李玖平, 陳利紅, 楊浩瑩

(1. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬三二〇一醫(yī)院 輸血科, 陜西 漢中, 723000; 2. 陜西省漢中市第二人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科, 陜西 漢中, 723000)

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自身免疫性溶血性貧血對(duì)輸血前血型鑒定、抗體篩查及交叉配血的影響

李玖平1, 陳利紅2, 楊浩瑩1

(1. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬三二〇一醫(yī)院 輸血科, 陜西 漢中, 723000; 2. 陜西省漢中市第二人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科, 陜西 漢中, 723000)

自身免疫性溶血性貧血; 血型鑒定; 抗體篩查; 交叉配血

輸血在搶救自身免疫性溶血性貧血(AIHA)患者過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用，但進(jìn)行血型鑒定、抗體篩選及交叉配血時(shí)確保治療安全性是仍需解決的問(wèn)題[1]。AIHA患者的血清中存在全凝集素，血型鑒定比較困難，還有可能使共存的同種抗體難以被檢測(cè)，交叉配血也不相合，加大輸血的風(fēng)險(xiǎn)[2]。本研究對(duì)400例AIHA患者的血液標(biāo)本進(jìn)行輸血前血型鑒定、抗體篩查和交叉配血，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2013—2015年收治的AIHA患者400例，其中男210例，女190例，年齡20～73歲，平均(42.51±2.32)歲; 病程2～6年，平均(3.28±2.13)年。

1.2 檢測(cè)試劑

譜細(xì)胞、抗-A/B血型定型試劑、直接抗人球蛋試劑由上海血液醫(yī)藥生物有限公司提供; LISS/Coombs卡、ABO/RhD血型檢測(cè)卡等由江陰力博醫(yī)藥生物技術(shù)股份公司提供。

1.3 檢測(cè)方法

① 血型鑒定：采取試管法, DTT處理后紅細(xì)胞與DAT強(qiáng)陽(yáng)性紅細(xì)胞的ABO正定型、RhD血型采取ABO血型定型卡對(duì)其進(jìn)行鑒定[3]。② DTT處理自凝紅細(xì)胞：采用DTT處理，紅細(xì)胞懸液保留[4]。③ 自身抗體吸收：采取參考文獻(xiàn)[5]中方法處理，吸收后的血清保留。④ 抗體篩選和鑒定：采取鹽水介質(zhì)試管法，檢測(cè)IgM抗體用自身抗體吸收后的血漿; 檢測(cè)IgG抗體則采用LISS-IAT法、直接IAT法[6]。⑤ 直接抗人球蛋白試驗(yàn)：采用LISS/Coombs卡等進(jìn)行交叉配血。

2 結(jié) 果

400份AIHA患者血液標(biāo)本中，溫自身抗體有342份(85.50%), 冷自身抗體有23份(5.75%), 混合型自身抗體有35份(8.75%)。血型鑒定結(jié)果：① 對(duì)ABO正定型、RhD血型干擾及解決方法：針對(duì)342份溫自身抗體中26份DAT強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本出現(xiàn)紅細(xì)胞非特異性凝集現(xiàn)象，可選用ABO血型卡; 而23份冷自身抗體和35份混合型自身抗體則因紅細(xì)胞自凝受影響, 9份(15.52%)在37 ℃溫鹽水中洗滌3遍, 13份(22.41%)用DTT處理紅細(xì)胞, 36份(62.07%)再使用ABO血型卡。② 對(duì)ABO反定型的干擾及解決方法: 342份溫自身抗體無(wú)干擾; 23份冷自身抗體和35份混合型自身抗體因Ac、Bc、Oc均產(chǎn)生凝聚從而受影響, 40份(68.97%)試管法, 37 ℃溫度下水浴孵育15 min, 18份(31.03%)自身抗體吸收后再試管法。

342份溫自身抗體型 AIHA 患者的抗體鑒定結(jié)果: 342份溫自身抗體篩選呈陰性; 51份在LISS/Coombs卡中反應(yīng)特異性, 47份有強(qiáng)弱之分。對(duì)51份有特異性的患者血漿采用LISS/Coombs法做抗體鑒定; 對(duì)其余患者血漿、自身抗體吸收后的血漿采用直接IAT法做抗體鑒定，結(jié)果顯示，無(wú)特異性自身抗體244份(71.35%), 抗體特異性為全凝集素; 有特異性自身抗體51份(14.91%), 抗體特異性為自身抗-D 7份、抗-Ce 39份、抗-M 2份、抗-Jka3份; 自生抗體+同種抗體47份(13.74%), 抗體特異性為同種抗-Ce 22份、抗-C 3份、抗-e 2份、抗-c E0份、抗-c 2份、抗-E 3份、抗-M 2份、抗-Jka2份、抗-Jkb1份。

23份冷自身抗體篩選呈陽(yáng)性; 其中3份在LISS/Coombs卡中反應(yīng)也呈陽(yáng)性。對(duì)其血漿做IgM類和IgG類抗體鑒定，結(jié)果顯示，無(wú)特異性自身抗體17份(73.91%), 抗體特異性為全凝集素(IgM, 3份37 ℃有反應(yīng)性); 有特異性自身抗體6份(26.09%), 抗體特異性為自身抗-HI 4份、抗-I 2份(IgM, 37 ℃均無(wú)反應(yīng)性); 自生抗體+同種抗體0份(0%), 抗體特異性為無(wú)。

35份患者血漿進(jìn)行抗體篩選，室溫下呈陽(yáng)性, 37 ℃無(wú)反應(yīng)性，孵育15 min呈陰性; 35份與篩選細(xì)胞在LISS/Coombs卡中的反應(yīng)均呈陽(yáng)性。采用試管法鹽水介質(zhì)對(duì)其血漿做IgM類抗體鑒定; 采用直接IAT對(duì)3其做IgG類抗體鑒定，結(jié)果顯示，無(wú)特異性自身抗體32份(91.43%), 抗體特異性為全凝集素(IgM類, 37 ℃無(wú)反應(yīng)性+IgG類); 有特異性自身抗體為0份(0%), 抗體特異性為無(wú); 自生抗體+同種抗體3份(8.57%), 抗體特異性為同種抗-Ce 2份、抗-cE 1份。

交叉配血方面: ① 342例溫抗體型AIHA患者中存在51例只有自身抗體且抗體有特異性, 47例同種+自身抗體, 244例只有同種抗體且抗體為全凝集素。主側(cè)交叉配血，無(wú)自身抗體對(duì)應(yīng)抗原的獻(xiàn)血者紅細(xì)胞，采用LISS/Coombs卡和試管法LISS-IAT, 分別相合21例、22例; 無(wú)同種抗體對(duì)應(yīng)抗原的均相合; 同種抗體且抗體為全凝集素，相合93例，不相合151例。② 23例冷抗體型AIHA患者與獻(xiàn)血者采用直接IAT法，均相合。③ 混合抗體型患者與獻(xiàn)血者紅細(xì)胞相合27例，不相合5例。35例混合抗體型中，存在自身+同種抗體3例和只有同種抗體且抗體為全凝集素32例。沒(méi)有同種抗體對(duì)應(yīng)抗原的用直接IAT法均相合。226例AIHA患者主側(cè)交叉配血相合, 200例采用洗滌紅細(xì)胞輸用, 26例采用懸浮紅細(xì)胞; 配血不相合者中，選擇輸用配血相合度相對(duì)最高的紅細(xì)胞35例。

3 討 論

近年來(lái)，AIHA發(fā)病率逐漸升高，甚至趨近于白血病[7]，AIHA為一組溶血性貧血疾病，起因于免疫系統(tǒng)功能異常，從而產(chǎn)生自身抗體和(或)補(bǔ)體，與紅細(xì)胞膜結(jié)合后破壞紅細(xì)胞，引發(fā)此種疾病[8]。主要有頭暈、高熱等表現(xiàn)。自身抗體則是人體重要的免疫性球蛋白[9], 具有免疫作用。AIHA患者體內(nèi)具備自身抗體，分為溫抗體、冷抗體和冷-熱抗體[10]，能夠凝集所有紅細(xì)胞，自身抗體包被在紅細(xì)胞上或游離在血清當(dāng)中[11]。治療AIHA患者一般需要多次輸血。而輸血時(shí)遇到的最大困難即自身抗體對(duì)患者的血型鑒定、抗體篩選及交叉配血的影響[12]。

本研究400例AIHA患者，溫自身抗體有342份(85.50%), 冷自身抗體有23份(5.75%), 混合型自身抗體有35份(8.75%)。其中，有293份自身無(wú)特異性抗體, 57份特異性自身抗體, 50份自生+同種抗體; 交叉配血21份LISS/Coombs卡相合, 22份試管法LISS-IAT相合, 193份直接抗人球蛋白法相合，配血均不合有156份。

研究結(jié)果[13]顯示，采用科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臋z測(cè)技術(shù)對(duì)AIHA患者輸血前的血型鑒定、抗體篩查及交叉配血，在極大程度上能夠避免不良事件的發(fā)生，提高治療成功率。具體對(duì)策如下: ① 血型鑒定：若有一些DAT強(qiáng)陽(yáng)性紅細(xì)胞溫自身抗體在ABO/RhD血型鑒定時(shí)，采用血型定型卡處理用試管法正定型紅細(xì)胞非特異性凝集的問(wèn)題; 采用DTT處理冷自身抗體導(dǎo)致紅細(xì)胞自凝的問(wèn)題; 37℃溫度孵育，血漿在自身紅細(xì)胞吸收之后再做反定型解決反定型時(shí)試劑紅細(xì)胞全凝集的現(xiàn)象[11]。② 抗體篩選及鑒定：溫抗體型、冷抗體型、混合抗體型AIHA患者血漿與篩選細(xì)胞/譜細(xì)胞檢測(cè)是否存在IgM類同種抗體可采用鹽水介質(zhì)試管法; 溫抗體型檢測(cè)自身抗體是否有特異性，冷抗體型檢測(cè)自身抗體37 ℃是否有反應(yīng)性及是否同時(shí)存在同種抗體都可采用LISS/Coombs卡; 溫抗體型對(duì)患者血漿、自身吸收后血漿做抗體鑒定，混合抗體型檢測(cè)是否同時(shí)存在同種抗體都可采用直接IAT法。③ 交叉配血：做主側(cè)交叉配血，對(duì)只有自身抗體且抗體有特異性的用LISS/Coombs卡/試管法LISS-IAT, 對(duì)沒(méi)有自身抗體對(duì)應(yīng)抗原的獻(xiàn)血者和同種+自身抗體的和只有同種抗體且抗體為全凝集素的紅細(xì)胞，用直接抗人球蛋白法。④ 輸血：可輸用洗滌紅細(xì)胞或懸浮紅細(xì)胞使得AIHA患者主側(cè)交叉配血相合; 若配血不相合，醫(yī)生對(duì)情況進(jìn)行鑒定，可篩選出不相合度最低的紅細(xì)胞進(jìn)行輸血[15]。

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2016-12-23

陜西省教育廳科研項(xiàng)目(B2011213)

R 457.1

A

1672-2353(2017)09-199-03

10.7619/jcmp.201709066