夏潔敏 范素俊 朱 澄

上海昊海生物科技股份有限公司

臭氧發(fā)生器消毒效果的驗證

夏潔敏 范素俊 朱 澄

上海昊海生物科技股份有限公司

開展驗證工作，確認(rèn)臭氧發(fā)生器的運行性能是否能夠達(dá)到設(shè)計要求、并滿足環(huán)境消毒效果的要求。

臭氧發(fā)生器; 驗證; 消毒效果

臭氧是一種廣譜高效消毒劑，具有強烈殺菌消毒作用。臭氧在常溫、常壓下分子結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，很快自行分解成氧(O2)和單個氧原子(O)，后者具有很強的活性，對細(xì)菌有極強的氧化作用，臭氧氧化分解了細(xì)菌內(nèi)部葡萄糖所必須的酶，從而破壞其細(xì)胞膜，將它殺死。多余的氧原子則會自行重新結(jié)合成為氧分子(O2)，不存在任何有毒殘留物，為無污染消毒劑。

為確認(rèn)我公司生產(chǎn)車間使用的臭氧發(fā)生器的運行性能是否能夠達(dá)到設(shè)計要求、并滿足環(huán)境消毒效果的要求，開展以下驗證工作：

在安裝確認(rèn)和運行確認(rèn)完成并合格的前提下，測試臭氧濃度并在額定功率運轉(zhuǎn)下通過生物挑戰(zhàn)性試驗來確認(rèn)臭氧發(fā)生器的性能(臭氧濃度要求≥15 ppm)。

1、臭氧消毒前環(huán)境確認(rèn)

在臭氧消毒前，對測試區(qū)域進行微生物檢測的預(yù)確認(rèn)。采樣后置32℃培養(yǎng)2-3天做為陽性對照品。

2、測試臭氧濃度程序

打開臭氧發(fā)生器前，測試并確認(rèn)環(huán)境處于正常狀態(tài)；打開臭氧發(fā)生器和空調(diào)送風(fēng)、排風(fēng)測試臭氧的濃度情況，每分鐘記錄一組數(shù)據(jù)。在達(dá)到規(guī)定消毒時間后(120min)，關(guān)閉臭氧發(fā)生器，空調(diào)機組仍正常運行。關(guān)閉臭氧發(fā)生器后測試房間內(nèi)的臭氧濃度，每分鐘記錄一組數(shù)據(jù)，直到臭氧濃度低于0.1ppm為止。

3、生物挑戰(zhàn)性試驗

目的：檢查并確認(rèn)臭氧發(fā)生儀在正常情況下，使用金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、表皮葡萄球菌(環(huán)境菌)，以驗證設(shè)定的臭氧消毒參數(shù)確實能達(dá)到預(yù)期消毒效果。

3.1 不同梯度濃度菌液的制備

菌種經(jīng)接種培養(yǎng)后成菌液，用TSB培養(yǎng)基將菌液稀釋成適宜梯度的菌液各1ml于無菌培養(yǎng)皿中，各制備兩份備做平行試驗用，根據(jù)情況挑選臭氧作用組，按要求分別置于臭氧消毒效果驗證房間內(nèi)；同時作空白對照。

3.2 驗證程序

3.2.1 打開空調(diào)送風(fēng)風(fēng)機和排風(fēng)風(fēng)機，將備好的菌液培養(yǎng)皿置于臭氧消毒效果驗證房間內(nèi)，空白對照組置于不受臭氧作用的房間。

3.2.2 啟動臭氧發(fā)生器。

3.2.3 保持臭氧發(fā)生器開機規(guī)定時間后(120min)停機。

3.2.4 取出六組菌液培養(yǎng)皿，傾注45℃ TSA培養(yǎng)基，混勻，待冷卻凝固后，置30-35℃，倒置培養(yǎng)2-3天，計數(shù)，以小于300 CFU/平皿的稀釋級別為準(zhǔn)，記錄臭氧消毒效果驗證用的菌液原始濃度及臭氧消毒后的菌液濃度，計算菌液濃度的下降倍數(shù)，并判定消毒效果是否要接受。

4、測試空氣與表面消毒程序

臭氧消毒結(jié)束后，對驗證房間進行環(huán)境監(jiān)測，采樣后置32℃培養(yǎng)2-3天，培養(yǎng)后的計數(shù)結(jié)果與陽性對照品的計數(shù)結(jié)果對照計算消亡率。

5、可接受標(biāo)準(zhǔn)

5.1 臭氧發(fā)生器開啟30分鐘后，臭氧濃度應(yīng)≥15ppm。

5.2 關(guān)閉臭氧發(fā)生器150分鐘時，臭氧濃度應(yīng)低于0.1ppm以下。5.3 消亡率應(yīng)≥90.00%。

5.4 消毒效果應(yīng)≥99.99%。

6、數(shù)據(jù)匯總

6.1 臭氧發(fā)生器性能確認(rèn)

時間臭氧發(fā)生器啟動時間 17：05-19：05臭氧濃度(ppm)≥15的達(dá)到時間 17：10臭氧濃度(ppm)≤15的降解時間 19：47臭氧濃度(ppm)消毒穩(wěn)定時間為 157分鐘臭氧濃度(ppm)≤0.1的達(dá)到時間 22：11臭氧濃度(ppm)降解時間需 144分鐘

6.2 滅菌效果確認(rèn)(消亡率)

臭氧消毒前菌落數(shù) 臭氧消毒后菌落數(shù) 消亡率沉降菌 83 2 97.59%浮游菌 不可計數(shù) 1 ＞99.67%東墻面 47 0 100%南墻面 36 0 100%西墻面 44 1 97.72%北墻面 29 1 96.55%地面 52 2 96.15%設(shè)備 46 1 97.83%

6.3 消毒效果確認(rèn)

菌種 臭氧殺菌率(%)金黃色葡萄球菌 99.992銅綠假單胞菌 99.997大腸埃希菌 99.997枯草芽孢桿菌 99.999白色念珠菌 99.991表皮葡萄球菌(環(huán)境菌) 99.999

通過以上驗證工作，可以得出以下結(jié)論：1.臭氧發(fā)生器開啟5分鐘后，臭氧濃度≥15ppm，滿足設(shè)計要求。2.關(guān)閉臭氧發(fā)生器150分鐘后，臭氧濃度低于0.1ppm，滿足設(shè)計要求。

3.環(huán)境監(jiān)測結(jié)果表明環(huán)境菌消亡率≥90.00%，符合要求。

4.生物挑戰(zhàn)性試驗結(jié)果表明，6組特征菌的消毒效果≥99.99%，符合要求。

綜上所述，該臭氧發(fā)生器運行性能能夠達(dá)到設(shè)計要求、并滿足環(huán)境消毒效果的要求，可以用于生產(chǎn)車間的日常消毒。

[1]國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范[M].北京：2011，1-42.

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品認(rèn)證管理中心.藥品GMP指南[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2011，47-82.

[3]中華人民共和國衛(wèi)生部.消毒技術(shù)規(guī)范[M].北京：2002，102-110.

[4]國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品安全監(jiān)管司、藥品認(rèn)證管理中心.藥品生產(chǎn)驗證指南[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2003，112-125.