楊紅蘭 (監(jiān)利縣人民醫(yī)院眼科，湖北 監(jiān)利 433300)

王勇 (武漢大學人民醫(yī)院眼科，湖北 武漢 430000)

氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)在老年糖尿病視網(wǎng)膜病變中的作用

楊紅蘭
(監(jiān)利縣人民醫(yī)院眼科，湖北 監(jiān)利 433300)

王勇
(武漢大學人民醫(yī)院眼科，湖北 武漢 430000)

目的：探討老年糖尿病視網(wǎng)膜病患者血清中氧化應(yīng)激產(chǎn)物和炎癥標志物水平的變化及其臨床意義。方法：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)測定56例糖尿病視網(wǎng)膜病患者(DR組)，包括31例非增殖性視網(wǎng)膜病變組(NPDR組)和25例增殖性視網(wǎng)膜病變組(PDR組)的血清8-羥基脫氧鳥苷酸(8-HdG)、丙二醛(MDA)和白細胞介素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)，并與29例無并發(fā)癥的2型糖尿病患者(DC組)和23例正常對照組(NC組)比較。結(jié)果：① DR組血清8-HdG和MDA水平均明顯高于DC組和NC組，DC組明顯高于NC組(P均<0.05)，PDR組與NPDR組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。② DR組血清IL-1β和TNF-α水平均明顯高于DC組和NC組(P均<0.05)，PDR組與NPDR組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，DC組與NC組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論：氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)可能在糖尿病視網(wǎng)膜病變中協(xié)同發(fā)揮重要作用，尤其是早期。因此，早期干預氧化應(yīng)激及炎癥反應(yīng)可能有利于控制糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)生和發(fā)展。

糖尿病視網(wǎng)膜病變；炎癥；氧化應(yīng)激；老年

糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR) 是糖尿病的一種微血管并發(fā)癥，可能導致糖尿病患者失明[1]。DR的早期診斷和防治是目前全世界關(guān)注的重要公共衛(wèi)生熱點問題，但DR的發(fā)病機理尚不清楚，因此，早期發(fā)現(xiàn)和及時治療是延緩糖尿病視網(wǎng)膜病變進程和減少致盲的關(guān)鍵[2,3]。研究表明，氧化應(yīng)激(oxidative stress,OS)是高血糖誘導糖尿病并發(fā)癥的重要致病機制，DR發(fā)生與機體高氧化應(yīng)激狀態(tài)及其伴隨的氧化損傷有關(guān)[4,5]，8-羥基脫氧鳥苷酸(8-Hydroxy-Guanine,8-HdG)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)是氧化應(yīng)激重要的生物標志物。炎癥反應(yīng)減少β細胞分泌胰島素，增加胰島素抵抗性，亦是糖尿病并發(fā)癥的重要發(fā)病機理[6]，白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)是誘導微血管病變的重要炎癥因子。本研究擬通過觀察糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清8-HdG、MDA等氧化應(yīng)激產(chǎn)物和IL-1β、TNF-α等炎癥標志物的水平，研究氧化應(yīng)激變化與炎癥反應(yīng)在糖尿病視網(wǎng)膜病變中的作用。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

選取2014年9月至2016年3月我院收治2型糖尿病患者85例，均符合1999年WHO診斷標準，均散瞳后檢查眼底，根據(jù)2014年我國糖尿病視網(wǎng)膜病變臨床診療指南標準判定是否合并DR。其中非增殖型DR(NPDR組)患者31例，其中男18例，女13例，年齡62～76歲，平均年齡(63.4±6.9)歲，增殖型DR(PDR組)患者25例，其中男12例，女13例，年齡65～77歲，平均年齡(66.3±7.2)歲，無合并癥的糖尿病患者(DC組) 29例，其中男12例，女17例，年齡63～78歲，平均年齡(66.0±7.5)歲。選取23名同期健康體檢者作為正常對照組，其中男12例，女11例，年齡63～73歲，平均年齡(65.3±6.8)歲。3組之間年齡和性別構(gòu)成差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。排除標準：年齡<60歲，嚴重心腦血管疾病，急慢性感染，肝腎功能異常，腫瘤，自身免疫性疾病，近1月服用糖皮質(zhì)激素及非甾體抗炎藥史。

1.2 方法

1)標本采集與處理 所有對象均于清晨空腹抽取肘靜脈血5ml，在2～8℃下2000r/min離心10min，分離上清液，置于離心管密封，統(tǒng)一編號置-80 ℃保存，待所有樣品收集完后統(tǒng)一檢測。

2)炎癥標志物、氧化應(yīng)激產(chǎn)物測定方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測測定IL-1β、TNF-α，試劑盒購自深圳晶美生物工程有限公司。采用競爭性抑制酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測8-HdG，MDA 以硫代巴比妥酸反應(yīng)產(chǎn)物比色法檢測，試劑盒由美國Trevigen公司提供。操作過程嚴格按照試劑盒說明進行，并進行相關(guān)實驗室質(zhì)量控制。

1.3 統(tǒng)計學分析

采用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析。血清8-HdG、MDA、IL-1β、TNF-α的組間、組內(nèi)比較用單變量方差分析( ANOVA)和SNK-q檢驗，血清8-HdG、MDA與IL-1β、TNF-α水平間的關(guān)系采用Spearman 相關(guān)性檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清8-HdG、MDA水平的變化

與NC組比較，DC組及 DR組血清8-HdG和MDA水平均明顯升高(P均<0.05)；DR組血清8-HdG及MDA水平均明顯高于DC組和NC組(P均<0.05)；而PDR組與NPDR組比較，血清8-HdG和MDA水平差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表1。

2.2 血清IL-1β、TNF-α水平的變化

DR組血清IL-1β和TNF-α水平均明顯高于DC組和NC組(P均<0.05)；PDR組與NPDR組比較，血清IL-1β和TNF-α水平差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)；DC組與NC組比較，血清IL-1β及TNF-α水平差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表2。

表1 糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清氧化應(yīng)激產(chǎn)物水平比較

表2 糖尿病視網(wǎng)膜病變患者血清炎癥標志物水平比較

3 討論

DR 的具體發(fā)病機制尚不明確，越來越多的證據(jù)表明氧化應(yīng)激不僅是糖尿病發(fā)病的一個重要因素，而且是糖尿病視網(wǎng)膜病變的一個關(guān)鍵的危險因素[4,5]。8-HdG是反映氧化應(yīng)激的生物標志物[7]。MDA是氧自由基與細胞膜不飽和脂肪酸過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物之一，能間接反映氧自由基含量和氧化損傷程度。8-HdG和MDA是目前公認的評價氧化應(yīng)激狀態(tài)的敏感指標。本研究結(jié)果證實，DR組及DC組血清8-HdG和MDA水平與正常對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義，表明糖尿病早期即存在氧化應(yīng)激。Dong等報道增殖性視網(wǎng)膜病變者較無視網(wǎng)膜病變及非增殖性視網(wǎng)膜病變糖尿病患者血8-HdG水平明顯升高[8]。但是，本研究發(fā)現(xiàn)，NPDR以及PDR患者血清中氧化應(yīng)激標志物水平無明顯差別，這也許表明，隨病程及視網(wǎng)膜病變的進展，氧化應(yīng)激并無明顯加重。

隨著分子生物學的發(fā)展，炎癥因子和炎性反應(yīng)在糖尿病發(fā)生發(fā)展過程中的重要作用逐漸被證實[2,6]。研究發(fā)現(xiàn)炎癥因子具有促進DR發(fā)展的作用[9]。IL-1β通過作用于視網(wǎng)膜色素上皮細胞，促進膠原的合成和沉積，參與增殖性視網(wǎng)膜病變的形成[10，11]。TNF-α刺激血管外基質(zhì)和血管細胞的增殖，促進眼內(nèi)新生血管形成和視網(wǎng)膜病變[12],且TNF-α與病情嚴重程度顯著相關(guān)[13,14]。本研究發(fā)現(xiàn)DR患者血清IL-1β和TNF-α較正常組升高，提示IL-1β和TNF-α水平的升高是造成糖尿病視網(wǎng)膜病變的重要因素。值得注意的是，盡管本研究結(jié)果表明在糖尿病視網(wǎng)膜病變的不同時期均有炎癥反應(yīng)，但與NPDR組相比，PDR組血清IL-1β和TNF-α水平并無顯著升高，表明炎癥反應(yīng)并沒有隨著病變的進展而明顯加重，相反，TNF-α水平還呈現(xiàn)出下降趨勢。這與Demircan等[15]的結(jié)果不一致。具體原因不清楚，可能與本研究樣本例數(shù)較少及研究對象均為老年人有關(guān)。動物實驗證實抑制炎癥反應(yīng)可以阻止早期階段的視網(wǎng)膜病變進一步進展，而且持續(xù)的抗炎治療已經(jīng)成為最新的治療選擇[16]。

總之，本研究證實，糖尿病視網(wǎng)膜病變患者同時存在炎癥反應(yīng)與血管生成，只是不同的病程時期，二者各有側(cè)重。因此，早期同時應(yīng)用抗氧化應(yīng)激、抗炎癥治療，可能延緩和治療糖尿病視網(wǎng)膜病變的療效更好。

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[編輯] 劉陽

2016-12-06

楊紅蘭(1976-)，女，主治醫(yī)師，主要從事老年眼底病臨床研究，761356420@qq.com。

R771

A

1673-1409(2017)04-0048-03

[引著格式]楊紅蘭，王勇.氧化應(yīng)激與炎癥反應(yīng)在老年糖尿病視網(wǎng)膜病變中的作用[J].長江大學學報(自科版)，2017，14(4)48～50.