張春年，王建中

(贛州市人民醫(yī)院，江西 贛州 341400)

·論 著·

介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的caspase- 3在卵巢癌中的表達(dá)和放療敏感性的關(guān)聯(lián)性研究

張春年，王建中

(贛州市人民醫(yī)院，江西 贛州 341400)

目的:研究介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的caspase- 3在卵巢癌中的表達(dá)和放療敏感性的關(guān)系。方法：通過(guò)對(duì)臨床不同時(shí)期卵巢組織樣本的收集及凋亡相關(guān)因子mRNA和蛋白的檢測(cè)，以及免疫組化法定位、定量caspase- 3在不同時(shí)期卵巢癌中的變化來(lái)研究不同時(shí)期卵巢癌細(xì)胞凋亡情況。通過(guò)射線照射細(xì)胞然后對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)，以研究不同種類卵巢癌細(xì)胞的放射敏感性。結(jié)果：免疫組化、PCR、Western Blot結(jié)果顯示，隨著卵巢細(xì)胞的癌變，凋亡的存活基因bcl2被激活，凋亡致死基因bax被抑制，凋亡執(zhí)行蛋白caspase- 3數(shù)量下降。同時(shí)射線照射和細(xì)胞統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，不同類型卵巢癌細(xì)胞對(duì)放射敏感性不同。結(jié)論：caspase- 3蛋白數(shù)量隨著卵巢癌變而下降，而對(duì)于卵巢癌變細(xì)胞來(lái)說(shuō)，caspase- 3蛋白含量越多，放射敏感性越強(qiáng)。

卵巢癌； 細(xì)胞凋亡； caspase- 3； 放射敏感性

卵巢惡性腫瘤是女性生殖器官最常見(jiàn)的腫瘤之一，僅次于宮頸癌和子宮體癌[1]，其死亡率排在婦科腫瘤首位，加之早期癥狀不典型，對(duì)婦女造成嚴(yán)重的危害[2]。卵巢癌以腺癌為主，包括三大類：一是漿液性腺癌，最常見(jiàn)的原發(fā)性卵巢惡性腫瘤，占所有卵巢惡性腫瘤的40%～60%;二是黏液性腺癌，發(fā)病率占惡性腫瘤的10%～20%；三是透明細(xì)胞癌，原發(fā)性卵巢惡性腫瘤中發(fā)生率約為6%。不同分類的卵巢癌放療敏感性差別較大[3]，因此研究了解不同種類卵巢癌對(duì)放療敏感性的差異尤為重要[4]。

細(xì)胞死亡的方式有凋亡和壞死兩種[5]。凋亡是細(xì)胞編程性死亡，正常存在于細(xì)胞生長(zhǎng)和衰老過(guò)程中，是平衡組織內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的重要機(jī)制[6]。惡性腫瘤細(xì)胞一旦形成，凋亡機(jī)制受到破壞，癌細(xì)胞無(wú)限增殖與轉(zhuǎn)移到各個(gè)組織和器官，給人體帶來(lái)毀滅性影響。放療是治療癌癥的常用手段，是通過(guò)放射誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的清除和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的，但是不同的癌變器官、不同組織類型對(duì)放射敏感性差異較大[7]。利用放療治療卵巢癌的同時(shí)，首先要了解不同類型卵巢癌對(duì)放療的敏感性[8]。大量資料顯示，在腫瘤細(xì)胞凋亡中casepase被激活[9]。caspase- 3作為caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)下游最關(guān)鍵的凋亡執(zhí)行者，在腫瘤細(xì)胞治療中發(fā)揮重要作用[10]。本研究主要探討卵巢癌細(xì)胞中caspase- 3的表達(dá)情況與放射敏感性的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

1.1.1 試劑 RNA抽提試劑Trizol和M- MLV反轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)自Sigma公司；NC膜購(gòu)自Millipore公司；配制蛋白染色液的麗春紅、三氯乙酸和磺基水楊酸均購(gòu)自Invitrogen公司；蛋白印跡化學(xué)發(fā)光試劑SuperSignal? West Pico Chemiluminescent Substrate購(gòu)自Thermo Scientific公司；X- Omat光片購(gòu)自Kodak公司。DMEM培養(yǎng)基購(gòu)自Yazyme公司；胎牛血清(FBS, Fetal Bovine Serum)購(gòu)自GIBCO公司；Trypin、青鏈霉素(penicillin- streptomycin)和L- Glutamine均購(gòu)自Sigma公司；細(xì)胞培養(yǎng)皿、凍存管和離心管購(gòu)自Corning公司。

1.1.2 儀器 微量移液器購(gòu)自Eppendorf公司;高速離心機(jī)購(gòu)自Beckman公司;PCR儀購(gòu)自Bio- Rad;精密天平購(gòu)自Mettler Toledo公司;熒光顯微鏡Olympus IX71購(gòu)自日本Olympus公司;實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)購(gòu)自Applied Biosystems公司;4/-20 ℃冰箱購(gòu)自海爾公司;垂直電泳槽、濕轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)膜儀和配套電源均為國(guó)內(nèi)公司產(chǎn)品，X光片洗片機(jī)購(gòu)自Kodak公司；熒光顯微鏡為Olympus公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 樣本收集 收集本院患者正常卵巢組織14例、卵巢癌前組織17例、卵巢癌變組織21例。每例均取兩塊組織，一塊用甲醛固定，備于制作蠟塊；另一塊立即保存于-180 ℃的液氮中，備于提取mRNA和蛋白。

1.2.2 免疫組化法檢測(cè) 脫蠟、水化組織切片，根據(jù)所應(yīng)用的一抗的特殊要求對(duì)組織抗原進(jìn)行修復(fù)。3%H2O2去離子水孵育10 min，以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。緩沖液PBS沖洗，2 min 3次。滴加一抗，37 ℃孵育2 h，PBS沖洗，2 min 3次。滴加試劑1，室溫孵育20 min，PBS沖洗，2 min 3次。滴加試劑2，室溫孵育25 min，PBS沖洗，2 min 3次。最后一步，應(yīng)用DAB溶液顯色。

1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng) 3AO為人黏液性卵巢癌細(xì)胞系，skov3為人漿液性卵巢癌細(xì)胞系，ES- 2為人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞系，購(gòu)自上海賽齊生物工程有限公司。使用含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液靜置培養(yǎng)于保持37 ℃、含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱，DMEM完全培養(yǎng)液中含有100 U·ml-1的青霉素及100 μg·ml-1的鏈霉素。

1.2.4 Trizol一步法提取mRNA 先取50～100 mg卵巢組織加入1 ml Trizol液，研磨成液體后室溫放置5 min，再以每1 ml Trizol液加入0.2 ml氯仿，注意要蓋緊離心管，用手劇烈搖蕩離心管15 s。等到分層后取最上層水相轉(zhuǎn)移至新的離心管，然后按每1 ml Trizol液加0.5 ml異丙醇，再室溫放置10 min，然后離心機(jī)中12 000 g離心10 min。丟棄上清液，按每1 ml Trizol液加入1 ml 75%乙醇，振蕩混勻，樣品4 ℃下7 500 g離心5 min。再次棄去上清液，真空干燥5～10 min。最后計(jì)算濃度與純度，用75%乙醇溶解mRNA，置于-80 ℃ 冰箱中保存?zhèn)溆?，行RT- PCR檢測(cè)。

1.2.5 免疫印跡法檢測(cè) 用RIPA裂解細(xì)胞后進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定，再用6 XLoading制樣，高溫蛋白變性。用10%的SDS- PAGE膠上樣電泳,80 V恒壓先跑30 min左右，待蛋白進(jìn)入分離膠后改120 V恒壓再跑直至得到想要的蛋白條帶。電泳結(jié)束后進(jìn)行濕轉(zhuǎn)，以300 mA恒流將蛋白電轉(zhuǎn)到NC膜上，用含5%脫脂奶粉的TBST溶液封閉NC膜2 h。封閉結(jié)束后加入配制在含5%BSA的TBST中的一抗，4 ℃過(guò)夜。第2天在含5%脫脂奶粉的TBST的二抗(1∶2 000～1∶3 000)中孵育，室溫結(jié)合3h，再用TBST洗膜3次。加入顯色底物反應(yīng)3min，用保鮮膜包好壓片，曝光顯影，可以根據(jù)結(jié)果調(diào)整曝光時(shí)間。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

定量數(shù)據(jù)都以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用GraphpadPrism4.0軟件進(jìn)行One-wayAnouva統(tǒng)計(jì)分析，當(dāng)P<0.05時(shí)認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 檢測(cè)不同時(shí)期卵巢組織中凋亡相關(guān)因子mRNA表達(dá)情況

凋亡是放療調(diào)節(jié)細(xì)胞的主要機(jī)制，所以我們首先檢測(cè)不同時(shí)期卵巢組織中凋亡的情況。細(xì)胞凋亡發(fā)生的原因和途徑是復(fù)雜多樣的，許多基因參與細(xì)胞凋亡的基因調(diào)控，包括致死基因和存活基因。bcl- 2家族成員在細(xì)胞凋亡的基因調(diào)控過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用[9]，是一類抗細(xì)胞凋亡基因，代表基因是bcl- 2基因[11]；另一類是促細(xì)胞凋亡基因，代表基因是bax基因[12]，他們通過(guò)激活一系列下游基因發(fā)揮調(diào)節(jié)凋亡作用[13]。caspase- 3是caspase級(jí)聯(lián)反應(yīng)下游最關(guān)鍵的凋亡執(zhí)行者，它的表達(dá)情況也非常重要。因此，我們主要檢測(cè)了bcl- 2[9]、bax、caspase- 3三者不同時(shí)期卵巢組織中mRNA表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著卵巢組織癌變致死基因bax的mRNA表達(dá)量顯著下調(diào)，同時(shí)存活基因bcl- 2的mRNA表達(dá)量顯著上調(diào)，caspase- 3的mRNA表達(dá)情況與bax相同，顯著下調(diào)，說(shuō)明凋亡通路被抑制(圖1)。

*P<0.05;**P<0.01

圖1 不同時(shí)期卵巢組織中凋亡相關(guān)因子mRNA表達(dá)情況

Fig 1 Expression of apoptosis related factor mRNA in ovarian tissues at different stages

2.2 檢測(cè)不同時(shí)期卵巢組織中凋亡相關(guān)因子蛋白的表達(dá)情況

為了驗(yàn)證以上結(jié)果，我們檢測(cè)了bcl2、bax、caspase- 3三者不同時(shí)期卵巢組織中蛋白表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，卵巢組織癌變致死基因bax的蛋白表達(dá)量顯著下調(diào)，同時(shí)存活基因bcl2的蛋白表達(dá)顯著上調(diào)，caspase- 3的蛋白表達(dá)情況與bax相同，顯著下調(diào)，證明卵巢癌中凋亡通路確實(shí)被抑制，癌細(xì)胞進(jìn)入無(wú)限增殖狀態(tài)(圖2)。

2.3 用免疫組化方法定量不同時(shí)期卵巢組織中caspase- 3表達(dá)

將正常卵巢組織、卵巢癌前組織、卵巢癌變組織甲醛固定，制作成蠟塊，用于免疫組化檢測(cè)。在正常卵巢組織中caspase- 3表達(dá)量高，主要分布在細(xì)胞核周圍，卵巢組織排列和細(xì)胞的形態(tài)相對(duì)整齊(圖3A)。在卵巢癌變前組織中，caspase- 3表達(dá)量明顯下降，且卵巢組織多空泡化，結(jié)構(gòu)不完整(圖3B)。在卵巢癌變組織中caspase- 3幾乎不表達(dá)，且卵巢組織結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞，全部為細(xì)胞核(圖3C)。統(tǒng)計(jì)不同時(shí)期卵巢癌病理中caspase- 3陽(yáng)性率，正常卵巢組織caspase- 3表達(dá)陽(yáng)性率高，卵巢癌前組織、卵巢癌變組織病例caspase- 3表達(dá)陽(yáng)性率低(表1)。

圖2 不同時(shí)期卵巢組織中凋亡相關(guān)因子蛋白的表達(dá)情況

Fig 2 Expression of apoptosis related factors in ovarian tissues at different stages

A.正常卵巢組織；B.卵巢癌變前組織；C.卵巢癌變組織

A.Normal ovarian tissue; B.Ovarian precancerous tissue; C.Ovarian cancer tissue

圖3 caspase- 3在卵巢組織中的表達(dá)

Fig 3 Expression of caspase- 3 in ovarian tissue

表1 caspase- 3在不同期卵巢組織中表達(dá)結(jié)果

Tab 1 Statistical results of caspase- 3 expression in different stages of ovarian tissue

時(shí) 期ncaspase?3表達(dá)量/例-+陽(yáng)性率/%正常卵巢組織1411392．8卵巢癌變前組織1714321．4卵巢癌變組織2117423．5

2.4 不同類型卵巢癌細(xì)胞中caspase- 3表達(dá)情況

人黏液性卵巢癌細(xì)胞3AO中caspase- 3蛋白表達(dá)量最高，人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞skov3中caspase- 3蛋白表達(dá)量最低，人卵巢透明細(xì)胞癌細(xì)胞ES- 2中的表達(dá)量居中(圖4)。

圖4 不同類型卵巢細(xì)胞中凋亡相關(guān)因子蛋白的表達(dá)情況

Fig 4 Expression of apoptosis related factors in different types of ovarian cells

2.5 不同類型卵巢癌細(xì)胞對(duì)放療的敏感性

用6Galxy照射細(xì)胞12、24 h后檢測(cè)細(xì)胞的數(shù)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)24 h后人黏液性卵巢癌細(xì)胞3AO 數(shù)量下降最顯著(圖5)。

*P<0.05;**P<0.01

圖5 6Galxy照射細(xì)胞12、24 h后不同類型卵巢細(xì)胞數(shù)量

Fig 5 Different types of ovarian cell number after 6Galxy irradiated cells 12，24 h

2.6 卵巢癌細(xì)胞過(guò)表達(dá)caspase- 3對(duì)放射敏感性的影響

caspase- 3過(guò)表達(dá)后bcl2蛋白量減少,bax蛋白量增加，說(shuō)明凋亡被再次激活(圖6)。檢測(cè)人黏液性卵巢癌細(xì)胞3AO照射6Galxy 12、24 h后細(xì)胞的數(shù)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)caspase- 3過(guò)表達(dá)后凋亡通路加強(qiáng)，癌細(xì)胞對(duì)放射線敏感性變強(qiáng)(圖7)。

圖6 人黏液性卵巢癌細(xì)胞3AO過(guò)表達(dá)caspase- 3后凋亡因子變化

Fig 6 Changes of apoptosis factor after caspase- 3 overexpression of 3AO in human mucinous ovarian cancer cells

3 討 論

在2015年,估計(jì)有21 290例卵巢癌發(fā)生在美國(guó)，大多數(shù)卵巢癌女性發(fā)現(xiàn)時(shí)已為晚期[14]。只有45.6%的女性在與卵巢癌的斗爭(zhēng)中能存活疾下來(lái),預(yù)計(jì)2015年，就有14 180人死于卵巢癌[15]。美國(guó)黑人女性因不容易診斷卵巢相關(guān)疾病而最后大多死于卵巢癌,因此美國(guó)黑人女性的生存時(shí)間比白人女性短，即使發(fā)病階段和時(shí)期相同。大多數(shù)卵巢癌被認(rèn)為是散發(fā)病例,他們發(fā)生在沒(méi)有明顯的卵巢癌家族史的婦女,沒(méi)有找一個(gè)能增強(qiáng)卵巢癌易感性的遺傳突變基因[4]。因此，關(guān)于卵巢癌的研究與治療一直比較局限，能在原有治療上增強(qiáng)和完善治療效果尤為重要。

*P<0.05

圖7 人黏液性卵巢癌細(xì)胞3AO過(guò)表達(dá)caspase- 3后對(duì)放射的敏感性

Fig 7 The radiation sensitivity of human mucinous ovarian cancer cell line 3AO after caspase- 3 overexpression

放療是比較傳統(tǒng)的治療卵巢疾病的方法，但是因?yàn)椴煌穆殉舶┳冾愋蛯?duì)放療的敏感性不同，因此作者主要研究不同類型卵巢癌對(duì)放療敏感性的問(wèn)題。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，黏液性卵巢癌比漿液性卵巢癌細(xì)胞和卵巢透明細(xì)胞癌對(duì)放射敏感性要強(qiáng)，并且放射敏感性與凋亡執(zhí)行蛋白caspase- 3的含量相關(guān)[16]。

細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)是非常復(fù)雜的,參與的分子非常多,還有很多需要我們進(jìn)一步的探索[17]。caspase- 3一直被認(rèn)為是介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的關(guān)鍵性蛋白酶，也存在一些研究證明caspase- 3能調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)[9]。caspase- 3蛋白是普遍存在的,隨著從癌前病變發(fā)展至癌caspase- 3蛋白表達(dá)量基本呈遞減趨勢(shì)[18]。近期，研究表明caspase- 3不但可以直接誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡,而且可以提高腫瘤細(xì)胞的放射敏感性，但其早期診斷和治療仍處于摸索階段。建立快速、靈敏、準(zhǔn)確預(yù)測(cè)癌細(xì)胞輻射敏感性的方法,實(shí)現(xiàn)腫瘤放射治療的個(gè)體化,使用不同生物標(biāo)志單獨(dú)或聯(lián)合進(jìn)行研究,為今后人類治愈卵巢癌提供了基礎(chǔ)。雖然結(jié)果與臨床應(yīng)用還有一定距離,但隨著對(duì)卵巢癌發(fā)生機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷深入,放療前后聯(lián)合檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白在患者癌組織的表達(dá)水平和癌細(xì)胞凋亡水平的變化[19- 21],篩選判斷腫瘤細(xì)胞放療敏感性的指標(biāo),最終可使生物標(biāo)志用于臨床輻射敏感性的預(yù)測(cè),針對(duì)不同的患者采取個(gè)體化的放射治療模式(包括放療的劑量、分割方案的制定、放射增敏藥物的應(yīng)用等),從而提高卵巢癌放療的治愈率。casepase- 3含量多，凋亡通路更能響應(yīng)放療，這對(duì)臨床放射治療不同類型的卵巢癌細(xì)胞具有指導(dǎo)意義。

[1] TROSO- SANDOVAL T A,LICHTMAN S M.Chemotherapy of ovarian cancer in elderly patients[J].Cancer Biology and Medicine,2015,12(4):292- 301.

[2] FELLOW M L J C,ONCOLOGIST B S M.Olaparib for the treatment of epithelial ovarian cancer[J].Expert Opinion on Pharmacotherapy,2016,52(1):995- 1003.

[3] STANLEY S E,RAO A D,GABLE D L,et al.Radiation sensitivity and radiation necrosis in the short telomere syndromes.[J].International Journal of Radiation Oncology Biology Physics,2015,93(5):1115- 1117.

[4] GOH J,MOHAN G R,LADWA R,et al.Frontline treatment of epithelial ovarian cancer[J].Asia- Pacific Journal of Clinical Oncology,2015,11(6):1- 16.

[5] YING T H,YANG S F,TSAI S J,et al.Fisetin induces apoptosis in human cervical cancer HeLa cells through ERK1/2- mediated activation of caspase- 8- /caspase- 3- dependent pathway[J].Archives of Toxicology,2012,86(2):263- 273.

[6] GOSENS M J E M,DRESEN R C,RUTTEN H J T,et al.preoperative radiochemotherapy is successful also in patients with locally advanced rectal cancer who have intrinsically high apoptotic tumours[J].Annals of Oncology,2008,19(12):2026- 2032.

[7] CHIEN W S,CHEN Y H,CHIANG P C,et al.Suppression of autophagy in rat liver at late stage of polymicrobial sepsis[J].Shock,2011,35(5):506- 511.

[8] DURKO A,PLANETA- MALECKA I,KULING A,et al.Is apotosis activity a marker of the imbalances of gastric epithelial proliferation in theH.pylori- associated gastritis in children?[J].Helicobacter,2009,14(4):315.

[9] ZHAO G.Inhibition of caspase- 3,- 6,- 8 and - 9 expression in rats with acute spinal cord injury by cantharidin treatment[J].Tropical Journal of Pharmaceutical Research,2016,15(3):577- 581.

[10] RONSISVALLE S,ARICO G,COVA A M,et al.Caspase- 3 activation in human melanoma A375 cell line by a novel selective sigma- 2 agonist[J].Pharmazie,2016,71(3):146- 151.

[11] ALLEN J E,PRABHU V V,TALEKAR M,et al.Genetic and pharmacological screens converge in identifying FLIP,BCL2,and IAP proteins as key regulators of sensitivity to the TRAIL- inducing anticancer agent ONC201/TIC10[J].Cancer Research,2015,75(8):1668- 1674.

[12] ZHANG S,LIU K,CHENG B,et al.TRAIL inhibits proliferation and promotes apoptosis of 3AO ovarian cancer cells[J].Chinese Journal of Cellular & Molecular Immunology,2014,30(5):453- 457.

[13] LEE G H,YAN C,SHIN S J,et al.BAX inhibitor- 1 enhances cancer metastasis by altering glucose metabolism and activating the sodium- hydrogen exchanger:the alteration of mitochondrial function[J].Oncogene,2010,29(14):2130- 2141.

[14] GASPARRI M L,GRANDI G,BOLLA D,et al.Hepatic resection during cytoreductive surgery for primary or recurrent epithelial ovarian cancer[J].Journal of Cancer Research and Clinical Oncology,2016,142(7):1- 12.

[15] KAJIYAMA H,SHIBATA K,KIKKAWA F.Fertility- sparing surgery in epithelial ovarian cancer[J].Nihon Rinsho Japanese Journal of Clinical Medicine,2012,70:589- 593.

[16] YING T H,YANG S F,TSAI S J,et al.Fisetin induces apoptosis in human cervical cancer HeLa cells through ERK1/2- mediated activation of caspase- 8- /caspase- 3- dependent pathway[J].Archives of Toxicology,2012,86(2):263- 273.

[17] ZHANG Y B,GONG J L,XING T Y,et al.Autophagy protein p62/SQSTM1 is involved in HAMLET- induced cell death by modulating apotosis in U87MG cells[J].Cell Death & Disease,2013,4(3):550.

[18] AISAFADI S,TOURPIN S,BESSOLTANE N,et al.Nuclear localization of the caspase- 3- cleaved form of p73 in anoikis[J].Oncotarget,2015,7(6):8.

[19] COKERGURKAN A,ARISAN E D,OBAKAN P,et al.Inhibition of autophagy by 3- MA potentiates purvalanol- induced apoptosis in Bax deficient HCT 116 colon cancer cells[J].Experimental Cell Research,2014,328(1):87- 98.

[20] 許芙蓉,王海燕,劉韻.卵巢癌SKOV3細(xì)胞凋亡的ERK通路介導(dǎo)機(jī)制及白藜蘆醇的參與作用研究[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué),2016,44(4):469- 473.

[21] 李偉宏.MicroRNA- 200b在卵巢癌組織及血漿中的表達(dá)及其對(duì)癌細(xì)胞侵襲遷移的影響[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2016,26(20):40- 43.

(本文編輯：周蘭波)

The correlation between caspase- 3 mediated apoptosis and radiation sensitivity in ovarian cancer

ZHANG Chun- nian,WANG Jian- zhong

(GanzhouPeople’sHospital,Ganzhou341400,China)

Objective: To study the caspase- 3 mediated apoptosis in ovarian cancer, and the relationship between the caspase- 3 expression and radiation sensitivity. Methods: Through the clinical ovarian tissue samples collected at different periods and apoptosis related gene mRNA and protein detection, and immunohistochemical legal, quantitative caspase- 3 protein changes in ovarian cancer in different periods, the apoptosis in ovarian cancer in different periods was studied. By rays irradiation, and then the number of cells was counted, in order to study different types of ovarian cancer cells radiation sensitivity. Results: Immunohistochemistry, PCR, Western Blot, results with ovarian cells canceration showed that survival bcl- 2 genes of apoptosis was activated, lethal gene bax of apoptosis was inhibited, the apoptosis protein caspase- 3 declined. At the same time, rays irradiation and statistical results showed that the different types of ovarian cancer cells to radiation sensitivity were different. Conclusion: Caspase- 3 protein quantitied with ovarian canceration is declining, but for ovarian cancer cells, the more caspase- 3 protein is, the stronger radiation sensitivity is.

ovarian cancer; apoptosis; caspase 3; radiation sensitivity

2016- 09- 27

2016- 12- 17

江西省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(2010JX02228)

張春年(1978-)，女，江西南康人，主治醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士。E- mail:hex518000@126.com

張春年,王建中.介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的caspase- 3在卵巢癌中的表達(dá)和放療敏感性的關(guān)聯(lián)性研究[J].東南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2017,36(2):176- 181.

R737.31

A

1671- 6264(2017)02- 0176- 06

10.3969/j.issn.1671- 6264.2017.02.009