劉金華++++++簡慶佳++++++符傳東++++++邱輝強++++++黃健林++++++趙雙玉

[摘要]目的 探討標(biāo)本溶血對生化檢驗結(jié)果的影響分析。方法 選擇2015年9～12月在我院門診進行體檢的100名正常志愿者的血液標(biāo)本作為研究對象，采用日立7600-010型全自動生化分析儀檢測血液標(biāo)本溶血前后谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、總膽紅素（TBil）、直接膽紅素（DBil）、總蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、肌酸激酶（CK）、K+、Ca2+、葡萄糖（Glu）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）等12項生化指標(biāo)，觀察溶血前后各項指標(biāo)的水平差異。結(jié)果 研究對象血液標(biāo)本溶血前后AST、ALT、TBil、DBil、TP、ALB、CK、K+、Glu、BUN水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)的意義（P<0.05）；溶血前后血液中UA、Ca2+水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)的意義（P>0.05）。結(jié)論 標(biāo)本溶血現(xiàn)象對很多臨床生化檢驗實驗有很大的影響，為了盡可能減少或避免標(biāo)本溶血的發(fā)生，要求臨床工作人員采血時嚴格按照要求操作，對標(biāo)本的采集、運送、分離以及檢測過程嚴格操作，做好臨床標(biāo)本分析前的質(zhì)量控制，使檢驗結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。

[關(guān)鍵詞]溶血；生化檢驗；標(biāo)本溶血；臨床標(biāo)本

[中圖分類號] R446.11 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2017）03（c）-0138-03

[Abstract]Objective To discuss the influence of blood specimen hemolysis on the results of chemical biochemical tests.Methods The blood samples from 100 cases of normal volunteers carried out physical examination in outpatient of our hospital from September to December 2015 for the research object.12 tested indexes of biochemical index blood samples such as alanine aminotransferase （ALT） and aspartate aminotransferase （AST），values of total bilirubin （TBil），direct bilirubin （DBil），total protein （TP），albumin （ALB），creatine kinase （CK），K+，calcium （Ca2+），glucose （GLU），urea nitrogen （BUN），uric acid （UA） were detected before and after hemolysis by the Hitachi Model 7600-010 automatic biochemical analyzer and the levels difference of each indexe was analyzed.Results Levels of AST，ALT，Tbil，Dbil，TP，ALB，CK，K+，Glu，BUN before and after the hemolysis had statistically significant differences （P<0.05）；the value of UA，Ca2+ had no statistical difference before and after the hemolysis （P>0.05）. Conclusion The hemolysis has a great influence on on the clinical and biochemical test，the effect of clinical laboratory tests，in order to reduce or avoid hemolysis phenomenon，clinical staff should be strict in the operating of samples collecting，transport，separate and detecting，and keep higher quality control before test，that can make the results more accurate and reliable.

[Key words]Haemolysis；Biochemistry；Specimen hemolysis；Clinical specimen

標(biāo)本溶血的原因很多，但主要原因是指醫(yī)護人員由于采血操作不當(dāng)或臨床檢驗操作不規(guī)范造成紅細胞結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致某些物質(zhì)進入血清中，使標(biāo)本呈現(xiàn)紅色[1]，血小板、白細胞、紅細胞等血細胞破壞所釋放的某些細胞內(nèi)成分對臨床生化指標(biāo)測定會形成干擾，是臨床生化檢驗實驗中最常見的一種干擾因素[2]。這些釋放的成分在細胞內(nèi)的濃度如果與血清的濃度不同，則這些成分的逸出將會影響其在血清中的濃度，使測定結(jié)果有所改變[3]。由于造成標(biāo)本溶血的責(zé)任多部分在醫(yī)護一方，所以一旦有醫(yī)療糾發(fā)生紛事件，醫(yī)護一方將處于非常不利的條件[4]。本文通過標(biāo)本溶血的測定試驗，明確標(biāo)本溶血對生化檢驗指標(biāo)測定的干擾與影響，分析其的干擾因素，并提出有效的解決方法。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2015年9～12月在我院門診做健康體檢的100名正常志愿者為研究對象，其中男60例，女40例，年齡25～49歲，平均（32.5±1.5）歲。所有研究對象均對本研究知情同意并簽署知情同意書。排除肝腎功能異常、合并呼吸系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病、糖尿病及乙型肝炎者。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1儀器 本次生化試驗采用的儀器為日立7600-010型全自動生化分析儀。

1.2.2試劑 本次生化試驗采用的試劑：天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒，批號：150830；谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒，批號：150821；總膽紅素（TBil）試劑盒，批號：150917；直接膽紅素（DBil）試劑盒，批號：150917；總蛋白（TP）試劑盒，批號：150918；白蛋白（ALB）試劑盒，批號：150916；肌酸激酶（CK）試劑盒，批號：150921；K+試劑盒，批號：150925；Ca2+試劑盒，批號：20150923；葡萄糖（Glu）試劑盒，批號：150923；尿素氮（BUN）試劑盒，批號：20150925；尿酸（UA）試劑盒，批號：150923。以上試劑由寧波美康生物技術(shù)有限公司和上?？迫A生物技術(shù)有限公司提供。

1.2.3檢測方法 所有受檢者均要求空腹12 h以上，清晨抽靜脈血8 ml，將所采集的血液分別置于2支干凈的試管中，每支4.0 ml靜脈血，其中1支試管的靜脈血在室溫條件下進行自然分離，待30 min后，1500 r/min離心10 min，將血清進行充分分離，取分離后的血清1.5 ml，備用，即為溶血前樣本；另一支試管中的靜脈血標(biāo)本，采用物理方法溶血，再取血清1.5 ml以相同的速度進行離心分離，備用，即為溶血后樣本。采用日立7600-010型全自動生化分析儀進行檢測，利用上?？迫A生物試劑與寧波美康生物試劑進行測定血清中的AST、ALT、TBil、DBil、TP、ALB、CK、K+、Ca2+、Glu、BUN、UA等12項指標(biāo)水平，操作步驟和方法均按照試劑盒說明書及日立7600-010型全自動生化分析儀上的操作規(guī)程進行，每份標(biāo)本的溶血血清與正常血清分別進行15次的12項指標(biāo)測定，求出兩組每份血清的平均值，分別計算100例標(biāo)本中12項指標(biāo)測定的平均值，得到兩組測定的平均值，并對結(jié)果進行分析與總結(jié)。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 15.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

溶血后AST、ALB、TP、ALT、BUN、CK及K+水平均有顯著升高，與溶血前比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），分別升高了23.02%、8.33%、9.41%、23.01%、10.86%、16.21%及36.00%；而TBil、GLU、DBil則有明顯的降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），分別下降了18.10%、17.59%、18.19%；Ca2+、UA溶血前后對比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

3討論

數(shù)據(jù)表明，標(biāo)本溶血對大多數(shù)臨床生化檢驗結(jié)果均有影響。而標(biāo)本溶血對臨床生化檢驗有影響的干擾和因素主要有以下幾個方面。第一，標(biāo)本溶血對血液中被測物質(zhì)的濃度有影響。由于紅細胞中K+的含量約為血清中的20倍[5]，如果標(biāo)本溶血，作為K+電解質(zhì)測定時，鉀離子的檢驗結(jié)果會大大升高[6]。倘若1%的紅細胞因破壞而造成標(biāo)本溶血時，CK檢驗的結(jié)果可為實際水平的212%，ALT檢驗的結(jié)果可為實際水平的220%[7]。因此，做上述項目K+、CK、ALT等臨床生化檢測時，不能有絲毫溶血[8]。第二，標(biāo)本溶血對有色物質(zhì)的吸光度和散光度產(chǎn)生較大的誤差。標(biāo)本溶血可干擾臨床生化檢驗的顯色反應(yīng)，例如溶血時，某些被測物質(zhì)的的性質(zhì)發(fā)生變化，其摩爾吸光系數(shù)也會隨之發(fā)生改變，從而使檢測結(jié)果不同[9]。第三，標(biāo)本溶血對某些物質(zhì)的檢測有影響。當(dāng)標(biāo)本溶血時，血紅蛋白被釋放出來從而進入血漿中，其可干擾臨床生化試驗中BUN、Bil等物質(zhì)的檢測[10]。第四，標(biāo)本溶血可使線粒體酶和一些離子的濃度升高[11]。當(dāng)標(biāo)本溶血時，除了紅細胞被破壞之外，粒細胞系統(tǒng)也可破壞，并釋放出谷氨酸脫氫酶（GLDH或GDH）等線粒體酶類，使被測的血清線粒體酶含量升高[12]。除此以外，標(biāo)本溶血時血小板也被破壞，使被測的血清K+、Mg2+等離子檢測含量升高[13]。第五，標(biāo)本溶血可改變鐵離子化合價。溶血標(biāo)本中的紅色Fe2+，被氧化成黃色的Fe3+，對比兩點的色差，利用比色法來確定待測物質(zhì)含量將會被造成干擾，當(dāng)血紅蛋白過多時，可造成TBil、TP、AST、ALB等增高[14]；第六，血紅蛋白可抑制反應(yīng)。當(dāng)血紅蛋白達到一定濃度時，可以抑制生物化學(xué)反應(yīng)[15]，導(dǎo)致測定值要低于實際值。

綜上所述，只要標(biāo)本溶血，對大部分生化檢查項目的結(jié)果影響都很大。首先，檢驗工作人員的技術(shù)和素養(yǎng)很重要，如果檢驗科工作人員不及時識別，結(jié)果不僅僅會直接影響臨床醫(yī)生對就診者的正確診斷，甚至?xí)斐蓢乐匦哉`診。所以檢驗科的工作人員在日常工作中必須嚴格做好標(biāo)本分析前的質(zhì)量控制。其次，負責(zé)抽血的醫(yī)護人員也要做好崗前技術(shù)培訓(xùn)，保證抽血方法規(guī)范化，以減少就診者二次痛苦。常見的因護理因素引起溶血有以下幾點：①穿刺前由于消毒乙醇未干；②穿刺部位不準(zhǔn)確，造成瘀血而溶血；③注射器漏氣，產(chǎn)生氣泡造成溶血；④抽血后未卸下針頭，強力注入試管；⑤長時間或用力搖動或剝動血塊；⑥采血時壓迫時間過長；⑦抗凝劑和血液的比例不適；⑧注射器、容器內(nèi)有水；全血放置時間過長[16]。最后，采用空白試驗方法消除溶血的干擾和影響，對于溶血后標(biāo)本，血紅蛋白對物質(zhì)的吸光度和散光度的影響可通過空白實驗等措施克服系統(tǒng)誤差，以便提高實驗的精密度。

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