龍亞秋, 謝文源, 李 華， 駱文婷, 鄭慰武

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬廣東省中醫(yī)院, 廣東 廣州 510000 2.南方醫(yī)院， 廣東 廣州 510515)

基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)

附子多糖對抑郁大鼠模型的影響*

龍亞秋1, 謝文源1, 李 華2， 駱文婷1, 鄭慰武1

(1.廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬廣東省中醫(yī)院, 廣東 廣州 510000 2.南方醫(yī)院， 廣東 廣州 510515)

目的：觀察附子多糖對抑郁大鼠行為學(xué)及海馬形態(tài)學(xué)的影響。方法:60只健康SD大鼠被隨機(jī)均分為4組,即空白對照組、模型組、附子多糖組、氟西汀組。除空白對照組外，其他各組采用慢性應(yīng)激復(fù)制模型,模型復(fù)制同時給予附子多糖或氟西汀治療，連續(xù)21日后進(jìn)行行為學(xué)觀察，取海馬制備切片用于蘇木精-伊紅染色。結(jié)果:與模型組比較，空白組、附子多糖組游泳不動時間縮短，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0.5)。與模型組比較，附子多糖組、氟西汀組海馬神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量較多，排列較整齊、密集，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)較完整。結(jié)論:附子多糖對抑郁大鼠行為學(xué)有改善作用，同時具有促進(jìn)神經(jīng)元再生的作用。

附子多糖; 抑 郁; 慢性應(yīng)激

抑郁癥對患者、家庭及社會造成巨大負(fù)擔(dān)，嚴(yán)重危害著人類的生命與健康。因此，抑郁癥的防治是當(dāng)今的醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的重大課題。目前尋找起效快、副作用少、效果好并且費(fèi)用低廉的抗抑郁藥物是當(dāng)務(wù)之急。近年來研究表明成年海馬區(qū)神經(jīng)元再生在抑郁癥的發(fā)生、發(fā)展過程中具有重要作用[1,2]?；诖死碚?，我們從多種中藥成分中篩選具有促進(jìn)神經(jīng)元再生作用的藥物-附子多糖，而后檢測其是否具有抗抑郁作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組:SPF級Spague -Dawley(SD)大鼠60只,雄性,購自南方醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心,飼養(yǎng)于南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院藥學(xué)部動物所。將大鼠隨機(jī)分為4組,每組15只:即空白對照組、模型組、附子多糖治療組、氟西汀治療組，模型組、附子多糖治療組、氟西汀治療組采用慢性應(yīng)激復(fù)制抑郁大鼠模型。

1.2 藥品及配制:附子多糖由南方醫(yī)科大學(xué)神經(jīng)生物學(xué)教研室提供，氟西汀(批號：1508018)購自南方醫(yī)科大學(xué)試劑中心。附子多糖1.0g溶于30mL滅菌水備用，氟西汀15.4mg溶于30mL滅菌用水備用。

1．3 抑郁大鼠模型復(fù)制及處理:第1～21天，正常對照組大鼠正常飼養(yǎng)。其他接受7種不同的刺激[3,4]：夾尾(1min)、搖晃(水平往復(fù)，1次/s，共15min)、禁食(48h)、禁水(24h)，晝夜顛倒(24h)，冷水游泳(水溫4度，5min)，束縛(3h)。每天隨機(jī)給予一種刺激，每種刺激累計使用2～3次。造模同時[3]：附子多糖組大鼠腹腔注射附子多糖[100mg/(kg．d)]，氟西汀組大鼠腹腔注射氟西汀[1.54mg/(kg．d)]，余兩組大鼠腹腔注射等劑量生理鹽水，腹腔注射按0.3mL/100g給藥。

1．4 觀察指標(biāo):觀察指標(biāo)包括大鼠體質(zhì)量、行為學(xué)觀察、海馬組織形態(tài)學(xué)觀察。實驗結(jié)束前進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實驗(FST)，將大鼠置于高40cm、直徑18cm，盛有25℃自來水的玻璃缸中，水深可調(diào)整，以大鼠后足剛可觸及筒缸底卻不足以支撐身體為宜，記錄強(qiáng)迫游泳大鼠不動時間[5]。

1．5 統(tǒng)計方法:實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，數(shù)據(jù)用SPSS16.0計軟件進(jìn)行處理。采用One-Way ANOVA；方差齊性時各組之間多重比較采用LSD檢驗；方差不齊時采用近似方差分析Welch法，各組之間多重比較采用Dunnett T3檢驗。以上檢驗以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠體質(zhì)量:造模前各組大鼠體重量無顯著差異，造模中期、造模后期：與空白組比較，模型組、附子多糖組、氟西汀組體質(zhì)量下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0.5)；附子多糖組、氟西汀組大鼠體質(zhì)量較模型組增加。

表1 造模前后各組大鼠體重量±s)

*與空白組比較，P<0.0.5

2.2 行為學(xué)觀察：與空白組比較，模型組、氟西汀組游泳不動時間延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0.5)；與模型組比較，空白組、附子多糖組游泳不動時間縮短，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0.5)；與附子多糖組比較，模型組、氟西汀組游泳不動時間延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.0.5)；氟西汀組游泳不動時間小于模型組。

表2 4組大鼠游戲不動時間±s)

*與空白組比較P<0.05；#與模型組比較P<0.05；△與附子組比較P<0.05

2.3 海馬組織形態(tài)學(xué)觀察：實驗結(jié)果顯示慢性應(yīng)激引起海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，主要表現(xiàn)在模型組大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量減少，排列稀疏、細(xì)胞核變形和固縮(見圖b)?？瞻讓φ战M大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量較多，排列較整齊、密集，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)完整，清晰可見(見圖a)。附子多糖組和氟西汀組海馬神經(jīng)元細(xì)胞的變化介于空白對照組和模型組之間(見圖c、圖d)。

圖1 海馬組織形態(tài)學(xué)觀察(蘇木精-伊紅染色,×40)

3 討 論

本實驗采用的模型是國際上公認(rèn)的抑郁癥模型，經(jīng)行為學(xué)評分測定，證實該模型基本模擬了抑郁癥患者的快感缺乏，興趣缺失，精神運(yùn)動遲滯等抑郁表現(xiàn)，而且據(jù)文獻(xiàn)報道這種慢性應(yīng)激引起的抑郁狀態(tài)及行為異?？杀３?jǐn)?shù)月，這就為抗抑郁劑的應(yīng)用及其藥效學(xué)和作用機(jī)理的研究提供了可能。

本實驗結(jié)果表明，與空白組比較、造模后大鼠體質(zhì)量下降，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，經(jīng)治療后附子多糖組、氟西汀組體質(zhì)量較模型組增加。行為學(xué)觀察：與空白組比較、模型組游泳不動時間延長，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；與模型組比較、附子多糖組游泳不動時間縮短，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，提示附子對抑郁大鼠的行為有改善作用。

海馬是邊緣系統(tǒng)重要組成部分，參與情緒、學(xué)習(xí)和記憶、行為、免疫等的調(diào)節(jié)，它的損傷在各種應(yīng)激所致疾患中起到關(guān)鍵作用。臨床和臨床前實驗研究表明海馬結(jié)構(gòu)和功能的改變涉及抑郁癥的病理生理學(xué)過程，功能性影像學(xué)研究提示抑郁癥患者前額葉皮質(zhì)、腹側(cè)紋狀體和海馬的體積減少[6,7]。本實驗海馬形態(tài)學(xué)觀察表明與模型組比較，附子多糖組、氟西汀組海馬神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)量較多，排列較整齊、密集，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)較完整，提示附子多糖具有促進(jìn)神經(jīng)元再生的作用。

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1006-6233(2017)06-1029-03

廣東省科技廳計劃項目，(粵科規(guī)劃字[2015]110號，編號：2014A020212398)

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10.3969/j.issn.1006-6233.2017.06.046