高 源 林 玲

(1.江蘇省如東縣栟茶畜牧獸醫(yī)站,江蘇如東 226400; 2.江蘇省如東縣河口畜牧獸醫(yī)站,江蘇如東 226400)

規(guī)?；i場(chǎng)藍(lán)耳病免疫程序優(yōu)化

高 源1林 玲2

(1.江蘇省如東縣栟茶畜牧獸醫(yī)站,江蘇如東 226400; 2.江蘇省如東縣河口畜牧獸醫(yī)站,江蘇如東 226400)

為了探討一種比較適合規(guī)?；i場(chǎng)的藍(lán)耳病合理免疫程序，本文用不同疫苗和不同免疫方式對(duì)仔豬進(jìn)行免疫接種，然后采集血清，檢測(cè)其藍(lán)耳病抗體水平。

規(guī)?；i場(chǎng) 藍(lán)耳病 免疫程序

豬繁殖與呼吸障礙綜合征（PRRS，俗稱(chēng)豬藍(lán)耳病）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的急性傳染病。該病主要造成妊娠母豬流產(chǎn)、死胎等繁殖障礙和仔豬呼吸道疾病，導(dǎo)致仔豬死亡率升高，生長(zhǎng)發(fā)育受阻。目前針對(duì)該病的防控，疫苗免疫仍然是一個(gè)主要的途徑之一。藍(lán)耳病疫苗分2種，一種是滅活苗，另一種是弱毒苗。為探討不同類(lèi)型豬藍(lán)耳病疫苗對(duì)仔豬免疫效果，筆者對(duì)高致病性豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗與滅活苗免疫效果進(jìn)行了對(duì)比試驗(yàn)。現(xiàn)將試驗(yàn)報(bào)告如下：

1 材料和方法

1.1 疫苗與毒株

試驗(yàn)所選用的疫苗為高致病性PRRS（HuN4）弱毒苗和高致病性PRRS（JXA1）滅活苗。HuN4弱毒苗為10頭份/瓶，使用前用10mL滅菌的PBS進(jìn)行稀釋?zhuān)《镜味葹?05.0TCID50/mL；JXA1滅活苗由某生物制品廠生產(chǎn)，強(qiáng)毒株為高致病性PRRS HuN4-F5，病毒滴度為3×105.0TCID50/ml。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 不同疫苗的免疫

試驗(yàn)選用4～5周齡的健康斷奶仔豬25頭隨機(jī)分為3組（見(jiàn)表1），第1組5頭為對(duì)照組，第2組10頭為HuN4弱毒苗組，第3組10頭為JXA1滅活苗組，HuN4弱毒苗組免疫方式為每頭肌注1頭份（1mL），JXA1滅活苗組免疫方式為每頭肌注2 ml，免疫后21d，3個(gè)組全部進(jìn)行攻毒，攻毒方式為每頭滴鼻3ml。

試驗(yàn)開(kāi)始前采集所有豬的血液，分離血清并儲(chǔ)存于-20℃?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)開(kāi)始后，分別于免疫后1、3、5、7、10、14、21d和攻毒后1、5、9、14、21d采集血液并分離血清，凍于-20℃?zhèn)溆?。用于檢測(cè)血清中PRRSV特異性抗體水平。

1.2.2 不同免疫方式的免疫

32 頭仔豬分成4組，30日齡首免，58日齡二免。實(shí)驗(yàn)分組免疫情況（詳見(jiàn)表1）。實(shí)驗(yàn)豬定期采血（58日齡、90日齡、165日齡前腔靜脈采血）后分離血清，采用間接ELISA法檢測(cè)藍(lán)耳病抗體水平。藍(lán)耳病抗體按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行判定（IRPC值大于20為陽(yáng)性）?？贵w合格率大于等于70%為合格（農(nóng)醫(yī)發(fā)[2010] 48號(hào)文件規(guī)定）

表1 仔豬分組免疫情況

1.3 數(shù)據(jù)分析

每組血清PRRSV特異的抗體水平IRPC值均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤（Means±SEM）表示。不同處理組的比較用單因素方差分析的LSD多重比較分析。P＜0.05為比較結(jié)果差異顯著，P＜0.01為比較結(jié)果差異極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同疫苗免疫后血清中PRRSV特異性抗體的檢測(cè)結(jié)果

HuN4弱毒苗組免疫后14d檢測(cè)到抗體，但抗體水平較低，攻毒后抗體水平迅速升高，IRPC值最高達(dá)到126，攻毒后1d HuN4弱毒苗組血清中PRRSV特異抗體水平明顯高于對(duì)照組和JXA1滅活苗組（P＜0.05）；JXA1滅活苗組在攻毒前沒(méi)有產(chǎn)生抗體，但攻毒后抗體水平迅速升高，IRPC值最高達(dá)到141，攻毒后9d JXA1滅活苗組血清中PRRSV特異抗體水平明顯高于HuN4弱毒苗免疫組和對(duì)照組（P＜0.05）；對(duì)照組攻毒后14d檢測(cè)到抗體，抗體水平較低。

2.2 不同免疫方法藍(lán)耳病抗體合格率

仔豬58、90、165日齡藍(lán)耳病抗體合格率統(tǒng)計(jì)（詳見(jiàn)表2）。表2說(shuō)明：4個(gè)實(shí)驗(yàn)組58日齡、90日齡、165日齡時(shí)藍(lán)耳病抗體合格率均未達(dá)到合格標(biāo)準(zhǔn)，但1、3組90日齡、165日齡合格率高于2、4組。

表2 豬藍(lán)耳病血清抗體合格率統(tǒng)計(jì)表

3 討論

（1）本實(shí)驗(yàn)中，HuN4弱毒苗免疫后14d便可檢測(cè)到PRRSV特異性抗體，表明HuN4弱毒苗的免疫能夠快速有效地激發(fā)機(jī)體的體液免疫反應(yīng)，這與Tian等人（2009）的報(bào)道一致。JXA1滅活苗組免疫期間沒(méi)有檢測(cè)到PRRSV特異性抗體，說(shuō)明JXA1滅活苗的免疫并不能激發(fā)機(jī)體的體液免疫反應(yīng)。Nilubol，Platt和Harris（2004）報(bào)道滅活苗免疫后攻毒不能保護(hù)仔豬對(duì)PRRS病毒的感染，這與本文結(jié)果一致，因此滅活苗不適合仔豬免疫。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明：HuN4弱毒疫苗免疫產(chǎn)生期快，能夠快速有效地激發(fā)機(jī)體的體液免疫反應(yīng)，比JXA1滅活苗能更快速有效地激發(fā)機(jī)體的免疫應(yīng)答。

（2）4個(gè)組藍(lán)耳病抗體水平，在58日齡、90日齡、165日齡時(shí)都未達(dá)到合格水平，但1、3組抗體水平明顯高于2組、4組，說(shuō)明豬藍(lán)耳病進(jìn)行2次免疫要好于只做1次免疫。這與華樹(shù)明報(bào)道的藍(lán)耳病抗體在首免后28d合格率為0，藍(lán)耳病疫苗1次免疫的效果不佳，且2次免疫后經(jīng)較長(zhǎng)時(shí)間才能產(chǎn)生有效保護(hù)力是一致的，所以藍(lán)耳病疫苗應(yīng)盡可能進(jìn)行2次免疫。