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        小鵝瘟病毒卵黃抗體田間試驗

        2017-05-15 02:55:30藏玉婷王彬宋揚丁國杰
        中國動物保健 2017年2期
        關(guān)鍵詞:鵝場小鵝雛鵝

        藏玉婷,王彬,宋揚,丁國杰

        (哈藥集團生物疫苗有限公司研發(fā)中心 哈爾濱 150069)

        小鵝瘟病毒卵黃抗體田間試驗

        藏玉婷,王彬,宋揚,丁國杰

        (哈藥集團生物疫苗有限公司研發(fā)中心 哈爾濱 150069)

        在完成小鵝瘟病毒卵黃抗體實驗室研究的基礎(chǔ)上,于 2015 年中間試制 5 批卵黃抗體,經(jīng)檢驗合格后,分別在 3 個鵝場,總計 21 600 只雛鵝進行了田間試驗。結(jié)果表明,在實驗觀察期內(nèi),未發(fā)生小鵝瘟病毒感染,且無任何不良方應,3 個鵝場的免疫組在生產(chǎn)性能方面與非免疫雛鵝均無顯著差異;免疫攻毒組雛鵝攻毒保護率為 98%。證明研制的小鵝瘟病毒卵黃抗體安全、有效。

        小鵝瘟病毒;卵黃抗體;田間試驗

        小鵝瘟是由鵝細小病毒(Goose parvovirus,GPV)引起的雛鵝急性或亞急性敗血性傳染病[1]。該病主要侵害出殼后 4~20 日齡的雛鵝,也感染雛鴨,傳播速度快,發(fā)病率和死亡率高達 90%~100%[2]。早期預防對控制該病十分重要,卵黃抗體用于預防和治療疫病已取得了很好的效果,同時由于卵黃抗體具有不激活補體、不結(jié)合類風濕因子等優(yōu)點,可避免補體系統(tǒng)的干擾及檢測過程中出現(xiàn)假陽性,因此使用卵黃抗體做緊急預防接種有較大的實踐意義[3,4]。本產(chǎn)品前期實驗室研究結(jié)果顯示小鵝瘟病毒卵黃抗體具有良好的安全性及效力,為了進一步明確該卵黃抗體在田間應用的安全性和效力,課題組開展了本項研究,旨在為小鵝瘟病毒卵黃抗體的實際應用提供一定的理論依據(jù)[5,6]。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 小鵝瘟病毒卵黃抗體 批號:201501、201502、201503,共計 3 批,瓶裝量 100mL,2~8 ℃保存,有效期為 18 個月,瓊擴效價均不低于 1∶16。由哈藥集團生物疫苗有限公司 GMP卵黃抗體生產(chǎn)線制備、提供。

        1.1.2 檢 驗 用 強 毒 小 鵝瘟 病毒 (H 株),批 號為201501E4,病毒含量 105.38ELD50/0.2mL,由哈藥集團生物疫苗有限公司制備、鑒定、保存。

        1.1.3 試驗動物 1~3 日齡健康易感雛鵝 20 600 只,分別由鵝場 1、鵝場 2、鵝場 3 提供,常規(guī)飼養(yǎng)管理。

        1.2 方法

        1.2.1 安全性試驗設(shè)計及方法 用 3 批小鵝瘟病毒卵黃抗體,批號為 201501、201502 和 201503 進行田間安全性試驗,分別在 3 個規(guī)?;Z場進行,采取平行分組設(shè)計和隨機化分組原則,對 1~3日齡健康易感雛鵝進行單劑量接種、單劑量重復接種和超劑量接種安全試驗。①單劑量接種:1 000 只健康易感雛鵝,0.5 mL/只頸部皮下注射(使用劑量);②單劑量重復接種:500 只健康易感雛鵝,0.5mL/只頸部皮下注射(使用劑量),24 h 后用相同劑量重復免疫 1 次;③超劑量接種:500 只健康易感雛鵝,1.0 mL/只頸部皮下注射(2 倍使用劑量)。接種后觀察14 d,記錄臨床癥狀、生長情況,觀察注射部位有無紅腫、是否出現(xiàn)硬結(jié),結(jié)合生命特征檢測和健康雛鵝標準,觀察注射抗體后的試驗鵝是否有全身不良反應。安全性試驗設(shè)計(見表1)。

        表1 田間安全性試驗設(shè)計

        1.2.2 效力試驗設(shè)計及方法 用 3 批小鵝瘟病毒卵黃抗體,批號為 201501、201502 和 201503 進行田間效力試驗,分別在 3 個規(guī)?;Z場進行,采取平行分組設(shè)計和隨機化分組原則,對 1~3日齡健康易感雛鵝進行使用劑量免疫試驗、低于使用劑量免疫試驗、使用劑量免疫攻毒試驗及低于使用劑量免疫攻毒試驗。①使用劑量免疫試驗:4 000 只健康易感雛鵝,0.5mL/只頸部皮下注射(使用劑量);②低于使用劑量免疫攻毒試驗:1 000 只健康易感雛鵝,0.3 mL/只頸部皮下注射(1/2 使用劑量);③使用劑量免疫攻毒試驗:每個鵝場在使用劑量免疫組中隨機選擇 50 只使用劑量免疫鵝和 50 只空白對照健康易感雛鵝,在鵝場所在地就近聯(lián)系具有負壓動物房的單位進行攻毒試驗,抗體注射后 24 h,各頸部皮下注射小鵝瘟病毒(H 株),每只 0.2m L(含 100LD50);④低于使用劑量免疫攻毒試驗:每個鵝場在低于使用劑量免疫組中隨機選擇 50只低于使用劑量免疫鵝和 50只空白對照健康易感雛鵝,在鵝場所在地就近聯(lián)系具有負壓動物房的單位進行攻毒試驗,抗體注射后 24 h,低于使用劑量免疫組和對照組各頸部皮下注射小鵝瘟病毒 (H 株),每只 0.2mL(含100LD50)。接種后觀察 10 d。效力試驗設(shè)計(見表2)。

        表2 田間效力試驗免疫設(shè)計

        2 結(jié)果

        2.1 安全性試驗結(jié)果

        從表3可以看出,小鵝瘟病毒卵黃抗體注射雛鵝后,14 d 觀察期內(nèi)雛鵝精神狀態(tài)良好,行為、采食及飲水均未見異常,并無臨床及全身不良反應,注射部位吸收良好,3個鵝場的試驗組在生產(chǎn)性方面與非試驗鵝群均無顯著差異。

        表3 田間安全性試驗觀察結(jié)果

        2.2 效力試驗結(jié)果

        從表4可以看出,小鵝瘟病毒卵黃抗體注射雛鵝后,10 d 觀察期內(nèi)使用劑量免疫試驗、低于使用劑量免疫試驗的雛鵝均為發(fā)病。從表5可以看出,使用劑量免疫攻毒試驗及低于使用劑量免疫攻毒試驗的攻毒保護率均在 90%以上。

        3 討論

        1)該研究應用 GMP 生產(chǎn)線生產(chǎn)的 3 批小鵝瘟病毒卵黃抗體,進行田間安全性試驗。通過在 3 個鵝場對 1~3 日齡健康易感雛鵝進行單劑量接種、單劑量重復接種和超劑量接種安全試驗。觀察期內(nèi)雛鵝精神狀態(tài)良好,行為、采食及飲水均未見異常,并無臨床及全身不良反應,注射部位吸收良好,生產(chǎn)性方面與非試驗鵝群均無顯著差異,試驗表明本產(chǎn)品的安全性良好。

        2)為了進一步檢驗小鵝瘟病毒卵黃抗體的免疫效果,在 3 個鵝場對 1~3 日齡健康易感雛鵝進行使用劑量免疫試驗、低于使用劑量免疫試驗、使用劑量免疫攻毒試驗及低于使用劑量免疫攻毒試驗。觀察期內(nèi)各組免疫雛鵝無發(fā)病。其中,使用劑量免疫攻毒試驗及低于使用劑量免疫攻毒試驗的攻毒保護率均在 90%以上,試驗證明本產(chǎn)品能夠有效地預防小鵝瘟。

        3)試驗統(tǒng)計顯示使用劑量免疫攻毒試驗中雛鵝的保護率為 100%,而低于使用劑量免疫攻毒試驗中雛鵝的保護率為 93.3%,雖然兩組試驗的保護率均在 90%以上,達到質(zhì)量標準的要求,但為了現(xiàn)地更好預防小鵝瘟,建議 1~3 日齡雛鵝預防劑量為0.5m L/ 只[7]。

        [1]殷震,劉景華主編.動物病毒學二版[M].北京:科學出版社,1997: 294,328,335.

        [2]費恩閣,李德昌,丁壯,等.動物疫病學[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社, 2004,586.

        [3]王永坤.如何預防小鵝瘟[J].中國禽業(yè)導刊,2004,21(5):31-32.

        [4]中國標準出版社第一編輯室編.動物防疫標準匯編[M].北京:中國標準出版社,2004,473-478.

        [5] Larsson A,Carlander D.0ral immunotherapy with yolk antibodies to prevent infections in humans and animals[J].Ups JMed Sci, 2003.108(2):129-140.

        [6]杜鳳林,鐘鴻鵬,等.牛病毒性腹瀉活疫苗田間試驗[J].特產(chǎn)研究. 2012.04:20-25.

        [7]王紅琳,楊俊,等.禽霍亂一新城疫二聯(lián)油乳劑滅活疫苗研究(Ⅳ報)- 疫苗的田間試驗[J].安徽農(nóng)業(yè)科學.2009.37(10):4513-4516.

        TheClinicalExperimentofGoose ParvovirusYolk Antibodies

        Zang Yu ting,Wang Bin,Song Yang,Ding Guo jie
        (Harbin PharmaceuticalGroup Co.Ltd.Biological Vaccine,Harbin,150069)

        Under the laboratory research of the goose parvovirusyolk antibodies,five groupsof yolk antibodieswere produced in 2015.The yolk antibodieswasexam ined.After the assay wasapproved,the yolk antibodieswasused in three Goose fields(about 20 600 young gooses).The resultsshowed that the young goosesdid not infect the Goose Parvovirusand no side effectswere observed.Therewasno significant difference in the reproductive function between the treatmentgroup and the controlgroup.The protective rate was98%for vaccinated-challenged young gooses.Thus,the goose parvovirusyolk antibodies could be used safely and effectively.

        Goose parvovirus;Yo lk antibodies;C linicalexperiment

        表4 田間效力試驗免疫試驗結(jié)果

        表5 田間效力試驗免疫攻毒試驗結(jié)果

        10.3969/j.issn.1008-4754.2017.02.040

        藏玉婷(1980.7-),女,碩士,主要從事獸用疫苗研制工作。E-mail:599047078@qq.com

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