孟 麗,劉 驪,2
(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,山東 泰安 271018;2.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建 福州 350000)
〈栽培技術(shù)〉
不同靈芝品種生物學(xué)特性的對(duì)比試驗(yàn)*
孟 麗1,劉 驪1,2
(1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,山東 泰安 271018;2.福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,福建 福州 350000)
靈芝是重要的食(藥)用真菌,其藥用價(jià)值在我國(guó)已有2 000多年的研究歷史,但隨著靈芝生產(chǎn)規(guī)模的不斷擴(kuò)大,出現(xiàn)了靈芝菌種混亂的現(xiàn)象。為了明確不同菌株間的親緣關(guān)系,以11個(gè)靈芝主栽品種為材料,分別對(duì)不同菌株的菌絲生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)勢(shì)、子實(shí)體形態(tài)等生物學(xué)特性進(jìn)行了比較研究,同時(shí)通過(guò)菌株間的拮抗反應(yīng)分析不同菌株間的遺傳關(guān)系,以明確其親緣關(guān)系,為靈芝生產(chǎn)和新品種選育提供前期基礎(chǔ)。
靈芝;生物學(xué)特性;拮抗反應(yīng)
靈芝 (Ganoderma lucidum) 隸屬于真菌界(Fungi) 擔(dān)子菌門(Basidiomycota) 傘菌綱(Agaricomycetes)多孔菌目(Polyporales) 靈芝科(Ganodermataceae)[1]。靈芝是重要的食 (藥) 用真菌,其藥用價(jià)值在我國(guó)已有2 000多年的研究歷史[2],因其富含各種三萜類化合物和多糖[3-5],具有抗血栓、降血壓、降血脂、鎮(zhèn)痛和提高機(jī)體免疫力之功效[6-8]。近年來(lái)靈芝的開發(fā)越來(lái)越受到人們的重視,人工栽培規(guī)模也越來(lái)越大,2015年我國(guó)靈芝栽培面積約為1萬(wàn)hm2,產(chǎn)量約12萬(wàn)t,產(chǎn)值16億美元,約占全球的75%,已成為世界靈芝主要出口國(guó)。但是由于我國(guó)食(藥)用菌品種登記制度尚未完善,因此靈芝的生產(chǎn)菌種比較混亂[9-13],同種異名和異名同種的現(xiàn)象十分普遍,這不僅給菌種的管理帶來(lái)困難,而且造成我國(guó)靈芝產(chǎn)品質(zhì)量難以保證,嚴(yán)重制約了我國(guó)靈芝產(chǎn)業(yè)的進(jìn)一步發(fā)展。本研究擬采用11個(gè)靈芝主栽品種,對(duì)其生物學(xué)特性和親緣關(guān)系進(jìn)行分析,旨在明確靈芝不同品種間生物學(xué)性狀差異及其親緣關(guān)系,為靈芝生產(chǎn)和新品種的選育提供前期基礎(chǔ)。
1.1 供試菌株
供試靈芝菌株和來(lái)源見表1。
表1 供試菌株和來(lái)源Tab.1 Strains and sources
1.2 供試培養(yǎng)基配方
馬鈴薯綜合液體培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、硫酸鎂1.5 g、磷酸二氫鉀3 g、葡萄糖20 g,定容至1 000 mL,pH自然,121℃高壓蒸汽滅菌30 min。
PDA固體培養(yǎng)基:馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g,定容至1 000 mL,pH自然,121℃高壓蒸氣滅菌30 min。
栽培培養(yǎng)基:木屑74%、玉米粉24%、石膏1%、蔗糖1%。含水量保持在65%,121℃高壓蒸氣滅菌120 min。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 栽培條件
菌袋置于26℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行避光培養(yǎng)。待菌絲長(zhǎng)滿菌袋后進(jìn)行出菇管理。出菇溫度保持在26℃~28℃,空氣相對(duì)濕度85%~95%。
1.3.2 拮抗試驗(yàn)
將11個(gè)靈芝菌株兩兩組合,分別接入同一個(gè)平板內(nèi),置于26℃下恒溫培養(yǎng),每個(gè)組合3次重復(fù),每天觀察記錄菌絲的生長(zhǎng)情況。
2.1 菌絲生長(zhǎng)情況比較
在相同條件下,26℃避光培養(yǎng)不同靈芝菌株的菌絲體,測(cè)定菌絲的生長(zhǎng)速度和菌絲直徑,結(jié)果見圖1。
圖1 菌絲生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)勢(shì)比較Fig.1 Comparative examination of mycelial growth rate and growth potential
赤芝8號(hào)菌絲生長(zhǎng)速度最快,紅芝(長(zhǎng)白山)菌絲生長(zhǎng)速度最慢,但菌絲粗壯。赤芝8號(hào)和泰芝菌株菌絲生長(zhǎng)速度快,菌絲粗壯、濃白,綜合性狀最好,其次是鹿角H507、黃芝248、赤芝H504、赤芝H506。
2.2 靈芝子實(shí)體和孢子形態(tài)比較
對(duì)靈芝菌蓋以及孢子的形態(tài)觀察分析,見表2。
菌蓋形狀大致分為3種類型,扇形、不規(guī)則圓形或近半圓形、珊瑚形;菌蓋顏色主要為黃褐色、黃棕色和紫黑色;擔(dān)孢子形態(tài)大致可分為卵圓形、基部平截,橢圓形、基部平截,長(zhǎng)橢圓形、基部突起。11個(gè)菌株中赤芝8號(hào)和泰芝產(chǎn)生的孢子最多。
2.3 拮抗試驗(yàn)
拮抗試驗(yàn)結(jié)果見圖2。圖2中+表示2個(gè)菌株親和性較強(qiáng),拮抗反應(yīng)較弱,可以生長(zhǎng)在一起;++表示2個(gè)菌株間產(chǎn)生溝壑現(xiàn)象,具有拮抗反應(yīng);+++表示2個(gè)菌株間溝壑現(xiàn)象明顯或交界處產(chǎn)生隆起并產(chǎn)生色素,具有明顯的拮抗反應(yīng)。圖2中1為赤芝H504,2為鹿角H507,3為日本赤芝,4為赤芝H505,5為紅芝(長(zhǎng)白山),6為紫芝H503,7為黃芝248,8為赤芝8號(hào),9為赤芝H506,10為慧中靈芝,11為泰芝。
55組試驗(yàn)中有27組拮抗現(xiàn)象非常明顯,說(shuō)明親緣關(guān)系較遠(yuǎn),有9組拮抗現(xiàn)象較弱,2個(gè)菌株的菌絲體可以生長(zhǎng)在一起,編號(hào)分別是(1,2)、(1,3)、(1,8)、(4,8)、(4,9)、(4,10)、(4,11)、(5,10)、(8,11),說(shuō)明這九組的親緣關(guān)系較近。
本研究通過(guò)對(duì)11個(gè)靈芝菌株菌絲生長(zhǎng)速度、生長(zhǎng)勢(shì)及出菇性狀的統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示,赤芝8號(hào)、泰芝、赤芝H506和赤芝H504,菌絲體生長(zhǎng)速度快,長(zhǎng)勢(shì)好,子實(shí)體多單生,菌蓋大,菌肉厚,產(chǎn)孢量多,可作為生產(chǎn)用菌種;而鹿角H507多叢生,菌柄較長(zhǎng),黃芝248、紫芝H503、赤芝H505、日本赤芝子實(shí)體規(guī)整,芝型好,并且產(chǎn)孢量少,可作為觀賞靈芝栽培菌種。紅芝(長(zhǎng)白山)和慧中靈芝菌絲萌發(fā)時(shí)間晚,生長(zhǎng)勢(shì)弱,抗性低,可以作為種質(zhì)資源進(jìn)行保藏。
表2 靈芝菌蓋和擔(dān)孢子的形態(tài)特征Tab.2 Morphological characteristics of pileus and basidiospores
圖2 不同靈芝菌株間的拮抗反應(yīng)Fig.2 Antagonistic effect among different commercial strains
[1]趙繼鼎,張小清.中國(guó)真菌志第十八卷:靈芝科[M].北京:科學(xué)出版社,2000.
[2]戴玉成,曹云,周麗偉,等.中國(guó)靈芝學(xué)名之管見[J].菌物學(xué)報(bào),2013,32(6):947-952.
[3]于華崢,劉艷芳,周帥,等.靈芝子實(shí)體、菌絲體及孢子粉中多糖成分差異比較研究[J].菌物學(xué)報(bào),2016,35(2):170-177.
[4]羅俊,林志彬.靈芝三萜類化合物藥理作用研究進(jìn)展[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),2002,37(7):574-578.
[5]王芳生,蔡輝,楊峻山,等.赤芝子實(shí)體中靈芝酸類成分的研究[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1997,22(6):447-450.
[6]張曉云,楊春清.靈芝的化學(xué)成分和藥理作用[J].現(xiàn)代藥物與臨床,2006,21(4):152-155.
[7]張玲芝.靈芝多糖降血糖的機(jī)理探討[D].杭州:浙江大學(xué),2002.
[8]林志彬,王鵬云.靈芝孢子及其活性成分的藥理研究[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2006,38(5):541-547.
[9]趙明文,陳明杰,王南,等.靈芝生產(chǎn)用種的親緣關(guān)系研究[J].南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,26(3):60-63.
[10]唐傳紅,張勁松,陳明杰,等.用拮抗試驗(yàn)和RAPD對(duì)靈芝屬菌株進(jìn)行分類研究[J].微生物學(xué)通報(bào),2005,32(5):72-76.
[11]羅聯(lián)中,林樹錢,謝寶貴,等.靈芝菌株的DNA指紋分析[J].食用菌學(xué)報(bào),2005,12(3):7-13.
[12]Zheng LY,Jia DH,Fei XF,et al.An assessment of the genetic diversity within Ganoderma strains with AFLP and ITS PCR-RFLP[J].Microbiol Res,2009,164(3):312-321.
[13]Moncalvo.J.M.,Wang,H.H.,Hseu,R.S.Phylogenetic relationships in Ganoderma inferred from the intermal transcribed spacers and 25S ribosomal DNA sequences[J].Mycologia,1995,87(2):223-238.
A Comparative Examination on Some Biological Characteristics of Different Ganoderma Strains
MENG Li1,LIU Li1,2
(1.College of Plant Protection,Shandong Agricultural University,Taian 271018,China; 2.College of Life Sciences,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350000,China)
Ganoderma is an important edible and medicinal mushroom.It has been recognized as a medicinal mushroom for over 2 000 years in China.However,the strains confusion became more and more serious.In order to define the genetic relationship between different strains,antagonistic effect was employed to analyze the genetic relationship among 11 popular commercial strains of Ganoderma.In addition,the mycelial growth rate,growth potential and morphological characteristics of fruiting body were compared in this study.These results will provide preliminary basis for Ganoderma cultivation and breeding.
Ganoderma;biological characteristics;antagonistic effect
S646.9
A
1003-8310(2017)03-0026-03
10.13629/j.cnki.53-1054.2017.03.006
山東省自然科學(xué)基金(ZR2016CL13);山東農(nóng)業(yè)大學(xué)校青年科技創(chuàng)新基金(23855);中國(guó)博士后科學(xué)基金(76440)。
孟麗(1984-),女,博士,講師,主要從事食用菌遺傳育種研究。E-mail:mengli0121@126.com
2017-03-11