馬曉彬 許立君

（新疆昌吉州食品藥品檢驗(yàn)所，新疆 昌吉 831100）

高效分子排阻法對(duì)幾種頭孢類抗生素聚合物的研究探討

馬曉彬 許立君

（新疆昌吉州食品藥品檢驗(yàn)所，新疆 昌吉 831100）

頭孢類抗生素包括頭孢曲松鈉、頭孢呋辛鈉、頭孢唑啉鈉、頭孢噻肟鈉和氨曲南等，是目前臨床上常用的抗感染藥物。減少抗生素過(guò)敏反應(yīng)的重要方法之一是控制聚合物的含量。本文根據(jù)《中國(guó)藥典》2010版二部所規(guī)定的Sophdax G-10凝膠色譜法，對(duì)注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢呋辛鈉存放于不同溫度條件下，對(duì)所產(chǎn)生聚合物的含量的影響進(jìn)行了研究。

抗生素；頭孢聚合物；凝膠色譜法；溫度

β-內(nèi)酰胺類抗生素包括青霉素類、頭孢類和非典型的β-內(nèi)酰胺類。頭孢類包括頭孢呋辛鈉、頭孢噻肟鈉、頭孢曲松鈉、頭孢唑啉鈉和氨曲南等，是目前臨床上常用的抗感染藥物。然而它們的過(guò)敏問(wèn)題長(zhǎng)期以來(lái)引起了人們的密切關(guān)注，研究證明，β-內(nèi)酰胺類導(dǎo)致的速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)不一定是由藥物本身所引起的，而和其中的高分子雜質(zhì)有關(guān)[1]，因此控制聚合物的含量是減少此類抗生素過(guò)敏反應(yīng)的重要方法之一?！吨袊?guó)藥典》2010版對(duì)22個(gè)品種43個(gè)制劑標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了控制[2]，本文按《中國(guó)藥典》2010版二部所規(guī)定的Sophdax G-10凝膠色譜法[3]，對(duì)注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉、存放于不同溫度條件下，對(duì)所產(chǎn)生聚合物的含量的影響進(jìn)行了研究，并就結(jié)果進(jìn)行探討。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：島津LC-20AT高效液相色譜儀；METTLER AE240電子天平；WE202電熱恒溫干燥箱

1.2 試藥：藍(lán)色葡聚糖2000（Sigma-Aldrich公司）；磷酸二氫鈉，磷酸氫二鈉（均為分析純）；頭孢呋辛對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)藥品生物制品檢定院，批號(hào)：130493-200704，純度：91.6%），頭孢噻肟對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)藥品生物制品檢定院，批號(hào)：130483-200904，純度：90.6%），頭孢曲松對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)藥品生物制品檢定院，批號(hào)：130480-200302，純度：84.1%），頭孢唑林對(duì)照品（來(lái)源：中國(guó)藥品生物制品檢定院，批號(hào)：0421-9603，純度：99.3%）；注射用頭孢呋辛鈉（某藥廠，批號(hào)：SH4121011，規(guī)格：0.75g），注射用頭孢噻肟鈉（某藥廠，批號(hào)：00330353，規(guī)格：1.0 g），注射用頭孢曲松鈉（某藥廠，批號(hào)：01720501，規(guī)格：2.0 g），注射用頭孢唑林鈉（某藥廠，批號(hào)：B130830110，規(guī)格：0.5 g），注射用氨曲南（某藥廠，批號(hào)：130319，規(guī)格：0.5 g）；試驗(yàn)用水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件。色譜柱：PX-G10葡聚糖凝膠色譜柱（天津譜祥科技有限公司，柱長(zhǎng)0.4 m，內(nèi)徑14 mm，40～120 μm）；流動(dòng)相：1、0.1 mol/L的磷酸鹽緩沖液（pH 7.0）[0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.1 mol/L磷酸二氫鈉溶液（61∶39）]，2、0.025 mol/L磷酸鹽緩沖液（pH 7.0）[0.025 mol/L磷酸氫二鈉溶液-0.025 mol/L磷酸二氫鈉溶液（61∶39）]；進(jìn)樣量為100 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm；流速：1.5 mL/min。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對(duì)照品溶液的配制：①精密稱取頭孢呋辛對(duì)照品適量，加水溶解并定量稀釋制成1 mL中約含40 μg的溶液。②精密稱取頭孢噻肟對(duì)照品適量，加水溶解并定量稀釋制成1 mL中約含100 μg的溶液。③精密稱取頭孢曲松對(duì)照品適量，加水溶解并定量稀釋制成1 mL中約含0.1 mg的溶液。④精密稱取頭孢唑林對(duì)照品適量，加水溶解并定量稀釋制成1 mL中約含10 μg的溶液。

2.2.2 系統(tǒng)適用性溶液的配制：取注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉0.2 g，至10 mL容量瓶中，分別《中國(guó)藥典》2010版二部中[3]規(guī)定濃度的藍(lán)色葡聚糖2000溶液溶解稀釋至刻度，搖勻。

2.2.3 供試品溶液的制備：①樣品處理：取樣品（注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉）分別置室溫下（22 ℃）放置7 d；置干燥箱中于37 ℃放置7 d；置干燥箱中于80 ℃放置24 h；取出，放冷至室溫（注：注射用頭孢呋辛鈉為過(guò)期不合格樣品）。②取經(jīng)處理的樣品（注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉）各0.2 g，精密稱定，分別置10 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻。③取未經(jīng)處理的樣品（注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉）各0.2 g，精密稱定，分別置10 mL量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，搖勻（注：注射用頭孢呋辛鈉為過(guò)期不合格樣品）。

2.2.4 測(cè)定法：按《中國(guó)藥典》2010版二部中[3]注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉聚合物項(xiàng)下的測(cè)定方法分別用兩種濃度的流動(dòng)相測(cè)定。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：①各樣品中的理論塔板數(shù)和拖尾因子均符合規(guī)定；②藍(lán)色葡聚糖2000峰的保留時(shí)間在兩種流動(dòng)相系統(tǒng)中的比值均符合規(guī)定；③在相應(yīng)色譜系統(tǒng)中對(duì)照品溶液中主峰與供試品溶液中的聚合物與藍(lán)色葡聚糖2000峰保留時(shí)間的比值均符合規(guī)定；④取對(duì)照溶液連續(xù)進(jìn)樣5次，其峰面積的RSD均符合規(guī)定；⑤高聚體的峰高與單體與高聚體之間的谷高比值：a.以pH 7.0的0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相時(shí)，4種樣品（注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉）均能很好的分離；b.pH 7.0的0.025 mol/L磷酸鹽緩沖液為流動(dòng)相時(shí)，除注射用頭孢曲松鈉外，其他3種樣品（注射用頭孢呋辛鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢唑林鈉）均能很好的分離（藥典規(guī)定流動(dòng)相濃度：注射用頭孢呋辛鈉0.025 mol/L、注射用頭孢噻肟鈉0.1 mol/L、注射用頭孢曲松鈉0.1 mol/L、注射用頭孢唑林鈉0.1 mol/L）。見(jiàn)圖1。

圖1

2.4 樣品測(cè)定，見(jiàn)表1。

3 討 論

3.1 通過(guò)以上試驗(yàn)證明，pH 7.0的0.025 mol/L磷酸鹽緩沖液作為流動(dòng)相時(shí)，注射用頭孢唑林鈉、注射用頭孢噻肟鈉均能很好的分離?？紤]到緩沖鹽對(duì)色譜柱有一定的影響，應(yīng)選用較低濃度的緩沖鹽作為流動(dòng)相，據(jù)此可對(duì)《中國(guó)藥典》2010版二部中注射用頭孢唑林鈉、注射用頭孢噻肟鈉聚合物測(cè)定方法中所選用的流動(dòng)相（原標(biāo)準(zhǔn)均以0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液作為流動(dòng)相）進(jìn)行優(yōu)化，改用0.025 mol/L磷酸鹽緩沖液作流動(dòng)相。

3.2 通過(guò)以上試驗(yàn)證明，固體狀態(tài)下注射用頭孢曲松鈉、注射用頭孢唑林鈉、注射用頭孢噻肟鈉、注射用頭孢呋辛鈉隨著處理溫度的升高，聚合物含量有不同程度的升高，但均未超出標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。而固體狀態(tài)下頭孢菌素類聚合速度與含水量和貯存溫度有關(guān)，低水分樣本，即使在較高溫度下貯存，高分子雜質(zhì)增加的速度也不快[4]。因此新疆氣候比較干燥（室內(nèi)濕度相對(duì)較?。?，對(duì)該品種的聚合物的產(chǎn)生影響不大。

3.2 通過(guò)此次試驗(yàn)樣品在固體狀態(tài)下，經(jīng)加熱處理，聚合物含量仍然在限度范圍之內(nèi)，由此可見(jiàn)溫度對(duì)以上頭孢類聚合物的影響不大，那么如果有效的控制頭孢類藥品的水分，即可降低聚合物的產(chǎn)生。藥典標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)頭孢聚合物檢查限度，沒(méi)有明確的臨床數(shù)據(jù)支持，該限度是否合理，有待于大家共同探討。

[1] 金少鴻,胡昌勤.β-內(nèi)酰胺類抗生素過(guò)敏反應(yīng)的研究進(jìn)展[J].中國(guó)新藥雜質(zhì),1994,4(3):38.

[2] 侯玉榮,袁濯佐.β-內(nèi)酰胺類抗生素中高分子雜質(zhì)的研究和檢測(cè)方法進(jìn)展[J].藥學(xué)與臨床研究,2012,20(3):240.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典二部[S].2010年版.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社2010:181.

[4] 胡昌勤,孫學(xué)蘭.固體狀態(tài)下頭孢菌素聚合反應(yīng)的探討[J].中國(guó)抗生素雜質(zhì),1991,16(2):106.

表1 樣品測(cè)定表

R917；R978.1+1

B

1671-8194（2017）12-0049-02