曹清，程波，聶靜，樊洪，徐夢鑫，李玉玲

（九江市第三人民醫(yī)院，江西 九江 332000）

COX-2介導腫瘤相關成纖維細胞在乳腺癌進展中的作用研究

曹清，程波，聶靜，樊洪，徐夢鑫，李玉玲

（九江市第三人民醫(yī)院，江西 九江 332000）

目的 探討COX-2介導腫瘤相關成纖維細胞在乳腺癌進展中的作用，以提高乳腺癌的診治水平。方法 隨機選取2005年12月～2015 年12月乳腺病變微創(chuàng)手術或者外科手術標本：癌旁正常乳腺組織50例，標本均取自乳腺癌術后標本，同時距腫物5cm外的正常乳腺組織；良性病變組織80例，導管原位癌54例及浸潤性導管癌135例，標本均取自于乳腺病變微創(chuàng)手術及外科手術術后標本，檢測標本α-SMA和COX-2在乳腺各病變組織中的表達。結果 與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，導管原位癌組織α-SMA陽性30例（陽性率55.55%）、浸潤性導管癌組織α-SMA陽性70例（陽性率51.85%），腫瘤相關成纖維細胞陽性率相對較高，表明腫瘤相關成纖維細胞在后兩者中活化、累積。與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，導管原位癌組織COX-2陽性28例（陽性率51.85%）、浸潤性導管癌組織中COX-2陽性73例（陽性率54.07%），COX-2陽性率相對較高，表明COX-2在后兩者中過表達。COX-2在乳腺癌過表達與腫瘤相關成纖維細胞活化、累積相關。結論COX-2介導腫瘤相關成纖維細胞的過表達能夠提示乳腺癌進展情況，在未來研究診斷和治療乳腺癌具有十分重要的臨床價值

環(huán)氧化酶-2；乳腺癌；腫瘤相關成纖維細胞

目前，乳腺癌已逐漸成為全球女性最常見的惡性腫瘤，其導致的女性死亡率位居第二[1]?？芍橄侔┮呀泧乐赝{到全球女性的身體健康。乳腺癌的發(fā)病機理主要是腫瘤細胞與腫瘤周圍微環(huán)境相互作用的結果[2]。腫瘤相關成纖維細胞（CAFs）作為腫瘤微環(huán)境中的主要成分之一，在被活化之后，會釋放一部分腫瘤相關細胞因子（比如PDGF、EGF、MMP-2），進而促進癌細胞的增殖和轉移[3]。環(huán)氧化酶（COX-2）在前列腺素合成中作為一個誘導酶。在乳腺癌的組織中COX-2被檢測到有高表達，可以促進線性膠原纖維的產生，也可以促進DCIS向著浸潤性癌的發(fā)展[4]。本文中旨在探討COX-2介導腫瘤相關成纖維細胞在乳腺癌進展中的作用及兩者的相關聯系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機選取2005年12月～2015年12月乳腺病變微創(chuàng)手術或者外科手術標本：癌旁正常乳腺組織50例，標本均取自乳腺癌術后標本，同時距腫物5cm外的正常乳腺組織；良性病變組織80例，導管原位癌54例及浸潤性導管癌135例，標本均取自于乳腺病變微創(chuàng)手術及外科手術術后標本。

1.2 方法

1.2.1 檢測α-SMA在乳腺各病變周圍組織中的表達，初步評定成纖維細胞在各病變組織中的活化、累計情況；檢測COX-2在乳腺各病變組織中的表達。

1.2.2 統(tǒng)計分析成纖維細胞活化和COX-2兩者在乳腺癌進展中分子之間的聯系；COX-2的表達與臨床病理參數之間的關系。

1.3 觀察指標 α-SMA以及COX-2在鏡下的胞漿呈現出棕黃色時為陽性細胞，由兩名經驗豐富的病理醫(yī)生在鏡下觀察并判定結果。通過Q550CW圖像采集[5]分析系統(tǒng)把切片上的陽性染色信號轉化成灰度并進行分析，把組織切片空白處射入值作為定標，每張切片的測定至少要5個高倍鏡視野，取其平均值作為測定值，最后用凈灰度值作為最終的統(tǒng)計數據，并統(tǒng)計分析。

1.4 統(tǒng)計學方法 本研究數據均用SPSS17.0統(tǒng)計軟件處理，計量資料采用“±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，腫瘤相關成纖維細胞在導管原位癌、浸潤性導管癌組織中陽性率相對較高，表明腫瘤相關成纖維細胞在后兩者中活化、累積。與癌旁正常乳腺組織、良性病變組織相比，COX-2在導管原位癌、浸潤性導管癌組織中 陽性率相對較高，表明COX-2在后兩者中過表達。見表1。

表1 成纖維細胞在各病變組織中的活化和累積情況Table1 Activation and accumulation of fibroblasts in various pathological changes

3 討論

乳腺癌的發(fā)展是一個多因素、多步驟累積的過程，之前的研究一直認為乳腺導管癌是從扁平上皮不典型增生開始的，進一步演變?yōu)椴坏湫偷膶Ч茉錾蟀l(fā)展成導管原位癌，最后成為可致命性的浸潤性導管癌[6]。其發(fā)展過程也給了我們一個更加直觀的認識過程，在之前的研究中，科研人員以及相關學者主要將目光集中在乳腺上皮細胞本身的分子遺傳學上，找尋乳腺癌細胞本身的分子基因的改變[7]。但是，隨著研究的進行，更多的證據證明乳腺癌的發(fā)生發(fā)展不只是癌細胞本身。腫瘤微環(huán)境也扮演著不可忽視的重要作用，其本身就是一種復雜的概念，它主要包括炎癥因素、基底膜、血管微環(huán)境、成纖維細胞等，他們釋放的相關細胞因子和乳腺癌上皮細胞本身構成了一個分子相互作用網絡。因此，在分子水平上，揭示癌細胞與腫瘤微環(huán)境之間的聯系給乳腺癌的研究者們提供了一種新的研究方向和思路。

乳腺密度的增加也被認為是患乳腺癌的風險因素，其相關檢測也經常用于預測患乳腺癌的風險[8]。乳腺密度和乳腺組織中成纖維細胞有密切的聯系。腫瘤相關成纖維細胞（CAFs）作為腫瘤微環(huán)境中的主要成份，與正常乳腺組織中的成纖維細胞（Fs）相比，具有自身特有的生物特征，腫瘤中的CAFs被活化后，α-SMA會呈陽性。在之前的研究中，被活化的基質可以為乳腺腫瘤細胞提供結構及營養(yǎng)，使組織重組，在自身基因改變和相關活化基質的雙重影響下，乳腺上皮細胞被激活，從而轉變成惡性腫瘤細胞。隨之出現無限增殖、浸潤及轉移[9]。

環(huán)氧化酶（COX-2）可以參與多種腫瘤的發(fā)生過程，比如有結腸癌、胃癌、肝癌、膀胱癌等的癌組織中，其可呈現高表達。在乳腺癌的組織中，研究人員也可以檢測出COX-2的高表達，它的表達的程度和不良的預后有關。動物的研究發(fā)現，COX-2的過表達可以促進血管再生、腫瘤細胞的增殖和侵襲，促進了腫瘤的發(fā)展和轉移[10]。它的表達會隨著腫瘤發(fā)展和轉移階段的增強而表達增強。COX-2的過表達和乳腺密度升高有關，基因表達分析表明，PTGS2在高密度的膠原基質乳腺上皮細胞中表達上升。COX-2的過表達可以促使線性膠原纖維產生，與此同時推動了DCIS向著浸潤性癌的方向發(fā)展。這一觀點也得到了近期研究[11-12]中的證實。

本研究中發(fā)現COX-2在乳腺癌過表達與腫瘤相關成纖維細胞活化、累積相關。COX-2過表達可以促進血管再生、腫瘤細胞的增殖和侵襲，促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉移。COX-2介導腫瘤相關成纖維細胞，對于治療乳腺癌見效快，成功率高。

綜上所述，COX-2介導腫瘤相關成纖維細胞的過表達能夠提示乳腺癌進展情況，在未來研究診斷和治療乳腺癌具有十分重要的臨床價值。

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COX-2 mediated tumor associated fibroblasts in the progression of breast cancer

Cao Qing,Cheng Bo,Nie Jing,Fan HongXu Meng-xin,Li Yu-ling
（Jiujiang Third People's Hospital,Jiujiang,Jiangxi，332000，China）

Objective To investigate the role of COX-2 in the progression of breast cancer,and to improve the level of diagnosis and treatment of breast cancer.Methods Randomly selectedsurgical specimens from the minimally invasive breast lesions surgery orbreast surgery from December 2005 to December2015.Including 50 cases of adjacent normal breast tissue specimens,which were taken from patients with breast cancerand normal breast tissue from the tumor outside 5cm,80 cases of benign lesions,54 cases of ductal carcinoma in situ and 135 cases of invasive ductal carcinoma.Samples were all taken from postoperative minimally invasive breast lesionsand breast surgery.Tested the expression of a-SMA and COX-2 in breast lesions.Results Compared with normal breast tissues and benign disease tissues,the positiveexpression ofa-SMA in ductal carcinoma in situwas 30 cases(positive rate 55.55%)and positiveexpression ofa-SMA in infiltrating ductal carcinomawas 70 cases(positive rate 51.85%),tumor associated fibroblasts showed high positive rate,which showed tumor associated fibroblasts cells activation and accumulation in the latter two groups. Compared with benign disease tissues and normal breast tissues,COX-2 positivecases number in ductal carcinoma in situ was28(positive rate 51.85%)and in invasive ductal carcinoma was 73(positive rate 54.07%),the positive rate of COX-2 is relatively high in the latter two groups,which showed that over expression of COX-2 in the latter two groups.Overexpression of COX-2 in breast cancer was associated with activation and accumulation of tumor associated fibroblasts.Conclusion The overexpression of COX-2 mediated tumor associated fibroblasts can prompt the development of breast cancer.It is importance to diagnose and treat breast cancer in the future.

Cox-2;Breast cancer;Tumor associated fibroblasts

10.3969/j.issn.1009-4393.2017.06.006