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        Agilent1100 HPLC儀操作規(guī)程及日常維護保養(yǎng)

        2017-05-27 06:02:05居斌高小春
        中文信息 2016年12期
        關鍵詞:維護保養(yǎng)

        居斌+高小春

        摘 要: 介紹了Agilent1100 HPLC儀操作技術規(guī)程,總結了Agilent1100 HPLC儀日常維護保養(yǎng)事項,旨在幫助Agilent1100 HPLC儀操作者使用。

        關鍵詞:Agilent1100 型 HPLC 操作規(guī)程 維護保養(yǎng)

        中圖分類號:TH833 文獻標識碼:A 文章編號:1003-9082(2016)12-0250-01

        HPLC儀是目前應用廣泛的分離、分析、純化有機化合物(包括能通過化學反應轉變?yōu)橛袡C化合物的無機物)的有效儀器之一。 在已知的有機化合物中,約有80%能用HPLC分離、分析,而且由于此法條件溫和,不破壞樣品,因此特別適合高沸點、難氣化揮發(fā)、熱穩(wěn)定性差的有機化合物和生命物質。本文主要介紹Agilent1100 HPLC儀操作技術規(guī)程及日常維護保養(yǎng)事項。

        一、儀器的環(huán)境要求

        儀器環(huán)境要求:排風良好、周圍沒有電磁干擾、無強烈的機械振動的室內,溫度為10℃~30℃,相對濕度不高于80%;電源要求:電壓為220±22V,電源頻率為50±0.5Hz。

        二、操作規(guī)程

        1.開機

        1.1接通電源,打開計算機及工作站其它各部件開關,約30秒鐘后,各部件進入待機狀態(tài),指示燈為黃色或無色。

        1.2打開HP ChemStations,進入Instrument 1 online狀態(tài),約30秒鐘后,計算機進入工作站的操作頁面。該頁面主要由以下幾部分組成:最上方為命令欄,依次為File,Run Control,Instrument等;命令欄下方為快捷操作圖標,由多個樣品連續(xù)進行分析、單個樣品進樣分析、調用文件、保存文件等;左邊為樣品信息欄;中部為工作站各部件的工作流程示意圖,依次為進樣器→輸液泵→柱溫箱→檢測器→數據處理→報告;中下部為動態(tài)監(jiān)測信號;右下部為色譜工作參數:進樣體積、流速、分析停止時間、流動相比例、柱溫、檢測波長等。

        1.3 色譜條件的設定(色譜條件的設定可以通過下列幾種方法實現)

        1.3.1直接設定

        在操作頁面的右下部一色譜工作參數中設定。將鼠標移移至要設定的參數如進樣體積、流速、分析停止時間、流動相比例、柱溫、檢測波長等,單擊一下,即可顯示該參數的設置頁面,鍵入設定值后,單擊“OK”,即完成。

        1.3.2 調用已設置好的文件

        在命令欄“Method”下,選擇“Load Method”,或直接單擊快捷鍵操作的“Load Method”圖標,選定文件名,單擊“OK”, 此時,工作站即調用所選用文件中設定的參數。如欲進行修改,則可同1.3.3項下,在色譜工作參數中作修改;亦可在命令欄“Method”下,選擇“Edit Entire Method”, 在每個頁面中鍵入設定值,單擊“OK”, 即完成。

        1.3.3 編輯新文件

        先在命令欄“Method”下,選擇“New Method”,之后再在命令欄“Method”下,選擇“Edit Entire Method”, 在每個頁面中鍵入設定值,完成后,“Save Method”, 先在命令欄“Method”下選擇“Save Method”,給新文件命名,單擊“OK”,即完成。

        2.儀器的運行

        當色譜參數設置完成后,單擊工作站流程圖右下角的“on”儀器開始運行。此時,畫面顏色由灰色變成黃色或綠色,當各部件達到所設定的參數時,畫面均變?yōu)榫G色,左上角紅色的“not ready ”變?yōu)榫G色的“ready ”,表明可以進行分析。

        3.進樣分析(有單個樣品分析和多個樣品連續(xù)分析兩種)

        3.1單個樣品分析

        如無自動進樣器,在命令欄“Run Control”下,選擇“Sample Info……” 可輸入操作者(Operator Name)、數據存貯通道(Subdirectory)、樣品名(Sample Name)等信息,單擊“OK”,然后即可用手動進樣器進樣。如有自動進樣器,在命令欄“Run Control”下,選擇“Sample Info……”或點擊快捷操作的“一個小瓶”圖標,之后單擊樣品信息欄內的小瓶,選擇“Sample Info……”即打開了樣品信息頁面,可輸入操作者(Operator Name)、數據存貯通道(Subdirectory)、進樣瓶號(Vial)、樣品名(Sample Name)等信息,單擊“OK”, 即完成。

        3.2多個樣品連續(xù)樣品分析

        單擊快捷操作的“三個小瓶”圖標,之后單擊樣品信息欄內的樣品盤,選擇“Sequence Table”,即進入連續(xù)樣品序列表的編輯,可輸入進樣瓶號、樣品名進樣次數、進樣體積等信息,單擊“OK”, 即完成。否則儀器將運行至色譜參數設置中所設定的分析停止時間方結束分析。

        3.3單擊信息欄上方綠色的“Start”,自動進樣器即按“3.1”或“3.2”設置的程序進行分析,如欲終止分析,可單擊信息欄上方綠色的“Stop”,否則儀器將運行至色譜參數設置中所設定的分析停止時間方結束分析。

        4.數據分析

        在命令欄“ View”下選擇“Data Analysis”,則進入數據處理頁面。該頁面最上方為命令欄,依次為File ,Graphics,Integration……等,命令欄下方為快捷操作圖標,如積分、校正、色譜圖、單一色譜圖調用、多色譜圖調用、調用方法、保存方法等。

        4.1調用色譜圖

        在命令欄“File”下,選擇“Load Signal”或單擊快捷操作的“單一色譜圖調用”圖標選擇色譜圖文件名,單擊“OK”,畫面中即可出現所調用的色譜圖。

        4.2 積分

        先調用所要分析的圖譜,在命令欄“Integration”下選擇“Integration” 或單擊快捷鍵操作的“積分”圖標,此時儀器按內置的積分參數給出積分結果。如欲對其中參數進行修改,可在命令欄“Integration”下選擇“Integration Events”或單擊快捷鍵操作的“編輯/設定積分表”圖標,此時,在屏幕下方左側出現積分參數表,右側為積分結果,在積分參數表中按實際的要求輸入修改的參數,如斜率、峰寬、最小峰面積、最低峰高等。在命令欄“Integration”下選擇“Integration ” 或單擊快捷鍵操作的“對現有色譜圖積分”圖標,儀器即按照新設定的積分參數重新積分,完成后,單擊積分參數表中“取消積分參數”的快捷圖標,保存所作的參數修改,單擊“OK”,即可退出。

        5.分析報告的打印

        在命令欄“Report”下,選擇“Specify Report”或單擊最右側快捷鍵操作的“定義報告及打印格”(右下角帶叉的報告畫面)圖標,根據實際要求選擇報告的格式和輸出形式等, 單擊“OK”, 即完成。例如,可在“Destination”項下選擇“Screen”,在“Quantitative Result”項下,對“Calculate”選“Percent”、對“Based On”選“Area”、對“Sorted By”選“Signal ”;在 “Style”項下,對“Report Style”選“Short”,再依次選擇“Sample into on each page”、“Add chromatogram output”之后選擇快捷鍵操作的“報告預覽”圖標,可預覽報告的全貌,單擊“Print”,即可進行報告的打印。最后,單擊“close”退出此操作頁面。

        6.關機

        6.1在命令欄“View”下,選擇“Method and Run Control”,回到主控制頁面,在命令欄“File”下,選擇“Exit”, 單擊“Yes”,關閉“Instrument 1 online”,再單擊“Yes”,關閉輸液泵、柱溫箱及檢測器氘燈。

        6.2在化學工作站頁面上,在“File”下選“Close”,退出“HP ChemStation”。

        6.3 關閉計算機及所有工作站所有各部件電源開關。

        三、日常維護保養(yǎng)

        1.定期清洗溶劑過濾頭,用35%濃硝酸浸泡1小時,不要使用超聲波清洗。

        2.流動相應經過0.45um或更小孔徑的濾器過濾,如果使用濾膜,注意有機膜與水膜的區(qū)別(聚四氟乙烯能適用于所有溶劑)。

        3.根據情況更換Purge閥內的在線過濾頭(Purge閥打開,純水5ml/min,壓力超過10bar時需更換)。

        4.注意清洗在線脫氣機及比例閥,尤其是長期使用水相或緩沖鹽的通路,使用純水沖洗后,再使用甲醇沖洗,可以打開Purge閥,使用5ml/min的流速。污染比較嚴重時,可以使用異丙醇(IPA)清洗。

        5.安裝有seal wash組件的,無論是否使用緩沖鹽,開泵之前都應該使之充滿流動的液體(10%IPA水溶液)并調流速為20滴/分鐘。

        6.正相色譜、反相色譜切換時應使用IPA過渡,長期使用正相,應更換正相柱塞密封墊。

        7.樣品進樣之前最好過濾,如果樣品量太少,可以適當抬高進樣針的位置。

        8.流動相pH大于9.5或小于2.3時,進樣閥應更換四氟(tefzel)轉子密封圈。

        9.注意不同檢測器流通池耐壓問題,盡量避免使用pH>9.5的流動相,以防腐蝕流通池石英窗,避免使用可能析晶的流動相,防止流通池堵塞。

        四、小結

        HPLC儀是一種精密的分析儀器,日常工作中要正確的操作使用,并定期維護保養(yǎng)和期間核查,每1~3年進行計量檢定,使HPLC儀的技術性能處于良好工作狀態(tài),以確保檢測結果準確、可靠。

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