譚長江 于沛江 王群義

(1.即墨市畜牧獸醫(yī)局，山東即墨 266200；2.青島易邦生物工程有限公司，山東青島 266032)

ELISA在預防雞傳染性支氣管炎早期感染中的作用和意義

譚長江1于沛江1王群義2*

(1.即墨市畜牧獸醫(yī)局，山東即墨 266200；2.青島易邦生物工程有限公司，山東青島 266032)

雞傳染性支氣管炎是危害養(yǎng)殖業(yè)較大的傳染性疾病之一。近幾年該病的發(fā)病率有增加趨勢。特別是白羽肉雞的呼吸道綜合征和蛋雞、種雞的生殖系統(tǒng)障礙對養(yǎng)殖業(yè)的危害最大。早期采用ELISA檢測法對監(jiān)控和預防肉雞呼吸道綜合征和蛋雞、種雞的生殖系統(tǒng)障礙具有重要意義和良好的經(jīng)濟價值。

ELISA 傳染性支氣管炎 早期感染 呼吸道綜合征 生殖系統(tǒng)障礙

1 近期肉雞（白羽肉雞等品種為代表）呼吸道綜合征的流行特點

（1）冬季、春季或季節(jié)交替時多發(fā)；

（2）3～10日齡的雞群最易感。傳支本身引起的發(fā)病率和死亡率不高，臨床癥狀不典型，但會破壞氣管纖毛的完整性；

（3）感染過傳支的雞群，5～7天后再次感染H9亞型禽流感時常導致嚴重的臨床癥狀，如聚堆、張口呼吸、怪叫、采食下降，死亡率高達5%～30%；

（4）剖檢癥狀主要為：氣管充出血，支氣管被黃白色干擾物堵塞。

（5）青島易邦實驗室對2010～2013年臨床樣品檢測發(fā)現(xiàn)，96份H9亞型AIV陽性的樣品中，有約67%的樣品為IBV陽性，且混合感染雞群死亡率一般均高達30%以上。這充分說明傳支在白羽肉雞呼吸道綜合征的發(fā)生過程中起著重要作用。

2 蛋、種雛雞早期感染傳染性支氣管炎引起生殖系統(tǒng)障礙的流行特點

（1）冬季、春季育雛的雞群多發(fā)；

（2）育雛頻繁，空欄時間較短的雞場多發(fā)；

（3）雞群感染后一般無臨床癥狀；

（4）雞群開產(chǎn)后，卵殼蛋、沙殼蛋、小蛋較多；蛋清稀薄如水；產(chǎn)蛋率上升緩慢，無產(chǎn)蛋高峰，嚴重的僅有50%～60%；

（5）開產(chǎn)后的雞群進行病原分離，很難分離到病毒。

3 雞傳染性支氣管炎防控的難點

（1）肉雛雞和蛋雛雞感染傳染性支氣管炎具有早期和隱形的特點，很難被大家在第一時間發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)時已經(jīng)引起了較大的損失。比如蛋雛雞在2周內(nèi)感染傳染性支氣管炎，一直到開產(chǎn)后出現(xiàn)蛋殼質(zhì)量問題，無產(chǎn)蛋高峰等生殖障礙時，我們才意識到雞群在小日齡感染了傳支；這期間會導致多批次雞群感染發(fā)病。

（2）單靠疫苗的免疫不能取得100%的保護：經(jīng)調(diào)查，傳支在冬季、春季多發(fā)。在同一個雞場，在同樣的疫苗免疫、飼養(yǎng)管理水平下，夏季和秋季很少發(fā)病，一到冬季和春季發(fā)病率就會增加。實驗證明，在健康和生產(chǎn)性能正常的雞群中能檢測到野毒和感染IBV后抗體水平大幅上升現(xiàn)象。這說明傳染性支氣管炎需要綜合防控，不能單靠疫苗。

4 ELISA早期檢測的意義

（1）通過ELISA檢測可及時發(fā)現(xiàn)雞群是否感染傳支野毒。比如ELISA抗體滴度在1500以上，預示著雞群早期感染了野毒。及時采取措施來減少損失非常重要；

（2）評估疫苗的免疫效果；免疫良好的疫苗，可以阻斷病毒的傳播和降低病毒在機體內(nèi)的繁殖概率。

（3）在高發(fā)季節(jié)，可以根據(jù)ELISA抗體，評估雞群感染傳支的損失情況。比如在冬季，蛋雛雞的ELISA抗體明顯高出免疫值，這表明該雞群感染了傳染性支氣管炎野毒，雞群開產(chǎn)后出現(xiàn)生殖障礙的概率就很高。

5 某蛋雞場臨床檢測情況

（1）檢測背景：2015.8月份，北方某蛋雞場年反映有部分雞舍雞群開產(chǎn)后無產(chǎn)蛋高峰，經(jīng)診斷疑似雞傳染性支氣管炎早期感染。該免疫程序：1日齡新支活疫苗噴霧，7日齡新支活疫苗點眼。

（2）自2015年10月份開始，對該場新引的雛雞從1日齡開始，每間隔4周檢測一次，一直檢測到300日齡，利用間接ELISA法對傳染性支氣管炎進行了抗體檢測。對9批，共計27萬只商品雞進行了跟蹤檢測。經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，在1～3月份育雛，4周齡ELISA抗體異常的雞群，開產(chǎn)后無產(chǎn)蛋高峰，蛋殼質(zhì)量異常；4周齡ELISA抗體正常的雞群，產(chǎn)蛋率和蛋殼質(zhì)量正常。以下是兩個雞舍的檢測情況。

5#雞舍：2016.1.27進雞，20周齡產(chǎn)蛋率達到70.54%后不再上升，卵殼蛋占3.17%，破殼蛋、小蛋等次品蛋占1.3%，蛋清稀薄。表1是該雞群育雛期間傳支的ELISA抗體（OD值）檢測結果。

10#雞舍：2016.3月22號進雞，30周齡產(chǎn)蛋率96%，蛋殼質(zhì)量正常。表2是該雞群雛雞期間ELISA的檢測結果。

表1

表2

6 傳支的綜合防控措施

（1）科學的飼養(yǎng)管理：1～2周齡內(nèi)，育雛溫度恒定，晝夜溫差小。通風換氣要循序漸進，重視體感溫度。溫差較大可能是導致感染雞群發(fā)病的主要原因。

（2）重視生物安全：進雞前要嚴格消毒，發(fā)病率高的雞場，空欄時間不少于3周。人員要固定，避免人員較差感染；

（3）做好疫苗免疫工作：傳染性支氣管炎在我國主要流行的血清型是QX和M型，應重點預防含QX和M株的疫苗。臨床發(fā)現(xiàn)Ma5和L4/91聯(lián)合使用對QX和M株有較好的免疫預防效果。在疫苗的免疫過程中，應注意以下幾點：早期免疫：免疫越早，發(fā)病率和感染率越低；及時二免：二次免疫后，雞群才能得到真正的免疫保護；免疫方法：生產(chǎn)中可采用噴霧、點眼、飲水的方法。從目前中國的養(yǎng)殖現(xiàn)狀，特別是蛋雛雞建議采用點眼的方法，通過點眼，免疫更確實、有效，保護率高。免疫程序：

1～3日齡：支易靈或新支靈 1羽份 點眼

7～9日齡：新支靈 1羽份 點眼

（4）加強實驗室檢測。分別在5日齡和12日齡，采氣管棉拭子，利用PCR法監(jiān)測傳支野毒的感染；在7日齡、14日齡、21日齡分別采血，采用ELISA法，通過檢測抗體水平來監(jiān)控野毒的感染情況和評估疫苗的保護率。根據(jù)抗體水平來對雞群采取針對性措施。在1-2周感染傳支野毒，ELISA OD值可達2000～10000。一旦確定雞群感染傳支應及時采取措施，避免下批次雞群的感染和發(fā)病。

7 小結

ELISA檢測技術在我國已比較普及和成熟，利用該技術對傳染性支氣管炎的監(jiān)控和預防會起到較好的防控效果。

[1] 李峰，王錫堃.雞傳染性支氣管炎間接ELISA方法的研究——Ⅱ.應用ELISA檢測雞傳染性支氣管炎病毒抗體[J].中國預防獸醫(yī)學報，1991，（3）：19-21.

[2] 屈常林，Bart Van，郭龍宗，等.用ELISA方法對雞傳染性支氣管炎做出診斷[A].山東畜牧獸醫(yī)學會禽病學專業(yè)委員會第一次學術專業(yè)委員會論文集[C].2009：127.