rèn)為百草枯中毒與機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)[4]。近期有研究發(fā)現(xiàn)，百草枯中毒大鼠腎臟損傷與絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase， MAPK)中的c-Jun N末端激酶(c-Jun N-terminal kinase， JNK)、細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)及P38 MAPK有關(guān)[5]。本實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射百草枯的方式建立百草枯中毒大鼠，同時(shí)給予抗氧化劑?；撬?taurine，Tau)干預(yù)，通過(guò)檢測(cè)大鼠機(jī)體及腎臟的氧化應(yīng)激水平，從核酸及蛋白水平檢測(cè)MAPK及其下游炎癥因子表達(dá)情況，來(lái)探討?；撬釡p輕百草枯中毒大鼠腎臟損傷的機(jī)制。

材 料 和 方 法

1 試劑、儀器及動(dòng)物

百草枯純品和?；撬峒兤?Sigma)；丙二醛(malondialdehyde，MDA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)的比色法試劑盒購(gòu)中國(guó)南京建成公司；白細(xì)胞介素6(interleukin-6，IL-6)及細(xì)胞間黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)的ELISA試劑盒購(gòu)于Uscnlife；dihydroethidium (DHE)試劑盒購(gòu)于Santa Cruz；抗磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)抗體、抗磷酸化JNK(p-JNK)抗體、抗磷酸化P38(p-P38)抗體及抗β-actin抗體均購(gòu)于Santa Cruz； TRIzol試劑盒和定量反轉(zhuǎn)錄試劑盒均購(gòu)于日本TaKaRa公司。熒光顯微鏡(BX41, Olympus)。清潔級(jí)Sprague-Dawley雄性大鼠，周齡6～8周，體重區(qū)間200～250 g，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，飼養(yǎng)的溫度控制20～25 ℃，濕度控制40%～70%，晝夜節(jié)律控制12 h，自由進(jìn)食水。該實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)過(guò)中國(guó)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)(倫理號(hào)為2015PS302K)。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 動(dòng)物分組 選取48只雄性Sprague-Dawley大鼠按照隨機(jī)分組原則分為陰性對(duì)照(negative control，Con)組、百草枯染毒組(PQ)、百草枯染毒+小劑量牛磺酸組(L-Tau組)及百草枯染毒+大劑量?；撬峤M(H-Tau組)。染毒組大鼠腹腔注射20 mg/kg百草枯溶液(配制濃度及方法為10 g/L溶于生理鹽水)；陰性對(duì)照組大鼠腹腔注射等量生理鹽水；百草枯染毒+小劑量牛磺酸組大鼠腹腔注射20 mg/kg百草枯溶液，6 h后予小劑量?；撬?200 mg·kg-1·d-1)經(jīng)灌胃針注入；百草枯染毒+大劑量?；撬峤M大鼠腹腔注射20 mg/kg百草枯溶液，6 h后予大劑量?；撬?400 mg·kg-1·d-1)灌胃。

2.2 血清中肌酐及尿素氮水平的測(cè)定 百草枯腹腔注射后72 h，大鼠禁食12 h后，麻醉大鼠，右心室取血，離心后置-80 ℃冰箱凍存。使用全自動(dòng)生化學(xué)檢測(cè)儀(HITACHI)檢測(cè)大鼠肌酐及尿素氮水平。

2.3 血清中氧化應(yīng)激及炎癥因子水平的測(cè)定 將凍存血清置于室溫中解凍，按試劑盒說(shuō)明書(shū)步驟采用比色法檢測(cè)血中MDA及SOD水平，采用ELISA法檢測(cè)大鼠血標(biāo)本中所含IL-6及ICAM-1的水平。

2.4 腎臟組織中活性氧簇水平的檢測(cè) 通過(guò)腎臟冰凍切片的DHE熒光顯像來(lái)評(píng)價(jià)腎臟組織ROS水平。百草枯腹腔注射后72 h，大鼠完全進(jìn)入麻醉狀態(tài)后，迅速開(kāi)腹剝離并取出腎臟，經(jīng)生理鹽水充分洗凈，置入液氮速凍完全后置于-80 ℃冰箱保存用以備檢測(cè)。DHE熒光探針的操作方法參照我們之前文獻(xiàn)中的描述[6],取一部分腎臟組織做冰凍切片，經(jīng)PBS充分清洗后，將10 μmol/L的DHE熒光探針溶于PBS溶液中，之后將混勻的溶液加到之前所切的組織塊上，將組織塊完全覆蓋住，再置于37 ℃避光孵育30 min；完成后以PBS反復(fù)沖洗切片組織3次已達(dá)到將DHE液完全洗凈的程度，甘油封片后通過(guò)熒光顯微鏡成像對(duì)比不同組織所呈現(xiàn)熒光強(qiáng)度的差異，并留取圖片。應(yīng)用軟件IPP 6.0檢測(cè)各組圖片熒光密度，熒光密度即可反映各組氧化應(yīng)激水平，從而比較各組大鼠腎臟的氧化應(yīng)激水平。

2.5 Western blot法檢測(cè)腎臟MAPK蛋白的表達(dá) 腎臟組織勻漿，制成勻漿液，離心,測(cè)定蛋白濃度，每管50 μg蛋白分裝。BCA 法進(jìn)行蛋白定量后，加樣品緩沖液煮沸5 min，各取20 μL加樣；使用10% SDS-PAG在150 V、30 mA條件下電泳1.5 h； 50 V條件下轉(zhuǎn)膜(PVDF膜)2 h；5%脫脂牛奶封閉，滴加 I 抗，4 ℃過(guò)夜; TBS沖洗5 min×3次，加入 II 抗(1∶500)室溫下孵育2 h，用0.1% TBST沖洗15 min×3次，ECL顯影掃描，條帶灰度值以IPP 6.0測(cè)定。

2.6 Real-time PCR法檢測(cè)腎臟組織IL-6、ICAM-1及TGF-β1 的mRNA水平 按TRIzol試劑盒說(shuō)明書(shū)提取各組大鼠腎臟勻漿的總RNA。使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒完成反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，將RNA逆轉(zhuǎn)錄出cDNA，將合成好的cDNA置于-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｔ赑CR儀上進(jìn)行變性、退火、擴(kuò)增反應(yīng)，PCR反應(yīng)完畢后分析產(chǎn)物熔解曲線判斷反應(yīng)的特異性，以2-ΔΔCt法分析數(shù)據(jù)。IL-6的上游引物序列為5’-TCGAGCCCACCGGGAACGAA-3’，下游引物序列為5’-GCAACTGGACCGAAGGCGCT-3’；ICAM-1的上游引物序列為5’-CCTTCCTCACCGTGTACTGG-3’，下游引物序列為5’-AGCGTAGGGTAAGGTTCTTGC-3’；TGF-β1的上游引物序列為5’-TAATGGTGGACCGCAACAACG-3’，下游引物序列為5’-CTTGCTGTACTGTGTGTCCAG-3’；β-actin的上游引物序列為5’-GGAGATTACTGCCCTGGCTCCTA-3’，下游引物序列為5’-GACTCATCGTACTCCTGCTTGCTG-3’。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采集到的計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示。各組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析并用Tukey法進(jìn)行兩兩比較。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 各組大鼠血清肌酐及尿素氮水平

百草枯染毒組血清肌酐及尿素氮水平較對(duì)照組明顯增高(P<0.05)；小劑量?；撬峒按髣┝颗；撬岣深A(yù)均使染毒大鼠血清肌酐和尿素氮水平降低，相對(duì)來(lái)說(shuō)大劑量牛磺酸干預(yù)組血清肌酐和尿素氮水平的降低程度更為顯著(P<0.05)，見(jiàn)圖1。

Figure 1.The changes of serum creatinine and urea nitrogen levels in the rats with different treatments. Mean±SD.n=12.#P<0.05vsCon group;*P<0.05vsPQ group;△P<0.05vsL-Tau group.

圖1 大鼠肌酐及尿素氮水平的比較

2 血清中MDA、SOD、IL-6及ICAM-1水平的變化

與陰性對(duì)照組相比較，百草枯染毒組的SD大鼠血標(biāo)本中MDA水平明顯增高，牛磺酸干預(yù)使其降低(P<0.05)。相反，百草枯染毒組大鼠血標(biāo)本中SOD水平較正常組降低，大劑量?；撬岣深A(yù)使其增高(P<0.05)，但小劑量?；撬岵挥绊慡OD水平。我們進(jìn)一步計(jì)算MDA/SOD值，發(fā)現(xiàn)百草枯中染毒組大鼠的MDA/SOD值明顯增高(P<0.05)，大劑量及小劑量牛磺酸干預(yù)后均使MDA/SOD降低，且大劑量組降低得更顯著(P<0.05)。血清中IL-6及ICAM-1水平均較百草枯染毒組增高，?；撬岣深A(yù)使IL-6及ICAM-1降低，且大劑量的?；撬崾蛊浣档偷酶@著(P<0.05)，見(jiàn)圖2。

Figure 2.The levels of oxidative stress and inflammatory factors in the serum of the rats. Mean±SD.n=12.#P<0.05vsCon group;*P<0.05vsPQ group;△P<0.05vsL-Tau group.

圖2 大鼠血清中氧化應(yīng)激及炎癥因子水平的比較

3 腎臟組織中的ROS含量

百草枯染毒使大鼠的腎臟ROS含量明顯增高，?；撬崾菇M織中ROS降低，且大劑量?；撬嶙饔酶@著(P<0.05)，見(jiàn)圖3。

Figure 3.ROS content in the kidney of the rats (×40). Mean±SD.n=12.#P<0.05vsCon group;*P<0.05vsPQ group;△P<0.05vsL-Tau group.

圖3 大鼠腎臟ROS水平的比較

4 腎臟組織中MAPK蛋白表達(dá)的變化

百草枯染毒使大鼠腎臟中p-ERK1/2、p-JNK及p-P38蛋白水平明顯增高，?；撬岣深A(yù)后使其蛋白水平降低。相比小劑量?；撬幔髣┝颗；撬岣深A(yù)后p-ERK1/2與p-JNK的蛋白水平下降更明顯(P<0.05)，但p-P38并無(wú)顯著差異，見(jiàn)圖4。

Figure 4.The changes of the MAPK protein content in the renal tissues of the rats with different treatments. Mean±SD.n=12.#P<0.05vsCon group;*P<0.05vsPQ group;△P<0.05vsL-Tau group.

圖4 大鼠腎臟MAPK蛋白含量的比較

5 腎臟組織中IL-6、ICAM-1及TGF-β1的mRNA水平

百草枯中毒后，腎臟組織中IL-6、ICAM-1及TGF-β1的mRNA水平較正常時(shí)增高，?；撬岣深A(yù)后使mRNA的增高程度減弱(P<0.05),且大劑量牛磺酸作用更為明顯(P<0.05)，見(jiàn)圖5。

Figure 5.The mRNA levels of inflammatory cytokines in the rat kidneys. Mean±SD.n=12.#P<0.05vsCon group;*P<0.05vsPQ group;△P<0.05vsL-Tau group.

圖5 大鼠腎臟炎癥因子mRNA水平的變化

討 論

在之前的實(shí)驗(yàn)中，我們?cè)o予大鼠一次性腹腔注射不同劑量的百草枯，分別為每公斤體重10 mg、20 mg、30 mg、40 mg及50 mg百草枯，結(jié)果發(fā)現(xiàn)每公斤體重20 mg的百草枯劑量死亡率極低，同時(shí)可以獲得得滿(mǎn)意的中毒率[7]。因此，在本實(shí)驗(yàn)中，我們用該劑量來(lái)構(gòu)建百草枯中毒大鼠模型。我們發(fā)現(xiàn)?；撬岬母深A(yù)降低了百草枯中毒大鼠的肌酐，同時(shí)也抑制了中毒大鼠的JNK活化、減輕了氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，而且在一定濃度范圍內(nèi)，?；撬岬倪@種保護(hù)作用與其劑量成正比。

本研究發(fā)現(xiàn)，百草枯中毒大鼠腎臟功能受損，肌酐清除率下降，同時(shí)腎臟組織內(nèi)的ROS水平升高，PCR發(fā)現(xiàn)IL-6及ICAM-1的mRNA水平也有所增高。ROS是線粒體在氧化還原過(guò)程中產(chǎn)生的具有強(qiáng)氧化活性的物質(zhì)，是反映體內(nèi)氧化應(yīng)激水平的直接指標(biāo)之一[8]。IL-6及TNF-α作為細(xì)胞因子，受體廣泛分布于大部分細(xì)胞，在炎癥反應(yīng)中介導(dǎo)了非常重要的通路[9]。我們發(fā)現(xiàn)，?；撬岬母深A(yù)減輕了百草枯中毒大鼠的腎損傷，且大劑量?；撬嵝Ч黠@。同時(shí)?；撬岬母深A(yù)減弱了百草枯中毒大鼠腎臟ROS水平，IL-6和TNF-α的mRNA水平，本研究中?；撬嵋矞p輕了機(jī)體血清中的氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)?？寡趸瘎┡；撬釡p弱了氧化應(yīng)激，同時(shí)減輕了炎癥反應(yīng)，說(shuō)明氧化應(yīng)激啟動(dòng)了百草枯所致的腎損傷。MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在炎癥性疾病的發(fā)生和發(fā)展中具有重要調(diào)控作用，能被多種炎性刺激所激活，參與介導(dǎo)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)、免疫反應(yīng)和細(xì)胞生長(zhǎng)、發(fā)育、分裂、死亡以及細(xì)胞間的功能同步等多種過(guò)程；ERK1/2可以被生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子等所激活，參與細(xì)胞增殖、分化與凋亡等，有研究報(bào)道抑制ERK活性則可以抑制凋亡；而作為MAPK家族的最主要成員，JNK的作用也不容忽視，它可將細(xì)胞外刺激介導(dǎo)為細(xì)胞內(nèi)的多種反應(yīng)。激活JNK通路的主要配體是細(xì)胞因子，在某些應(yīng)激刺激之下也可激活，從而起到促進(jìn)或抑制細(xì)胞黏附，調(diào)節(jié)著效應(yīng)細(xì)胞的增殖、分化以及凋亡進(jìn)程。在未受應(yīng)激刺激或細(xì)胞因子激活的細(xì)胞中，JNK主要存在于胞質(zhì)內(nèi)，少量存在于細(xì)胞核內(nèi)。在相應(yīng)的細(xì)胞因子激活或者應(yīng)激反應(yīng)刺激后， JNK大量活化并轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞核內(nèi)，與特定基因結(jié)合從而引起效應(yīng)基因的表達(dá)變化[10]。本研究中大鼠百草枯中毒模型的腎臟組織內(nèi)JNK尤其是磷酸化亞型的活性增加，這與陳達(dá)等[5]的研究一致。除此之外，本研究中我們還發(fā)現(xiàn)?；撬崮芙档桶俨菘葜卸敬笫竽I臟的JNK與ERK活性，同時(shí)減輕其機(jī)體及腎臟的氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，且大劑量?；撬岬淖饔酶鼜?qiáng)。而p-P38在?；撬岣深A(yù)下有所下降，但大劑量?；撬岵⑽慈〉妙?lèi)似于JNK的抑制作用，說(shuō)明牛磺酸的主要作用位點(diǎn)可能不在于此。由此我們推斷，?；撬崮鼙Ｗo(hù)百草枯中毒大鼠的腎功能，主要與抑制JNK和ERK激活、下調(diào)氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)有關(guān)。而且在本實(shí)驗(yàn)所應(yīng)用的劑量范圍內(nèi)，牛磺酸對(duì)百草枯中毒大鼠急性腎損傷的拮抗作用隨劑量的增加而得到強(qiáng)化。

目前普遍認(rèn)為百草枯中毒與機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)。百草枯所致的臟器損傷程度取決于氧自由基、還原物質(zhì)及臟器氧含量三者之間的互相作用[11]。因此，積極探尋百草枯中毒的發(fā)病機(jī)制及抗氧化治療藥物已成為目前國(guó)際研究的熱點(diǎn)。目前維生素C及N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)等抗氧化劑已應(yīng)用于臨床。研究顯示，NAC可以通過(guò)抑制MDA水平增高及GSH降低，影響肺泡上皮細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶表達(dá)水平和NO合成，從而減輕肺組織細(xì)胞凋亡及DNA損傷[12-14]。維生素C可降低經(jīng)PQ處理的小鼠胚胎干細(xì)胞的總ROS水平[15]。但NAC及維生素C對(duì)百草枯腎損傷的保護(hù)作用尚不明確。而?；撬釓V泛分布于動(dòng)物組織和器官內(nèi)，因此來(lái)源充足，價(jià)格便宜，如能證實(shí)此藥有改善百草枯中毒腎損傷的作用，在一定程度上阻止百草枯中毒的發(fā)病和進(jìn)展，將會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益。?；撬岵粌H可以通過(guò)清除氧自由基而達(dá)到抗脂質(zhì)過(guò)氧化的作用，還可以通過(guò)多通路的作用從而抑制細(xì)胞凋亡并抑制細(xì)胞鈣超載，并可穩(wěn)定線粒體內(nèi)部結(jié)構(gòu)和功能從而使氧化還原反應(yīng)得以正常進(jìn)行[16]。目前已有研究發(fā)現(xiàn)?；撬崮軠p輕百草枯中毒大鼠的肺損傷[17-18]。 Nagata等[19]的研究發(fā)現(xiàn)?；撬崮芨纳瓢俨菘葜卸敬笫蟮哪I功能，但是其機(jī)制尚未明確。?；撬崾欠衲軠p輕腎臟的氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。通過(guò)本研究，我們發(fā)現(xiàn)?；撬峥梢詼p輕氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)，可能與抑制JNK及ERK1/2的激活有關(guān)。

百草枯中毒的治療目前尚無(wú)特效解毒劑，其主要治療手段包括防止百草枯繼續(xù)吸收、促進(jìn)百草枯通過(guò)自體代謝或血液凈化排出、激素、抗氧化藥物綜合治療及支持對(duì)癥等。研究不同的抗氧化劑，尋求多靶點(diǎn)、多層次的干預(yù)治療，將為百草枯的藥物治療提供一定的理論依據(jù)。

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(責(zé)任編輯： 盧 萍， 羅 森)

Effect of taurine on kidney injury induced by paraquat poisoning in rats

SHEN Hai-tao1, WU Na2, WANG Yu1, CHEN Zhi-guang1, LIU Zhen-ning1, ZHAO Min1

(1DepartmentofEmergency,2DepartmentofEndocrinology,ShengjingHospital,ChinaMedicalUniversity,Shenyang110004,China.E-mail:zhaom@sj-hospital.org)

AIM: To study the effects of taurine at different doses on renal oxidative stress and inflammation induced by paraquat in rats. METHODS: Male SD rats (n=48) were randomly divided into 4 groups: negative control group, paraquat group, paraquat + low-dose taurine group, and paraquat + high-dose taurine group. The serum levels of creatinine and urea nitrogen were detected by a biochemical analyzer. The levels of malondialdehyde (MDA) and superoxide dismutase (SOD) were measured by colorimetry. The plasma concentrations of IL-6 and intercellular adhesion molecule (ICAM)-1 were detected by ELISA. Renal reactive oxygen species (ROS) was checked by fluorescence probe dihydroethidium (DHE). The protein levels of renal p-P38 MAPK, p-ERK1/2 and p-JNK were determined by Western blot. The mRNA expression of TNF-α, IL-6 and TGF-β1 was detected by real-time PCR. RESULTS: Serum creatinine and urea nitrogen increased after paraquat poisoning, and decreased after feeding with taurine in poisoned rats, with better result in high-dose taurine group. Taurine reduced the oxidative stress and inflammation in the renal tissue, and also reduced the protein levels of p-JNK, p-ERK1/2 and p-P38 in the kidney of paraquat-poisoned rats. CONCLUSION: Taurine attenuates renal injury induced by paraquat poisoning in rats. The mechanism may be related to reducing renal MAPK activity, oxidative stress and inflammatory response.

Taurine; Paraquat; Kidney; Oxidative stress； Inflammatory factors

1000- 4718(2017)07- 1295- 06

2016- 10- 28

2017- 02- 10

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No. 81671898)；遼寧省教育廳項(xiàng)目(No. LK201603； No. LK201633)

R595.4； R363.1+3

A

10.3969/j.issn.1000- 4718.2017.07.023

雜志網(wǎng)址： http://www.cjpp.net

△通訊作者 Tel: 18940251619; E-mail: zhaom@sj-hospital.org