張隨玲

(河南省舞鋼市畜牧局 畜禽改良站 462500)

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蛋雞大腸桿菌性輸卵管炎的診斷

張隨玲

(河南省舞鋼市畜牧局 畜禽改良站 462500)

蛋雞輸卵管炎是蛋雞常見的繁殖障礙疾病，主要經(jīng)呼吸道、消化道感染，臨床上主要表現(xiàn)為蛋雞無產(chǎn)蛋高峰，產(chǎn)畸形蛋、軟殼蛋、血絲蛋和薄殼蛋等[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，蛋雞輸卵管炎發(fā)病率為20%～40%，各日齡階段的雞均可感染發(fā)病，給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。2016年10月，舞鋼市某規(guī)模養(yǎng)雞場(chǎng)的2號(hào)舍2 000多只產(chǎn)蛋雞突發(fā)該病，經(jīng)臨床癥狀、病理剖檢、病原分離鑒定，確診為雞大腸桿菌性輸卵管炎。

1 臨床癥狀

該雞場(chǎng)2號(hào)舍飼養(yǎng)的2 000余只蛋雞，在開產(chǎn)日齡后蛋雞的產(chǎn)蛋率一直穩(wěn)定在95%以上，雞群正常。但在240日齡時(shí)開始出現(xiàn)產(chǎn)蛋異常，產(chǎn)畸形蛋、沙皮蛋、血絲蛋、薄殼蛋和小型蛋等，雞群產(chǎn)蛋時(shí)表現(xiàn)疼痛不安，下蛋時(shí)間延長(zhǎng)，拉稀、消瘦、兩翅下垂、羽毛松亂等癥狀，產(chǎn)蛋率突然下降到90%以下。出現(xiàn)病雞死亡現(xiàn)象，共死亡雞138只。獸醫(yī)技術(shù)人員用恩諾沙星、土霉素藥物飲水治療后，疫情逐步得到好轉(zhuǎn)，但效果不明顯。

2 剖檢變化

剖檢10只病死雞，病變主要為心包膜和胸腔粘連；卵泡形狀不整齊、變形、粘連、充血，有的卵泡呈紅褐或黑褐色；輸卵管內(nèi)有大量干酪樣團(tuán)塊，輸卵管壁薄透明，輸卵管內(nèi)出血、充血，切面呈輪層狀，輸卵管膨大部、傘部黏膜面出現(xiàn)水泡囊腫。個(gè)別嚴(yán)重者，形成卵黃性腹膜炎。

3 病原分離與鑒定

3.1 病料處理

采集病死雞肝、心、輸卵管等病變器官，加適量PBS緩沖液研磨，10倍稀釋，再添加鏈霉素、慶大霉素處理，3 000 r/min離心15～20 min，靜止10 min，取上清液10～15 ml，分別接種SPF雞胚4只，0.1 ml/胚，2只做對(duì)照。置25℃恒溫箱。分別于24 h、48 h、72 h觀察雞胚變化，記錄死亡數(shù)量，尿囊液盲傳3代，觀察發(fā)現(xiàn)均無病變。

3.2 組織觸片染色鏡檢

對(duì)上述病料進(jìn)行處理做觸片，經(jīng)革蘭氏、美藍(lán)、瑞特氏染色鏡檢。觀察到短桿菌，兩端鈍圓，無芽孢，大小(0.4～0.7×1～3)μm，革蘭氏陰性。

3.3 細(xì)菌分離培養(yǎng)

以無菌操作挑取病料分別接種于普通瓊脂、血液瓊脂上，經(jīng)37℃培養(yǎng)18～24 h后，挑取灰隆起、白色、光滑、濕潤(rùn)的可疑菌落接種于麥康凱瓊脂、三糖鐵斜面和S.S瓊脂平板上，培養(yǎng)18～24 h，觀察結(jié)果。三糖鐵培養(yǎng)基的斜面上變黃或陽性反應(yīng)，底層變黃；S.S瓊脂上也呈紅色菌落；在麥康凱瓊脂平板上，見有紅色凹向生長(zhǎng)的菌落。

菌落形態(tài)觀察:分別在血液瓊脂平板上挑取從卵巢、肝臟及心臟中分離到的3株菌落(分別命名為A,B,C)，涂片、革蘭氏染色、鏡檢，形態(tài)均為稍粗短、兩端鈍圓、略為深染的革蘭氏陰性桿菌，絕大多數(shù)呈單個(gè)存在，寬約1～3 μm，長(zhǎng)度約為0.4～0.7 μm。

4 生化試驗(yàn)

根據(jù)文獻(xiàn)[2]，對(duì)病料做生化鑒定試驗(yàn)。結(jié)果見表1。A、B菌株都能發(fā)酵乳糖、麥芽糖、木糖等，C株除不發(fā)酵木糖外，其他試驗(yàn)結(jié)果與A、B菌株相同。

表1 A、B、C三株菌生化反應(yīng)

注：±為產(chǎn)酸產(chǎn)氣，+為產(chǎn)酸;-為陰性。

5 致病性試驗(yàn)

取分離到的A、B、C三個(gè)菌株，制成肉湯培養(yǎng)液，分別腹腔接種4只小白鼠，每只0.1 mL(約15萬CFU活菌)，設(shè)對(duì)照4只。在8 h、16 h和24 h時(shí)候觀察小白鼠精神狀態(tài)。結(jié)果見表2。對(duì)死亡小白鼠進(jìn)行細(xì)菌分離，仍得到原接種菌株。

表2 A、B、C三株菌對(duì)小白鼠的致病力

6 討論

經(jīng)上述實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，可確診此病是由致病性埃希氏大腸桿菌引起的，大腸桿菌血清型較多，我國(guó)目前已報(bào)道的有60多種[3]。因受條件限制，未做血清型鑒定。

由致病力試驗(yàn)可知，A、B、C三株的致病力不同，其中A株>B株>C株。因此，疫苗免疫可以采用自家苗，用A、B菌株試制滅活菌苗，對(duì)未感染的其他雞群進(jìn)行免疫預(yù)防。

大腸桿菌是一種條件性致病菌，在自然界中廣泛存在。一旦雞場(chǎng)環(huán)境變化，對(duì)雞群產(chǎn)生應(yīng)激，就會(huì)誘發(fā)該病發(fā)生。因此，要做好雞場(chǎng)的冬季防風(fēng)保溫，夏季透風(fēng)，空氣流通，避免驚嚇、減少噪音等。飼養(yǎng)密度不能過大。飼料和飲水、圈舍地面、用具也要經(jīng)常用百毒殺、生石灰、過氧乙酸等消毒，搞好衛(wèi)生管理。合理選用藥物，針對(duì)大腸桿菌的耐藥性較強(qiáng)，有必要進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，確定敏感性強(qiáng)的藥物治療和預(yù)防。臨床上一般多用阿莫西林、氟苯尼考和頭孢類藥物。微生態(tài)制劑添加飼料中飼喂，調(diào)節(jié)腸道，保持腸道菌體平衡。選用大腸桿菌多價(jià)油佐劑滅活苗和多價(jià)氫氧化鋁苗對(duì)雛雞進(jìn)行免疫。

[1] 葛國(guó)君,楊蕾,朱會(huì)斌.肉雞大腸桿菌病的綜合診治[J].中國(guó)家禽,1996,12:4.

[2] 楊小燕,沈紹新,李曉華,等.雞致病性大腸桿菌的分離鑒定和自場(chǎng)滅活疫苗的研制[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志,1999,25(2):23-24.

[3] 馮元璋.雞大腸桿菌病的防治對(duì)策[J].養(yǎng)禽與禽病防治,1996,7:22-23.

2017-03-28

張隨玲(1969-)，女，技師，主要從事畜禽疫病防治技術(shù)研究與推廣。

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1005-2739(2017)04-0055-02