謝付靜，孫紅娟，楊亞培，趙慶兵，李軻

(1聊城市人民醫(yī)院， 山東聊城252000；2 聊城市東昌府人民醫(yī)院)

血漿白細胞抗原G、白細胞介素10水平在傳染性單核細胞增多癥診斷中的價值

謝付靜1，孫紅娟2，楊亞培1，趙慶兵2，李軻1

(1聊城市人民醫(yī)院， 山東聊城252000；2 聊城市東昌府人民醫(yī)院)

目的探討血漿白細胞抗原G(HLA-G)及白細胞介素10(IL-10)水平診斷傳染性單核細胞增多癥的價值。方法選擇62例傳染性單核細胞增多癥患兒為觀察組，60例健康兒童為對照組。采用ELISA法檢測兩組血漿HLA-G、IL-10水平；采用直線相關(guān)分析法分析觀察組血漿HLA-G與IL-10的相關(guān)性；繪制血漿HLA-G、IL-10水平及二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的受試者工作曲線(ROC曲線)，比較其曲線下面積，計算血漿HLA-G、IL-10水平及二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的效能。結(jié)果觀察組、對照組血漿HLA-G水平分別為(32.32±10.87)、(6.55±3.24)U/mL，IL-10水平分別為(94.17±15.52 )、(13.31±7.66)pg/mL。觀察組血漿HLA-G、IL-10水平均高于對照組(P均<0.05)。直線相關(guān)分析結(jié)果顯示，觀察組血漿HLA-G水平與IL-10水平呈正相關(guān)(r=0.497，P<0.05) 。血漿HLA-G、血漿IL-10及二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的ROC曲線下面積分別為0.701、0.622、0.870。約登指數(shù)最大時血漿HLA-G、IL-10水平(截斷值)分別為10.6 U/mL、25.7 pg/mL，此時血漿HLA-G水平診斷傳染性單核細胞增多癥的靈敏度為0.665、特異度為0.703；血漿IL-10水平分別為0.626、0.612，二者聯(lián)合檢測分別為0.851、0.834。二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的ROC曲線下面積、靈敏度、特異度均高于HLA-G、IL-10單項檢測(P均<0.05)。結(jié)論血漿HLA-G、IL-10水平均可用于傳染性單核細胞增多癥的診斷；二者聯(lián)合檢測的診斷效能優(yōu)于單項檢測。

傳染性單核細胞增多癥；白細胞抗原G;白細胞介素10

傳染性單核細胞增多癥是由EB病毒感染導(dǎo)致的一種傳染病，其癥狀與上呼吸道感染類似，容易誤診[1]；近年來其發(fā)病率有所上升[2]。白細胞抗原G(HLA-G)是一種重要的免疫抑制分子，病毒感染時其持續(xù)表達，能夠幫助病毒逃避宿主免疫系統(tǒng)的監(jiān)視[3]；白細胞介素10(IL-10)是具有免疫抑制功能的細胞因子，可對免疫反應(yīng)進行負性調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，人體感染 EB病毒后血漿HLA-G、IL-10水平均升高[4,5]。目前血漿HLA-G、IL-10水平診斷傳染性單核細胞增多癥的研究鮮見。本研究觀察了傳染性單核細胞增多癥患兒血漿HLA-G、IL-10水平，現(xiàn)分析其診斷傳染性單核細胞增多癥的效能。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年1月～2017年1月收治的傳染性單核細胞增多癥患兒62例為觀察組，男35例、女27例，年齡1～10 歲；均符合《諸福棠實用兒科學(xué)》[4]診斷標準，無其他并發(fā)癥。另選同期查體的健康兒童60例為對照組，男32例、女28例，年齡1～10歲；近半年無病毒感染史。兩組性別比例、年齡無統(tǒng)計學(xué)差異(P均>0.05)。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準，受試監(jiān)護人均簽署知情同意書。

1.2 血漿HLA-G、IL-10檢測 清晨空腹抽取兩組靜脈血2～3 mL，放入EDTA抗凝管，混勻后靜置0.5 h，室溫3 000 r/min離心10 min，編號凍存。采用ELISA法檢測血漿HLA-G、IL-10水平。分析觀察組血漿HLA-G與IL-10水平的相關(guān)性。HLA-G檢測試劑盒購自捷克Exbio公司，IL-10檢測試劑盒購自美國R&D公司，均嚴格按照說明書操作。

1.3 血漿HLA-G、IL-10及二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的效能分析 繪制血漿HLA-G、IL-10及二者聯(lián)合診斷傳染性單核細胞增多癥的受試者工作曲線(ROC曲線)，分別計算曲線下面積；采用最大約登指數(shù)法計算血漿HLA-G、IL-10診斷傳染性單核細胞增多癥的截斷值，計算其診斷傳染性單核細胞增多癥的敏感性及特異性。

2 結(jié)果

2.1 兩組血漿HLA-G、IL-10水平比較 觀察組、對照組血漿HLA-G水平分別為(32.32±10.87)、(6.55±3.24)U/mL，IL-10水平分別為(94.17±15.52 )、(13.31±7.66)pg/mL。觀察組血漿HLA-G、IL-10水平均高于對照組(P均<0.05)。

2.2 觀察組血漿HLA-G水平與IL-10水平的相關(guān)性 直線相關(guān)分析結(jié)果顯示，觀察組血漿HLA-G水平與IL-10水平呈正相關(guān)(r=0.497，P<0.05)。

2.3 血漿HLA-G、IL-10及二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的效能 血漿HLA-G、IL-10、HLA-G聯(lián)合IL-10診斷傳染性單核細胞增多癥的ROC曲線下面積分別為0.701、0.622、0.870。約登指數(shù)最大時血漿HLA-G、IL-10水平(截斷值)分別為10.6 U/mL、25.7 pg/mL，此時血漿HLA-G水平診斷傳染性單核細胞增多癥的敏感性為0.665、特異性為0.703；血漿IL-10水平分別為0.626、0.612，二者聯(lián)合檢測分別為0.851、0.834。二者聯(lián)合檢測診斷傳染性單核細胞增多癥的ROC曲線下面積、敏感性、特異性均高于HLA-G、IL-10單項檢測(P均<0.05)。

3 討論

EB病毒感染人體后，侵犯B淋巴細胞，大多數(shù)表現(xiàn)為隱形感染，沒有明顯癥狀[6]。當機體免疫力低下或有其他因素誘導(dǎo)時可再次激活病毒。 研究證實，HLA-G主要與NK細胞、T細胞上的抑制性受體結(jié)合,抑制免疫細胞的殺傷活性[7～9]；病毒誘導(dǎo)機體產(chǎn)生HLA-G被認為是逃避免疫系統(tǒng)殺傷的一種機制。在病毒感染的過程中有眾多細胞因子水平的改變，其中IL-10在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮負向調(diào)節(jié)作用，是為數(shù)不多的免疫抑制因子[10～12]。研究發(fā)現(xiàn)，在巨細胞病毒感染人體后IL-10表達顯著增高，并與HLA-G互相促進[13～15]。本研究觀察組血漿HLA-G、IL-10水平明顯高于對照組，且血漿HLA-G水平與IL-10水平呈正相關(guān)，提示HLA-G與IL-10在傳染性單核細胞增多癥的發(fā)生發(fā)展過程中具有協(xié)同作用，血漿HLA-G、IL-10水平可作為傳染性單核細胞增多癥的輔助診斷指標。

本研究結(jié)果顯示，血漿HLA-G、IL-10水平及二者聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積均大于0.5；但二者聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積及診斷傳染性單核細胞增多癥的敏感性、特異性均明顯高于HLA-G及IL-10單項檢測。說明血漿HLA-G、IL-10水平單獨及聯(lián)合檢測均可用于傳染性單核細胞增多癥的診斷，但聯(lián)合檢測的診斷效能高于單項檢測。目前傳染性單核細胞增多癥患者體內(nèi)HLA-G、IL-10表達升高的分子機制尚不完全清楚，需進一步研究探討。

[1] Nadir I, Kasapoglu B, Turkay C. Differential clinical presentations of Epstein-Barr virus infection and a brief literature review[J]. Gastroenterol Nurs, 2012,35(4):286-289.

[2] 劉鋼,謝正德,申昆玲.重視兒童嚴重EB病毒性疾病[J].中華兒科雜志,2016,54(8):561-562.

[3] 王慧燕,田可港,浮苗,等.傳染性單核細胞增多癥患兒血漿sHLA-G及外周血淋巴細胞亞群檢測[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(5):901-903+906.

[4] 胡亞美，江載芳.諸福棠實用兒科學(xué)[M].8版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2015：919.

[5] 何志旭,趙星.EB 病毒原發(fā)性感染研究進展[J].中國小兒血液與腫瘤雜志,2013,18(6):241-244.

[6] 徐丹萍,林愛芬,顏衛(wèi)華,等.HLA-G二聚體結(jié)構(gòu)及生物學(xué)功能研究進展[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志,2014,34(1):75-80.

[7] 張華娟.急性呼吸道病毒感染患兒病原學(xué)及血IL-10水平變化的研究[D].大連醫(yī)科大學(xué),2014.

[8] 田可港,浮苗,鄭曉群.HCMV感染患兒血漿可溶性HLA-G及IL-10檢測的意義[J].醫(yī)學(xué)研究雜志,2012,41(5):86-88.

[9] 林應(yīng)標,李琦,陳虹亮,等患兒傳染性單核細胞增多癥EB病毒外周血淋巴細胞及異型淋巴細胞比值變化的臨床研究[J]. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2017,27(3):667-670.

[10] Amodio G, Sales de Albuquerque R, Gregori S. New insights into HLA-G mediated tolerance[J]. Tissue Antigens, 2014,84(3):255-263.

[11] 黃丹倩,金玲芝,徐丹萍. HLA-G基因表觀遺傳學(xué)調(diào)控研究進展[J].現(xiàn)代免疫學(xué),2016,36(5):424-429.

[12] Okano M, Gross TG. Acute or chronic life-threatening diseases associated with Epstein-Barr virus infection[J]. Am J Med Sci, 2012,343(2):483-489.

[13] 賴媚媚,周秋菊,樓韻燕,等.HCMV感染對人THP-1細胞HLA-G及其受體表達的影響[J].中國病理生理雜志,2017,33(2):329-335.

[14] 王慧燕,田可港,浮苗,等.傳染性單核細胞增多癥患兒血漿sHLA-G及外周血淋巴細胞亞群檢測[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(5):901-903.

[15] 陳曉晴,王慧燕,高艷,等.HLA-G14 bp基因多態(tài)性及血漿sHLA-G水平與兒童EV71感染的關(guān)系研究[J].中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志,2012,26(6):429-431.

中國博士后科學(xué)基金面上項目(2013M531617)。

李軻(E-mail： liker66@sina.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.40.032

R725.1

B

1002-266X(2017)40-0095-02

2017-04-10)