新吉夫++++++青格勒圖

[摘要] 目的 探討幽門螺桿菌（Hp）感染與原發(fā)性開角型青光眼（POAG）之間的相關(guān)性。 方法 選取2013年3月～2015年10月在內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院眼科住院治療的70例POAG患者（實(shí)驗(yàn)組）及70例健康人群（對(duì)照組）作為研究對(duì)象。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法（ELISA）測定研究對(duì)象血清標(biāo)本中的Hp特異性免疫球蛋白抗體G的水平變化情況。 結(jié)果 實(shí)驗(yàn)組患者的Hp感染的血清陽性率（88.57%）較對(duì)照組Hp感染的血清陽性率（32.86%）增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。Hp感染與POAG發(fā)生間的OR值為5.69，95%CI 1.52～19.43。 結(jié)論 Hp感染與原發(fā)性開角型青光眼發(fā)病間具有相關(guān)性，Hp感染可能是原發(fā)性開角型青光眼的危險(xiǎn)因素之一。

[關(guān)鍵詞] 幽門螺桿菌；原發(fā)性開角型青光眼；幽門螺桿菌特異性免疫球蛋白抗體G

[中圖分類號(hào)] R755.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2017）02（c）-0132-04

原發(fā)性開角型青光眼（primary open-angle glaucoma，POAG）是世界范圍內(nèi)造成患者失明的主要原因，每年大約有7000萬人群罹患POAG[1-2]。POAG是一種以視力衰退及視神經(jīng)乳頭杯狀病變?yōu)樘卣鞯穆砸暽窠?jīng)病變疾病。雖然POAG的發(fā)病機(jī)制仍然不明了，但是一些發(fā)病相關(guān)的高風(fēng)險(xiǎn)因素如高齡、民族、青光眼家族史以及眼內(nèi)壓的升高等已經(jīng)被廣泛研究[3-4]。此外，還有一些可能的致病因素，如內(nèi)皮素依賴途徑的血管調(diào)節(jié)及細(xì)胞因子依賴途徑的血小板聚集造成的眼部血供損傷，進(jìn)而影響視神經(jīng)乳頭神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡以及其他惡化青光眼等視神經(jīng)疾病的進(jìn)程[5-7]。自從1982年幽門螺桿菌（helicobacter pylori，Hp）被發(fā)現(xiàn)以來，絕大多數(shù)研究主要集中于其與胃潰瘍、胃癌、心腦血管疾病及一些自身免疫性疾病發(fā)生的關(guān)系研究[8]。近來研究表明，Hp感染與青光眼發(fā)生存在相關(guān)性，但關(guān)于Hp感染與青光眼發(fā)生的關(guān)系仍然存在一定的爭論[9-10]。鑒于此，本研究將探討Hp感染與POAG發(fā)病間的關(guān)系，以期為POAG的臨床診治提供理論支持。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年3月～2015年10月在內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）眼科住院的70例POAG患者（實(shí)驗(yàn)組）及70例健康人群（對(duì)照組）作為研究對(duì)象。POAG入選標(biāo)準(zhǔn)：眼內(nèi)壓（intraocular pressure，IOP）≥21 mmHg；前房角鏡檢查確定前房為開角型；青光眼視神經(jīng)乳頭已經(jīng)發(fā)生包括邊緣變薄、顳區(qū)上部或者下部下凹等的病變；發(fā)生如視敏度下降、生理盲點(diǎn)擴(kuò)大、旁中心暗點(diǎn)等的改變。排除具有閉角型青光眼家族史及其他類型青光眼疾病的患者。兩組人群均排除罹患糖尿病，上消化道疾病，嚴(yán)重的系統(tǒng)性疾病，腫瘤，嚴(yán)重的屈光不正以及1個(gè)月內(nèi)曾服用H2受體拮抗劑、質(zhì)子泵抑制劑、抗生素、鉍制劑、非甾體抗炎藥等患者。所有受試對(duì)象均簽署知情同意，且研究獲得我院倫理道德委員會(huì)批準(zhǔn)。POAG組中，男38例，女32例，年齡為56～83歲，平均（72.51±8.16）歲；對(duì)照組中，男30例，女40例，年齡為52～84歲，平均（70.29±9.34）歲。兩組人群在年齡、性別方面比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。

1.2 檢查方法

所有患者的眼部檢查包括壓平眼壓測量法及前房角鏡檢查；視神經(jīng)乳頭病變的檢查采用+78 D透鏡；視眼檢查采用Humphrey自動(dòng)視眼計(jì)。對(duì)照組人群經(jīng)裂隙燈，間接檢眼鏡及視眼檢查，IOP測定等證實(shí)無視神經(jīng)乳頭病變及青光眼癥狀，視眼無改變及IOP < 21 mmHg。

1.3 血清Hp特異性免疫球蛋白抗體G的測定方法

清晨空腹抽取所有受試對(duì)象靜脈血液5 mL，離心3000 r/min 10 min，吸取上清液，-20℃凍存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附試驗(yàn)法（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）測定研究對(duì)象血清標(biāo)本中Hp特異性免疫球蛋白抗體G（H. pylori IgG antibody，Hp CagA-IgG）的水平變化情況。ELISA試劑盒為美國T.P.N.LAB公司生產(chǎn)。實(shí)驗(yàn)過程均嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作。簡要步驟如下：依次將標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗Hp CagA-IgG標(biāo)記的親和素加入往預(yù)先包被抗Hp CagA-IgG抗體的微孔中，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物顯色，待測物質(zhì)在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色；溶液顯色的程度與待測物質(zhì)中Hp CagA-IgG水平呈正相關(guān)。隨即利用酶標(biāo)儀（λ=450nm）測定光密度（A值），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線得出Hp CagA-IgG的濃度。

ELISA測定血清Hp CagA-IgG的結(jié)果顯示，以血清Hp CagA-IgG標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫軸，吸光度為縱軸，所得標(biāo)準(zhǔn)曲線線性良好（y=0.0015x+0.0052，R2=0.9998），提示實(shí)驗(yàn)結(jié)果可靠。說明書Hp CagA-IgG的最小精確值為8 U/mL，因此定義：Hp CagA-IgG血清陽性為Hp CagA-IgG濃度≥8 U/mL；Hp CagA-IgG血清陰性為Hp CagA-IgG濃度<8 U/mL。標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)算OR值和95%CI，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果表明，POAG組中有62例（88.57%）患者呈現(xiàn)Hp CagA-IgG血清陽性，而對(duì)照組人群僅有23例（32.86%）呈現(xiàn)Hp CagA-IgG血清陽性。兩組的血清Hp CagA-IgG 陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=11.86，P=0.008）。Hp感染與POAG發(fā)生間的OR值為5.69，95%CI 1.52～19.43。

3 討論

青光眼是常見的致盲眼病。按照眼部房角開放程度將其分為POAG和原發(fā)性閉角型青光眼（primary angle-closure glaucoma，PACG）。目前對(duì)于PACG發(fā)病機(jī)制的研究較為清楚，而由于POAG的致病因素及發(fā)病機(jī)制較PACG復(fù)雜；如青光眼發(fā)生時(shí)，眼部小梁細(xì)胞的結(jié)構(gòu)及功能異常，致房水生成受損，造成眼內(nèi)壓增高；視神經(jīng)細(xì)胞凋亡加劇；自身免疫反應(yīng)應(yīng)激過度，可能產(chǎn)生直接損害視網(wǎng)膜細(xì)胞的抗體等，所以POAG一直是青光眼研究領(lǐng)域的難點(diǎn)及重點(diǎn)問題[11]。近年來，有研究表明，Hp作為慢性胃炎和消化道潰瘍等消化道疾病及胃癌的高危危險(xiǎn)因素，可通過鞭毛、蛋白酶及內(nèi)毒素等引起宿主組織的各種病理變化，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM、IgG、IgA，從而廣泛參與眼部疾病進(jìn)程。El等[12]曾檢測67例干燥綜合征的患者血清抗Hp感染的IgG及IgM抗體；結(jié)果表明，干燥綜合征患者的血清抗Hp感染的IgG及IgM抗體濃度較沒有罹患干燥綜合征及健康人群顯著增高，且血清抗Hp感染的IgG及IgM抗體濃度與干燥綜合征疾病進(jìn)程呈正相關(guān)。Rahbani等[13]曾對(duì)25例特發(fā)性中心性漿液性脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜病變的患者進(jìn)行抗Hp感染治療的臨床療效展開調(diào)查。結(jié)果提示，經(jīng)過16周的治療，ICSCR患者的視網(wǎng)膜下積液吸收速度顯著加快。

血清抗Hp CagA-IgG抗體的測定較黏膜活組織檢查等有創(chuàng)檢查，以及易受口腔內(nèi)尿素酶影響或者服用抗生素影響結(jié)果的13C或14C尿素酶呼吸實(shí)驗(yàn)相比，是一種無創(chuàng)檢查，臨床被廣泛作為檢測Hp感染的方法[14]。本研究結(jié)果表明，POAG患者的血清Hp CagA-IgG陽性率較對(duì)照組人群顯著增高；Hp感染與POAG發(fā)生間的OR值為5.69，95%CI為（1.58-20.50），提示Hp感染與POAG發(fā)病間存在相關(guān)性。有學(xué)者曾采用一些如活組織檢查及快速尿素酶檢測唾液及血清Hp CagA-IgG，結(jié)果顯示青光眼患者的Hp感染率較患貧血癥對(duì)照組人群增高[15]。當(dāng)青光眼患者經(jīng)過根除Hp治療后，眼部癥狀較根除Hp治療前得到顯著改善，這提示Hp與青光眼發(fā)病間存在相關(guān)性[16]。Kountouras等[17]研究表明，Hp感染與視神經(jīng)元細(xì)胞凋亡存在相關(guān)性。同時(shí)，他們的研究還表明Hp感染是POAG的環(huán)境遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素。Hong等[18]的一項(xiàng)采用碳尿素呼吸方法測定Hp感染與POAG發(fā)病間關(guān)系研究結(jié)果提示，POAG患者Hp感染率較對(duì)照組人群Hp感染率顯著增高。

目前，關(guān)于Hp感染與POAG發(fā)病間可能的病理發(fā)生機(jī)制有：①血管活性物質(zhì)如前列腺素、白細(xì)胞三烯等類花生酸類物質(zhì)，以及炎性因子大量釋放；急性時(shí)C反應(yīng)蛋白，纖維蛋白原水平的急劇升高；特別是具有調(diào)節(jié)前視神經(jīng)血管的收縮的內(nèi)皮素-1及影響眼動(dòng)脈肌肉彈性的一氧化氮水平的變化。以上這些均可造成眼球發(fā)生青光眼病變[19]。②刺激血小板及血小板-白細(xì)胞集聚導(dǎo)致眼部血液循環(huán)障礙[20]。③青光眼患者存在一個(gè)共同的遺傳因子致使其具有Hp感染的遺傳易感性。④Hp感染通過FAS/FASL及線粒體介導(dǎo)的凋亡途徑造成青光眼患者視神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡[21]。⑤血液循環(huán)中的抗Hp抗體可能通過房水屏障，聚集與房水中，進(jìn)一步加劇青光眼的疾病進(jìn)程[22]。

綜上所述，本研究結(jié)果提示Hp感染與POAG發(fā)病間存在關(guān)聯(lián)， Hp感染可能在POAG發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。但本研究還存在樣本量偏少，方法單一的局限性，后續(xù)將擴(kuò)大樣本量及采用多種方法聯(lián)合檢測方式繼續(xù)深入研究。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Bulut M，Yaman A，Erol MK，et al. Cognitive performance of primary open-angle glaucoma and normal-tension glaucoma patients [J]. Arq Bras Oftalmol，2016，79（2）：100-104.

[2] Cui Y，Su T，Zhang SD，et al. Elevated urine formaldehyde in elderly patients with primary open angle glaucoma [J]. Int J Ophthalmol，2016，9（3）：411-416.

[3] 張莉，徐亮，楊樺，等.原發(fā)性開角型青光眼進(jìn)展的危險(xiǎn)因素研究概況[J].中華眼科雜志，2009，45（4）：380-384.

[4] 楊慶國，王平，岳軍，等.女性原發(fā)性開角型青光眼發(fā)病的危險(xiǎn)因素分析[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2015，42（10）：1910-1913.

[5] Ohira S，Inoue T，Iwao K，et al. Factors influencing aqueous proinflammatory cytokines and growth factors in uveitic glaucoma [J]. PLoS One，2016，11（1）：e0147080.

[6] Chung HJ，Hwang HB，Lee NY. The association between primary open-angle glaucoma and blood pressure：two aspects of hypertension and hypotension [J]. Biomed Res Int，2015，2015（2）：827516.

[7] Choi J，Kook MS. Systemic and ocular hemodynamic risk factors in glaucoma [J]. Biomed Res Int，2015，2015：141905.

[8] Tongtawee T，Kaewpitoon S，Kaewpitoon N，et al. Diagnosis of Helicobacter pylori Infection [J]. Asian Pac J Cancer Prev，2016，17（4）：1631-1635.

[9] Abrishami M，Kargozar A，Rashed T，et al. Association of helicobacter pylori infection with primary open angle glaucoma [J]. Bina J Ophthalmol，2007，12（3）：289-293.

[10] Galloway， PH，Warner SJ， Morshed MG.，et al. Helicobacter pyloriinfection and the risk for open-angle glaucoma [J]. Ophthalmology，2003，110（5）：22-925.

[11] 劉豪杰，周明，孫晶，等.選擇性激光小梁成形術(shù)治療原發(fā)性開角型青光眼觀察[J].中國實(shí)用眼科雜志，2011， 29（4）：385-387.

[12] El Miedany YM，Baddour M，Ahmed I，et al. Sjogren's syndrome：concomitant H. pylori infection and possible correlation with clinical parameters [J]. Joint Bone Spine，2005， 72（2）：135-141.

[13] Rahbaninobar MB，Javadzadeh A，Ghojazadeh L，et al. The effect of helicobacter pylori treatment on remission of idiopathic central serous chorioretinopathy [J]. Molecular Vision，2011，17（6）：99-103.

[14] Izzotti A，Saccà SC，Bagnis A， et al. Glaucoma and helicobacter pyloriinfection： correlations and controversies [J]. Br J Ophthalmol，2009，93（11）：420-1427.

[15] Yamaguchi Y，Nagata Y，Hiratsuka R，et al. Gastric cancer screening by combined assay for serum anti-helicobacter pylori IgG antibody and serum pepsinogen levels—the ABC method [J]. Digestion，2016，93（1）：13-18.

[16] Abdollahi A，Shoar S，Jafari S，et al. Seroprevalence of helicobacter pylori in human immunodeficiency virus-positive patients and it's correlation with CD4（+） lymphocyte count [J]. Niger Med J，2014，5（1）：67-72.

[17] Kountouras J，Mylopoulos N，Boura P， et al. Relationship between H.pylori infection and glaucoma [J]. Ophthalmology，2001，108（3）：599-604.

[18] Hong Y，Zhang Ch，Duan L，et al. Relationship between helicobacter pyloriinfection and open angle glaucoma in China [J]. Asian J Ophthalmol，2009，9（3）：205-208.

[19] Kountouras J，Mylopoulos N，Chatzopoulos D，et al. Eradication of Helicobacter Pylorimay be beneficial in the management of chronic open-angle glaucoma [J]. Arch Intern Med，2002，162（11）：1237-1244.

[20] Kountouras J，Zavos C，Grigoriadis N， et al. Helicobacter Pylori infection as an environmental familial clustering risk factor for primary open-angle glaucoma [J]. Clin Experiment Ophthalmol，2008，36（3）：296-297.

[21] Samarai V，Sharifi N，Nateghi Sh. Association between helicobacter pylori infection and primary open angle glaucoma [J]. Glob J Health Sci，2014，6（7 Spec No）：13-17.

[22] Kountouras J，Zavos C，Chatzopoulos D. Primary open-angle glaucoma：pathophysiology and treatment [J]. Lancet，2004，364（9442）：1311-1312.

（收稿日期：2016-09-06 本文編輯：李岳澤）