唐偉杰
(沈陽體育學院附屬競技體校,遼寧沈陽110102)
時間和溫度對人血標本中氨濃度的影響
唐偉杰
(沈陽體育學院附屬競技體校,遼寧沈陽110102)
目的:分析時間和溫度對于血氨濃度的檢測影響。方法:利用美國強生Vitros250干化學分析儀通過比色法對血氨濃度進行檢測。結果:在其他條件一定的情況下,室溫與冷藏條件下的血氨濃度的變化不同。血氨標本儲存在22~24℃室溫超過30min后與原對照組濃度差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。而血氨標本儲存在4~8℃超過180min后才與原對照組濃度差異有統(tǒng)計學意義。結論:血氨標本應該及時地送檢,檢測的時間不能超過20min,如果來不及檢測,最好要將其放在冰箱內冷藏保存,但不應超過150min,否則將影響其檢測結果的準確性。
血液標本;氨;干化學分析儀
氨是蛋白質的代謝產(chǎn)物,它對人和動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)有著潛在的毒副作用。血氨異常升高可繼發(fā)于一些氨基酸與有機酸的代謝障礙,比如鳥氨酸循環(huán)的氨基酸代謝缺陷[1],也可見于遺傳性尿素循環(huán)障礙。另外,血氨異常升高很有可能預示著肝性腦病、肝硬化晚期的肝昏迷、肝衰竭、急性或亞急性肝壞死以及雷氏綜合征等[2]。在過量食用蛋白質時也容易出現(xiàn)高氨血癥[3]。血漿中氨濃度的測定受標本存放的時間長短和溫度高低等因素的影響[4]。提供準確以及可靠的血氨檢測結果對于患者的臨床診斷以及病因分析有極其重大的意義。由于紅細胞氨游離會在血液放置時使血氨濃度升高;肌肉活動或者進餐后對血氨濃度也會有一定程度的影響[4]。所以應該在空腹安靜的狀態(tài)下進行取血。血液樣本放置過久也會影響血氨檢測結果的準確性。在本次試驗中,現(xiàn)收集錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院急診科患者血氨標本40例,分別在22~24℃室溫3個時間點檢測和4~8℃冷藏狀態(tài)下進行5個時間點的檢測,并分析影響血氨濃度檢測結果的因素。
1.1 材料收集錦州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院急診科患者血液標本40例。標本均在同一時間采集,并在采集后5~10min內送至實驗室。血氨標本正常參考范圍:11~33μmol/L。
1.2 檢測指標檢測血氨標本的濃度作為標本檢測對照值(0min),并將每一份血氨標本分裝成兩份。將其中一份血氨標本放置在22~24℃室溫下,分別檢測第10、20、30min血氨的濃度。將另外一份血氨標本放置在2~8℃冰箱中,分別檢測第30、60、120、150、180min血氨的濃度。
1.3 基本方法采用美國強生Vitros250全自動干化學分析儀及血氨干片(批號為1013-2403)。將一滴患者樣本滴在干片上,通過擴散層均勻分布到下面的試劑層,水和非蛋白組分擴散到下面的緩沖試劑層,氨離子轉化為氣態(tài)氨,半透膜只允許氨通過,并且阻止緩沖液或氫氧基離子到達指示劑層。經(jīng)過固定的孵育時間后,可將擴散層作為白色背景測定顯色劑的反應強度。反應原理:氨+溴酚藍(氨指示劑)→藍染劑。
1.4 血氨檢測方法收集所有標本均用肝素抗凝,經(jīng)2 500 r/min離心5min分離出血漿后,立即用全自動干化學分析儀對其進行檢測作為檢測對照值。
1.5 統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0軟件進行統(tǒng)計學分析,配對設計資料采用t檢驗,檢測數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差表示,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
血氨濃度與保存時間、溫度的關系,見表1、2。
表1 22~24℃條件下測定40例血氨標本濃度結果(μmol/L)
表2 2~8℃條件下測定40例血氨標本濃度結果(μmol/L)
人體中氨的主要來源是氨基酸脫氨基,胺類分解,腎小管上皮細胞分泌氨。氨的去路有兩種,丙氨酸經(jīng)血液運送到肝,在肝中,丙氨酸通過聯(lián)合脫氨基作用,釋放出氨,合成尿素。轉氨基后生成的丙酮酸可經(jīng)糖異生成葡萄糖。葡萄糖再由血液輸送到肌肉組織,沿糖分解途徑轉變成丙酮酸,后者接收氨基生成丙氨酸,這就是丙氨酸-葡萄糖循環(huán)過程,它使肌肉中的氨以無毒的丙氨酸形式運送到肝,同時,肝又為肌肉提供了生成丙酮酸的葡萄糖。另一種是腦、肌肉等組織以谷氨酰胺的形式向肝、腎運輸氨。
血氨升高可見于遺傳性尿素循環(huán)障礙,亦繼發(fā)于某些氨基酸與有機酸的代謝障礙,如鳥氨酸循環(huán)的氨基酸代謝缺陷,也可預示肝性腦病、肝硬化末期肝昏迷、肝衰竭、急性或亞急性肝壞死和雷氏綜合征,飲食蛋白過多攝入時也可發(fā)生高氨血癥。因此在檢驗的過程中,血氨檢驗結果的準確性非常重要。而通過本次試驗的結果顯示血氨檢測的準確性與保存的時間與溫度息息相關。標本放置時間越長,其血氨濃度越高;低溫下保存,氨濃度保持不變的時間更長。主要原因可能是血液細胞自身代謝或部分微生物代謝后產(chǎn)生氨致使其血氨濃度升高[5]。因此為保證測定結果的準確應明確要求,檢測血氨的標本采血后應注名采集時間,立即送檢,迅速測定。如果血氨標本要及時送檢,檢測的時間應在20min內完成,如果來不及檢測,那么最好要將其放在冰箱內冷藏保存,但不應超過150min,否則將影響檢測結果的準確性。
[1]侯臨平.急診血氨的檢測分析[J].實用醫(yī)技雜志,2004,11(11):2252-2253.
[2]郭麗潔,鄒大偉,趙明.Amon試劑在Vitros250干化學儀內放置時間對其血氨測定值的影響[J].中國實驗診斷學,2008,12(4):539-539.
[3]Daniotti M,la Marca G,F(xiàn)iorini P,et al.New developments in the treatment of hyperammonemia:emerging use of carglumic acid[J].Int JGen Med,2011,4:21-28.
[4]楊小波,楊帆,王聰慧,杜婕.兩種血氨檢測方法的討論與評價[J].中國保健營養(yǎng)(臨床醫(yī)學學刊),2009,18(10):131-132.
[5]全國衛(wèi)生專業(yè)技術資格考試專家委員會.臨床醫(yī)學檢驗技術(師)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:369.
(吳迪編輯)
Effect of Tem perature and Duration of Storage on Ammonia Concentration in Human Blood Sam p les
TANGWeijie
(SportSchoolAffiliated to Shenyang SportUniversity,Shenyang110102,China)
Objective:To investigate the effectof temperature and duration of storage on ammonia concentration in human blood samples.Method:Fourty blood samples were collected random ly and blood ammonia concentration wasmeasured by colorimetric method using Johnson&Johnson Vitros-250 dry chemical analyzer.Results:The results of themeasurement showed that the change of blood ammonia concentration was different under room temperature(22-24℃)and refrigerated condition(2-8℃).Blood samples stored at room temperature for 30min,ammonia concentration increased significantly than the initial concentration,while ammonia concentration of blood samples stored at 2-8℃formore than 180min showed a significant increase.Conclusions:Blood samplesshould be promptlymeasured and the detection time can notbemore than 20min.If it is too late to detect,it isbest to store itat2-8℃,butnotmore than150min,otherwise itwillaffect the accuracy of its test results.
blood sample;ammonia;dry chemicalanalyzer
R446.1
A
1008-2344(2017)03-0240-02
10.16753/j.cnki.1008-2344.2017.03.018
2017-01-28