葛南海　蔡孝楨　榮蓉　張俊愛(ài)　周寅川　付文金　鐘培星

【摘要】 目的 觀(guān)察結(jié)核性胸膜炎患者調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg細(xì)胞）、輔助性T細(xì)胞17（Th17）以及相關(guān)細(xì)胞因子水平變化情況， 分析其在疾病發(fā)病機(jī)制中的作用。方法 43例結(jié)核性胸膜炎患者為研究組， 43例入院進(jìn)行健康檢查者為對(duì)照組。取兩組研究對(duì)象靜脈血， 分別對(duì)Treg 、Th17細(xì)胞含量進(jìn)行測(cè)定， 同時(shí)檢測(cè)相關(guān)因子水平， 對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行分析。結(jié)果 對(duì)照組Th17、Th17/ Treg值、Treg分別為（0.76±0.13）%、（0.14±0.03）、（5.17±0.74）%， 研究組Th17、Th17/ Treg值、Treg分別為（1.24±0.23）%、（0.27±0.06）、（4.28±0.62）%；研究組Th17、Th17/ Treg值高于對(duì)照組， Treg細(xì)胞含量低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。對(duì)照組白細(xì)胞介素（IL）-6、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）、IL-17分別為（3.86±0.52）、（3.75±0.63）、（13.74±2.62）ng/L， 研究組IL-6、TGF-β、IL-17分別為（4.96±0.84）、（3.52±0.75）、（18.04±3.62）ng/L；兩組TGF-β水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 研究組IL-6、IL-17因子水平高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論 Th17及Treg細(xì)胞通過(guò)其本身及分泌相關(guān)細(xì)胞因子在結(jié)核性胸膜炎的發(fā)病過(guò)程中可能起著重要作用。

【關(guān)鍵詞】 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞；輔助性T細(xì)胞17；細(xì)胞因子；結(jié)核性胸膜炎

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.32.019

【Abstract】 Objective To observe changes of regulatory T cell （Treg） and helper T cell 17 （Th17） and related cytokines in tuberculous pleuritis patients， and to analyze their effects in pathogenesis. Methods There were 43 patients with tuberculous pleuritis as research group， and another 43 healthy people as control group. Venous blood in both groups were taken to detect Treg and Th17 cells contents and related cytokines levels， and the detection outcomes were analyzed. Results The control group had Th17， Th17/Treg value and Treg respectively as （0.76±0.13）%， （0.14±0.03）， and （5.17±0.74）%， and the research group had Th17， Th17/Treg value and Treg respectively as （1.24±0.23）%， （0.27±0.06）， and （4.28±0.62）%. The research group had higher Th17， Th17/Treg and lower Treg than the control group， and their differences all had statistical significance （P<0.05）. The control group had interleukin（IL）-6， transforming growth factor-β（TGF-β） and IL-17 respectively as （3.86±0.52）， （3.75±0.63） and （13.74±2.62） ng/L， and the research group had IL-6， TGF-β and IL-17 respectively as （4.96±0.84）， （3.52±0.75） and （18.04±3.62） ng/L. There was no statistically significant difference of TGF-β level between the two groups （P>0.05）. The research group had higher IL-6 and IL-17 levels than the control group， and the difference had statistical significance （P<0.05）. Conclusion Th17 cane Treg cells shows important effects in tuberculous pleuritis progression by themselves and related cytokines.

【Key words】 Regulatory T cell； Helper T cell 17； Cytokines； Tuberculous pleuritis

結(jié)核性胸膜炎是由結(jié)核分枝桿菌及其代謝產(chǎn)物侵入患者胸膜， 從而導(dǎo)致的一系列炎癥反應(yīng)， 早前研究認(rèn)為疾病免疫機(jī)制為T(mén)h1細(xì)胞與結(jié)核分枝桿菌發(fā)生作用， 但近幾年有學(xué)者提出Th17、 Treg 細(xì)胞在疾病免疫中起著重要作用[1]。本次通過(guò)對(duì)患者以及正常者檢查血液中Th17、 Treg 細(xì)胞含量以及相關(guān)細(xì)胞因子水平， 分析其水平變化的意義， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 以2014年3月～2016年2月本院收治的43例結(jié)核性胸膜炎患者為研究組， 其中男25例， 女18例， 年齡35～59歲， 平均年齡（45.1±4.7）歲；所有患者經(jīng)檢查符合結(jié)核性胸膜炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]， 無(wú)合并惡性腫瘤、慢性感染性疾病、糖尿病、自身免疫性疾病等嚴(yán)重慢性疾病， 選取43例同期入院進(jìn)行健康檢查者為對(duì)照組， 其中男24例， 女19例， 年齡37～58歲， 平均年齡（44.8±4.5）歲。兩組性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。本次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1. 2 方法 儀器：EPI-CS XL流式細(xì)胞分析儀（美國(guó)貝克曼公司）、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）儀（上海舜百生物科技有限公司）。方法：所有研究對(duì)象于清晨空腹抽取3～5 ml靜脈血， 放入抗凝管中使用離心機(jī)， 以2500 r/min速度離心5 min， 取中段白色淋巴細(xì)胞層， Treg、Th17細(xì)胞含量采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)， 相關(guān)因子IL-6、IL-17以及TGF-β采用酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行檢測(cè)。

1. 3 觀(guān)察指標(biāo) 觀(guān)察兩組血液中Treg 、Th17細(xì)胞含量以及相關(guān)因子IL-6、IL-17、TGF-β水平變化情況。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 兩組Treg、Th17細(xì)胞含量檢測(cè)結(jié)果比較 對(duì)照組Th17、Th17/ Treg值、Treg分別為（0.76±0.13）%、（0.14±0.03）、（5.17±0.74）%， 研究組Th17、Th17/ Treg值、Treg分別為（1.24±0.23）%、（0.27±0.06）、（4.28±0.62）%；研究組Th17、Th17/ Treg值高于對(duì)照組， Treg細(xì)胞含量低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2. 2 兩組相關(guān)細(xì)胞因子水平變化比較 對(duì)照組IL-6、TGF-β、IL-17分別為（3.86±0.52）、（3.75±0.63）、（13.74± 2.62）ng/L， 研究組IL-6、TGF-β、IL-17分別為（4.96±0.84）、（3.52±0.75）、（18.04±3.62）ng/L；兩組TGF-β水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 研究組IL-6、IL-17因子水平高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

結(jié)核病是臨床發(fā)病率較高的一類(lèi)疾病， 早前臨床認(rèn)為疾病與患者Th1/ Th2免疫失衡有關(guān)， 但隨著研究深入臨床發(fā)現(xiàn)Th17、Treg細(xì)胞與疾病發(fā)生、發(fā)展有關(guān)， 其屬于CD4+ T 細(xì)胞， 但又不同于Th1、Th2 免疫細(xì)胞。其中前者為介導(dǎo)炎癥反應(yīng)、自身免疫的細(xì)胞， 其能分泌IL-17、IL-6， 具有很強(qiáng)的促炎作用， 在感染、腫瘤、自身免疫性疾病、慢性炎癥等發(fā)展中發(fā)揮重要作用， 而后者為免疫抑制細(xì)胞， 其通過(guò)分泌抑制性細(xì)胞因子IL-10、TGF-β， 以及細(xì)胞間接觸抑制等產(chǎn)生抗炎作用[3]。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)Th17 、Treg 細(xì)胞兩者之間存在一種密切聯(lián)系， 這兩種細(xì)胞均由T細(xì)胞產(chǎn)生， 在分化過(guò)程中有較好相關(guān)性， 但在功能上卻相互具有拮抗作用， 正常情況下兩種細(xì)胞應(yīng)處于一種動(dòng)態(tài)平衡， 但當(dāng)疾病發(fā)生時(shí)會(huì)產(chǎn)生變化[4-9]。

本研究中， 對(duì)照組Th17、Th17/ Treg值、Treg分別為（0.76±0.13）%、（0.14±0.03）、（5.17±0.74）%， 研究組Th17、Th17/ Treg值、Treg分別為（1.24±0.23）%、（0.27±0.06）、（4.28±0.62）%；研究組Th17、Th17/ Treg值高于對(duì)照組， Treg細(xì)胞含量低于對(duì)照組， 差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果表明Th17細(xì)胞大量分泌使Th17/ Treg比例失衡， 從而促使疾病的發(fā)生、發(fā)展。對(duì)照組IL-6、TGF-β、IL-17分別為（3.86±0.52）、（3.75±0.63）、（13.74±2.62）ng/L， 研究組IL-6、TGF-β、IL-17分別為（4.96±0.84）、（3.52±0.75）、（18.04±3.62）ng/L；兩組TGF-β水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 研究組IL-6、IL-17因子水平高于對(duì)照組， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。推測(cè)這是由于TGF-β由Treg分泌產(chǎn)生而IL-17由Th17產(chǎn)生， IL-17能促使巨噬細(xì)胞在病變區(qū)域聚集， 引發(fā)免疫反應(yīng)從而促進(jìn)IL-6等炎性因子產(chǎn)生， 加重炎性反應(yīng)同時(shí)對(duì)患者內(nèi)皮細(xì)胞、組織造成損傷， 誘導(dǎo)疾病產(chǎn)生[10-15]。

綜上所述， Th17及Treg細(xì)胞通過(guò)其本身及分泌相關(guān)細(xì)胞因子在結(jié)核性胸膜炎的發(fā)病過(guò)程中可能起著重要作用。

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[收稿日期：2016-10-24]