王 丹 劉曉華 孫 贊

（1 遼寧省遼陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽(yáng) 111000；2 遼寧省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 沈陽(yáng) 110016）

輪狀病毒抗原檢測(cè)患兒腹瀉的診斷價(jià)值與臨床檢驗(yàn)學(xué)研究

王 丹1劉曉華1孫 贊2

（1 遼寧省遼陽(yáng)市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽(yáng) 111000；2 遼寧省人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 沈陽(yáng) 110016）

目的研究分析糞便中輪狀病毒抗原對(duì)腹瀉患兒診斷價(jià)值與臨床意義。方法采用免疫層析金標(biāo)記技術(shù)快速檢測(cè)本院2080份嬰幼兒糞便樣品中輪狀病毒抗原。結(jié)果檢出輪狀病毒抗原陽(yáng)性患兒1260例，陽(yáng)性率為60.6%。將6個(gè)月～2歲嬰幼兒組與＜6個(gè)月嬰兒組、2～6歲幼兒三組作χ2檢驗(yàn)，P＜0.05及P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明6個(gè)月～2歲嬰幼兒為輪狀病毒感染的高發(fā)期。同一年齡組男女患兒間陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論糞便中輪狀病毒抗原檢測(cè)是診斷輪狀病毒腸炎較敏感的方法，對(duì)臨床診斷該病提供了有價(jià)值的依據(jù)。

輪狀病毒；嬰幼兒腹瀉；糞便；病毒抗原檢測(cè)；檢測(cè)分析

輪狀病毒（RV）是小兒急性胃腸炎，尤其是秋、冬季腹瀉的主要病因[1-2]，常導(dǎo)致水電解質(zhì)酸堿平衡紊亂，嚴(yán)重危害患兒身心健康甚至危及生命。為了解腹瀉患兒中輪狀病毒感染的情況，并探討輪狀病毒抗原檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值。2012年1月至2015年10月采用輪狀病毒免疫層析金標(biāo)記技術(shù)方法，對(duì)本院2080例臨床診斷為秋冬季腹瀉患兒的糞便標(biāo)本進(jìn)行輪狀病毒抗原檢測(cè)，結(jié)合臨床資料分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2012年1月至2015年10月本院門(mén)診就診及住院的急性腹瀉患兒2080例，男1272例，女808例；門(mén)診1244例，住院836例。年齡在1～6個(gè)月以下384例，6個(gè)月～2歲1400例，2～6歲256例。所有患兒血液分析各細(xì)胞總數(shù)基本正常，淋巴細(xì)胞比例增高；部分患兒有嘔吐、脫水、發(fā)熱等臨床癥狀。病程＜3 d 420例，3～7 d 1228例，7 d以上432例。

1.2 試劑和方法

1.2.1 試劑：試劑盒由深圳市惠安生物科技有限公司生產(chǎn)，輪狀病毒檢測(cè)試條卡以雙抗體夾心法為基礎(chǔ)，采用免疫層析金標(biāo)記技術(shù)，快速檢測(cè)嬰幼兒糞便中Rota Virus抗原。檢測(cè)時(shí)一個(gè)抗體吸附在硝酸纖維素膜（NC）上，另一個(gè)抗體結(jié)合于膠體金顆粒表面，當(dāng)糞便標(biāo)本中含有Rota Virus抗原時(shí)，先與NC膜上面抗體結(jié)合，然后與金標(biāo)記抗體反應(yīng)，于是形成抗體-抗原-金標(biāo)記抗體的夾心式復(fù)合物，并呈現(xiàn)出紫紅色沉淀線(xiàn)。

1.2.2 方法：取適量糞便樣品放入裝有稀釋液的采便器內(nèi)。轉(zhuǎn)動(dòng)采便棒，直到樣本溶入樣品稀釋液中。取出測(cè)試卡，平放干燥平面上。當(dāng)振蕩、混勻后，旋轉(zhuǎn)折斷試管上的蓋帽，垂直滴加3～4滴（120～150 μL）到測(cè)試卡中的樣品位。10～20 min內(nèi)報(bào)告結(jié)果，結(jié)果報(bào)告不可超過(guò)20 min。

1.2.3 結(jié)果判斷：測(cè)試卡出現(xiàn)兩條紅色線(xiàn)為陽(yáng)性結(jié)果，測(cè)試卡只出現(xiàn)質(zhì)控線(xiàn)為陰性結(jié)果，測(cè)試卡不出現(xiàn)紅色線(xiàn)為無(wú)效，應(yīng)重新檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，多個(gè)計(jì)數(shù)資料的χ2檢驗(yàn)，P＜0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同年齡組腹瀉兒糞便輪狀病毒檢測(cè)結(jié)果：對(duì)2080例秋冬季腹瀉患兒的糞便標(biāo)本進(jìn)行RV抗原檢測(cè)，陽(yáng)性1260例，陽(yáng)性率60.6%，其中男696例，占陽(yáng)性例數(shù)的55.2%，女564例，占44.8%；年齡6個(gè)月以下的156例占陽(yáng)性例數(shù)的12.4%，6個(gè)月～2歲1024例占81.3%，2～6歲80例占6.3%。各年齡組輪狀病毒抗原檢出率見(jiàn)表1。將6個(gè)月～2歲嬰幼兒組、＜6個(gè)月嬰兒組、2～6歲幼兒組作比較，經(jīng)χ2檢驗(yàn)，P＜0.05及P＜0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可認(rèn)為6個(gè)月～2歲嬰兒為輪狀病毒感染的高發(fā)期。同時(shí)對(duì)3個(gè)年齡組中男、女患兒檢出率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，P＞0.05，說(shuō)明輪狀病毒的感染在性別間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 不同年齡組患兒輪狀病毒抗原的檢測(cè)結(jié)果

2.2 不同性狀糞便輪狀病毒的陽(yáng)性率：6個(gè)月～2歲腹瀉兒HRV組陽(yáng)性率以糞便蛋花湯樣49.9%最高。見(jiàn)表2。

表2 1260例陽(yáng)性患兒不同糞便性狀陽(yáng)性率

3 討 論

人類(lèi)RV歸類(lèi)于呼腸孤病毒科[3]，是嬰幼兒腹瀉的主要病原菌，不論發(fā)達(dá)國(guó)家還是發(fā)展中國(guó)家，RV的感染率和發(fā)病率都很高[4]。在我國(guó)由輪狀病毒引起的嬰幼兒急性腹瀉常常在秋冬季造成大范圍的流行，每年10～12月份是發(fā)病高峰，主要侵犯2歲以下的嬰幼兒，嚴(yán)重影響了兒童的健康發(fā)育。腹瀉嬰幼兒因病原體感染而引起腹瀉者占60.6%，與國(guó)內(nèi)報(bào)道相近，表明輪狀病毒仍然是導(dǎo)致嬰幼兒秋冬季腹瀉的主要病原體。

從表1可看出，各年齡組腹瀉患兒糞便中輪狀病毒抗原檢出率以6個(gè)月～2歲組最高，占71.1%，說(shuō)明輪狀病毒引起的嬰幼兒腹瀉多發(fā)生在6個(gè)月～2歲的嬰幼兒，6個(gè)月以下的嬰兒和2歲以上的幼兒發(fā)病較少。＜6個(gè)月的嬰兒因從母體獲得抗體而得到部分保護(hù)，故＜6個(gè)月的嬰兒陽(yáng)性率較低，而6個(gè)月～2歲正是很多嬰兒喂養(yǎng)方式轉(zhuǎn)變的時(shí)期，開(kāi)始減少母乳喂養(yǎng)或完全停止，一旦來(lái)自母體的抗體水平下降后，自身免疫力下降，當(dāng)與病毒接觸時(shí)易被感染，于是形成輪狀病毒感染的高發(fā)期[5]。

在1260例陽(yáng)性的大便常規(guī)檢查中，除108例有少許的脂肪滴外，還有56例有少量的WBC和RBC，20例隱血陽(yáng)性，其余患者常規(guī)檢查均無(wú)異常，RV感染未引起大便中WBC、RBC及脂肪滴增多，其機(jī)制是輪狀病毒侵犯小腸絨毛頂端的柱狀上皮細(xì)胞時(shí)，小腸的柱狀上皮細(xì)胞發(fā)生一系列病理生理變化，使腸道吸收功能障礙，水分大量積聚于腸腔，引起水樣腹瀉，而不引起腸壁局部炎癥的發(fā)生。另外在1260例陽(yáng)性患兒中，黃色稀水樣便4400例（34.9%），蛋花湯樣便628例（49.9%），綠色稀便92例（7.3%），黃色糊狀便72例（5.7%），褐色軟便28例（2.2%），可以看出輪狀病毒性腸炎的大便多為蛋花水樣或黃色稀水樣便，上述大便性狀特征為臨床診斷提供了參考價(jià)值。

綜上所述，糞便標(biāo)本的性狀與腹瀉患兒RV的陽(yáng)性率有明顯的關(guān)系，小兒出現(xiàn)腹瀉時(shí)除查大便常規(guī)外，特別是對(duì)蛋花樣或稀水樣便，鏡檢無(wú)或偶有少量白細(xì)胞或少量脂肪球者[6]，還需檢測(cè)輪狀病毒，以確定病原菌。因此，輪狀病毒抗原的快速檢測(cè)對(duì)嬰兒腹瀉病原的早期診斷和鑒別診斷有重要的臨床應(yīng)用價(jià)值。

[1] 慕容洋洋,邊彤,江山.輪狀病毒抗原檢測(cè)患兒腹瀉臨床診斷價(jià)值與檢驗(yàn)學(xué)研究[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,2015,38(6):366-368.

[2] 周新.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)指南[M].武漢:湖北科學(xué)技術(shù)出版社,2008:210-220.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].南京:東南大學(xué)出版社,2008:636-639.

[4] 陳軍華.輪狀病毒感染發(fā)病機(jī)制研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué):兒科分冊(cè),2015,16(31):237-239.

[5] 徐濤,金小軍.1760例小兒腸炎A群輪狀病毒檢測(cè)結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2015,12(9):551-552.

[6] 李宏魁,鄒掌玉,吳雄.輪狀病毒感染致嬰幼兒腹瀉的檢測(cè)分析[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015,14(10):1582-1583.

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1671-8194（2017）11-0151-02