鋼巴特爾 劉 佳 扎 娜 劉志軍 王雯雯 天 河 菊 梅 康琪呼

(內(nèi)蒙古自治區(qū)呼倫貝爾職業(yè)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古 海拉爾 021000)

鄂溫克常用藥蘇都黃連抑菌作用的研究Δ

鋼巴特爾 劉 佳 扎 娜 劉志軍 王雯雯 天 河 菊 梅 康琪呼

(內(nèi)蒙古自治區(qū)呼倫貝爾職業(yè)技術(shù)學(xué)院，內(nèi)蒙古 海拉爾 021000)

目的：檢測(cè)蘇都黃連的抑菌作用、抑菌濃度及時(shí)間，為臨床用藥及開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。方法：采用肉湯稀釋法。結(jié)果：結(jié)果表明蘇都黃連對(duì)臨床常見(jiàn)病原菌有不同程度的抑菌作用。

蘇都黃連；藥敏試驗(yàn)；抑菌作用

蘇都黃連Sudu Coptis chinensis Franch是一種野生植物，是鄂溫克族民間治療感染性疾病的常用植物之一。全草入藥，味苦性寒，具有清熱解毒、消腫、鎮(zhèn)靜、止咳、燥膿、祛濕、利尿等功效。目前，蘇都黃連的應(yīng)用局限在呼倫貝爾市鄂溫克族民間。主要用于傷風(fēng)感冒、腹瀉、慢性胃炎、胃潰瘍等常見(jiàn)病、多發(fā)病的治療。外用可治療外傷感染、疥瘡等皮膚病[1-2]。本研究通過(guò)肉湯稀釋法(體外抑菌實(shí)驗(yàn))，研究蘇都黃連的抑菌范圍、抑菌時(shí)間及濃度，為開(kāi)發(fā)蘇都黃連蒙藥價(jià)值奠定基礎(chǔ)。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 菌株：化膿性鏈球菌CICC110464、肺炎鏈球菌CMCC(B)31001、金黃色葡萄球菌CICC21600、銅綠假單胞菌GDMCC1.2、普通變形桿菌GDMCC1.205、福氏志賀氏菌GDMCC1.238、大腸埃希氏菌GDMCC1.176，以上均屬標(biāo)準(zhǔn)株

1.2 藥物：蘇都黃連，采于7和9月份呼倫貝爾市鄂溫克自治區(qū)輝蘇木及陳巴爾虎旗鄂溫克鄉(xiāng)地區(qū)，全草，制成干品。分別稱取100g蘇都黃連干品，放入刻度燒杯內(nèi)，加水煎煮，過(guò)濾，并將過(guò)濾液加熱濃縮至100mL,即成1g/mL的藥液。高壓滅菌后冷藏備用。

1.3 培養(yǎng)基：雙倍肉湯、血清肉湯培養(yǎng)基、肉湯瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂培養(yǎng)基。

1.4 超凈工作臺(tái)(蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司，產(chǎn)品編號(hào)：20010406)，立式自動(dòng)電熱壓力蒸汽滅菌器(LDZX-40BI型，上海申安醫(yī)療器械廠)及其他無(wú)菌器材。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 取84支無(wú)菌試管，每42支為1組，分2組，分別觀察7月和9月份兩個(gè)時(shí)間段的蘇都黃連抑菌作用。

2.2 每6支試管為1排，共分7排，分別觀察化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌、福氏志賀菌、大腸桿菌的抑菌作用。

2.3 每排每個(gè)管加入雙倍肉湯0.9mL。

2.4 吸取1g/mL蘇都黃連液0.9mL，分別加入每組每排第1管內(nèi)與0.9mL雙倍肉湯打吹均勻，然后吸取0.9mL，向第2管移入與管內(nèi)0.9mL雙倍肉湯打吹均勻。如此連續(xù)稀釋至第5管，從第5管內(nèi)吸出0.9mL棄去。第6管作對(duì)照。觀察化膿鏈球菌及肺炎鏈球菌抑菌作用的管內(nèi)，每管加血清0.1mL。

2.5 每排管內(nèi)各加1：1000倍稀釋的上述菌液0.1mL(使用前將細(xì)菌接種在肉湯培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)12～18h),置37℃培養(yǎng)。

2.6 培養(yǎng)6h、12h、24h后，從各管內(nèi)分別取一接種環(huán)培養(yǎng)物，接種在肉湯瓊脂培養(yǎng)基及血瓊脂培養(yǎng)基上，置37℃培養(yǎng)18～24h后判斷結(jié)果。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

見(jiàn)表1、表2、表3。

4 討論

目前，中蒙藥體外檢測(cè)抑菌作用的方法有稀釋法、紙片法、管碟法及打孔法等。紙片法、管碟法及打孔法，具有方法簡(jiǎn)單，易掌握的優(yōu)點(diǎn)，但精確度不高。稀釋法可定量測(cè)定中藥對(duì)細(xì)菌、真菌的MIC、最小殺菌濃度(MBC)，測(cè)出抗菌中藥的最基本的藥效學(xué)數(shù)據(jù)[3]。為了排除蘇都黃連提取物中的雜質(zhì)成分、不同酸堿度等影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性及檢測(cè)最低抑菌濃度(MIC，)，本次實(shí)驗(yàn)采用了操作較繁瑣的肉湯稀釋法。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果上分析，蘇都黃連對(duì)乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、變形桿菌、福氏痢疾桿菌及大腸桿菌等臨床常見(jiàn)病菌，具有不同程度的抑菌作用和作用特點(diǎn)。蘇都黃連對(duì)乙型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌的抑菌作用較強(qiáng)，體外作用6h就開(kāi)始抑菌，12h后達(dá)到高峰，一直持續(xù)24h。最低抑菌濃度分別為125mg/mL和62.5mg/mL。實(shí)驗(yàn)觀察的每個(gè)時(shí)間段，250mg/mL濃度的蘇都黃連提取液對(duì)金黃色葡萄球菌有較好的抑菌作用。對(duì)變形桿菌6h內(nèi)抑菌作用較強(qiáng)。對(duì)大腸桿菌的抑菌作用12h時(shí)最強(qiáng)，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)抑菌作用逐漸減弱。對(duì)于銅綠假單胞菌和福氏志賀菌的抑菌作用較弱。與臨床應(yīng)用的角度分析，蘇都黃連較適合于乙型鏈球菌及肺炎鏈球菌感染引起的上呼吸道感染、氣管炎、肺炎等呼吸系統(tǒng)疾病及其他部位感染的治療。對(duì)于金黃色葡萄球菌化膿性感染、外傷感染及大腸桿菌、變形桿菌感染引起胃腸炎、泌尿系感染等有一定的治療作用。

表1 蘇都黃連6h的抑菌作用結(jié)果

表2 蘇都黃連12h的抑菌作用結(jié)果

表3 蘇都黃連24h的抑菌作用結(jié)果

注：“-”代表不長(zhǎng)菌落；“+”代表生長(zhǎng)1～10個(gè)菌落；“++”代表生長(zhǎng)10～50個(gè)菌落；“+++”代表生長(zhǎng)50～100個(gè)菌落；“++++”代表生長(zhǎng)100個(gè)以上菌落

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，7月和9月份2個(gè)不同時(shí)間段采集的蘇都黃連的抑菌作用基本相同?？梢哉J(rèn)為7～9月采集的蘇都黃連，均有抑菌作用。蘇都黃連除上述抑菌作用外，可能還有其他生理方面的作用以及毒副作用，需進(jìn)一步研究。

[1]扎娜，娜仁高娃.在鄂溫克用的蘇都黃連[J].中國(guó)蒙醫(yī)藥，2006,(2):46.

[2]賈敏如.李星煒.中國(guó)民族藥志[M].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2005.

[3]張學(xué)沛，朱盛山，等.評(píng)價(jià)中藥體外抑菌法的研究進(jìn)展[J].藥物評(píng)價(jià)研究，2014，37(2):189-190.

2017年1月4日收稿

R292.3

B

1006-6810(2017)04-0037-02

Δ內(nèi)蒙古自治區(qū)高等學(xué)?？茖W(xué)研究項(xiàng)目《鄂溫克用的蘇都黃連抑菌作用的研究》課題。項(xiàng)目編號(hào)NJZC376