鄭 艷 陳 嵐 余 倩

(貴州省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，貴州 貴陽 550002)

癲癇患者血清白細(xì)胞介素-1β及腫瘤壞死因子-α表達(dá)及其與腦電圖的關(guān)系

鄭 艷 陳 嵐 余 倩

(貴州省人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，貴州 貴陽 550002)

目的 探討白細(xì)胞介素(IL)-1β、腫瘤壞死因子(TNF)-α在癲癇患者血清中的表達(dá)水平及其與腦電圖的關(guān)系。方法 61例癲癇患者(癲癇組)、80例急性腦梗死患者(腦梗阻)以及50例健康體檢者(對(duì)照組)為研究對(duì)象，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定三組血清IL-1β及TNF-α水平，并分析其與腦電圖檢查結(jié)果的相關(guān)性。結(jié)果 癲癇組、腦梗阻患者發(fā)作后1 h的血清IL-1β、TNF-α水平高于對(duì)照組，癲癇組高于腦梗阻(P<0.05)；癲癇組、腦梗阻發(fā)作后24 h的血清IL-1β、TNF-α水平低于發(fā)作后1 h(P<0.05)。發(fā)作后1、24 h腦電圖檢查異常癲癇患者的血清IL-1β、TNF-α水平均高于腦電圖檢查正常的癲癇患者，且隨著腦電圖檢查異常的逐漸嚴(yán)重，血清IL-1β、TNF-α水平越高(P<0.05)。經(jīng)Pearson秩相關(guān)分析，腦電圖檢查結(jié)果與血清IL-1β、TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.672、0.738，P<0.05)，癲癇發(fā)作1、24 h后，血清IL-1β與TNF-α均呈正相關(guān)(r=0.785、0.816，P<0.05)。結(jié)論 血清IL-1β及TNF-α在癲癇患者體內(nèi)呈高表達(dá)，并且與腦電圖檢查結(jié)果異常呈正相關(guān)，IL-1β及TNF-α可作為腦電圖檢查的輔助診斷指標(biāo)。

白細(xì)胞介素-1β；腫瘤壞死因子-α；癲癇；腦電圖

癲癇是由腦神經(jīng)元突然發(fā)生間歇性癲樣放電所致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)綜合征，以神經(jīng)元的反復(fù)、過度同步異常放電為主要特征，臨床癥狀呈反復(fù)性和短暫性發(fā)作性〔1，2〕。腦電圖是目前臨床診斷癲癇最重要、最有價(jià)值的輔助方式，但主要通過儀器檢測(cè)并人為去判讀結(jié)果，可能存在漏診和誤診〔3〕。因此，尋找有效的血清學(xué)指標(biāo)輔助腦電圖輔助診斷癲癇有重要的意義。有學(xué)者提出神經(jīng)免疫系統(tǒng)功能紊亂與癲癇的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，其中白細(xì)胞介素(IL)-1β、腫瘤壞死因子(TNF)-α是由免疫細(xì)胞或非免疫細(xì)胞分泌的具有重要生物活性的細(xì)胞因子。研究顯示，IL-1β、TNF-α參與了機(jī)體的炎癥反應(yīng)、細(xì)胞調(diào)節(jié)以及免疫應(yīng)答過程〔4，5〕。旨在探討血清中IL-1β、TNF-α在癲癇發(fā)病過程中的作用及其與腦電圖檢查結(jié)果的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2013年8月至2016年8月我院收治的61例癲癇患者作為癲癇組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①結(jié)合病史、腦電圖、CT及磁共振成像(MRI)等輔助檢查證實(shí)為原發(fā)性癲癇者；②不合并感染、免疫性疾病等可能影響本研究結(jié)果的疾病；③近3個(gè)月內(nèi)未接受過免疫抑制劑、激素類等藥物治療者；④不合并有其他腦組織病變者；⑤不合并藥物依賴史及酒精成癮史者；⑥不合并其他嚴(yán)重的臟器功能障礙者。其中男39例，女22例；年齡53～79歲，平均(68.3±5.5)歲；病程1.6～22年，平均(11.3±3.9)年；單純部分性發(fā)作31例，復(fù)雜部分性發(fā)作18例，部分繼發(fā)全面性發(fā)作12例。于同一時(shí)期隨機(jī)選取80例急性腦梗死患者為腦梗阻，納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)顱腦CT、MRI檢查確診為急性腦梗死者；②排除腦腫瘤、腦出血等可能影響本研究結(jié)果的疾??；③未接受其他可能影響本研究結(jié)果的藥物治療者。其中男49例，女31例；年齡52～77歲，平均(65.3±7.1)歲。同時(shí)期隨機(jī)抽取50例健康體檢者作為對(duì)照組，其中男31例，女19例；年齡49～76歲，平均(67.2±6.5)歲。三組性別、年齡等基線資料具有可比性(P>0.05)。

1.2 方法

1.2.1 血清IL-1β、TNF-α檢測(cè) 癲癇組和腦梗阻分別于發(fā)病后1、24 h清晨空腹抽取肘靜脈血3 ml，對(duì)照組體檢時(shí)于清晨收集肘靜脈血3 ml，2 000 r/min離心10 min，將收集得到的血清置于-80℃環(huán)境下保留，留待檢測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定血清IL-1β、TNF-α水平，試劑盒由北京中杉金橋技術(shù)有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒上的說明進(jìn)行相關(guān)操作。

1.2.2 腦電圖檢查 采用16導(dǎo)數(shù)字化無紙記錄腦電圖儀對(duì)三組研究對(duì)象進(jìn)行檢查，依據(jù)國(guó)際10/20系統(tǒng)安置頭皮電極，并采用常規(guī)單極和雙極導(dǎo)聯(lián)進(jìn)行描記，研究對(duì)象在檢查期間作出睜眼、閉眼等反應(yīng)，同時(shí)進(jìn)行閃光刺激以及過度呼吸誘發(fā)試驗(yàn)，每位研究對(duì)象被描記的時(shí)間均超過20 min。異常的腦電圖評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)〔6〕：①輕度異常：α節(jié)律呈不規(guī)則或者不穩(wěn)定，無明顯甚至消失睜眼或者抑制反應(yīng)，出現(xiàn)高波幅β波，同時(shí)Q波在各區(qū)的活動(dòng)增加，也可以某個(gè)區(qū)為主要活動(dòng)區(qū)，在過度喚起的時(shí)段出現(xiàn)高幅的Q波；②中度異常：α節(jié)律呈明顯的不對(duì)稱，在某些地方甚至可能消失，Q波活動(dòng)呈彌散性，可出現(xiàn)Q波的活動(dòng)呈陣發(fā)性發(fā)作，在過度換氣后高波幅δ波成群出現(xiàn)；③重度異常：Q波和δ波的活動(dòng)呈彌散性發(fā)作，α波變慢甚至消失，δ波陣發(fā)性出現(xiàn)并且自發(fā)或者誘發(fā)高波幅棘波、棘慢綜合波、尖波，偶爾會(huì)有爆發(fā)性活動(dòng)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS21.0軟件進(jìn)行方差分析、t檢驗(yàn)、Pearson秩相關(guān)分析和Pearson積矩相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 各組血清IL-1β、TNF-α水平比較 癲癇組、腦梗組發(fā)作后1 h的血清IL-1β、TNF-α水平高于對(duì)照組(F=12.031、10.895，P<0.05)，且癲癇組高于腦梗阻(P<0.05)；癲癇組、腦梗阻發(fā)作后24 h的血清IL-1β、TNF-α水平低于發(fā)作后1 h(P<0.05)。見表1。

表1 各組血清IL-1β、TNF-α水平比較

與對(duì)照組比較：1)P<0.05；與腦梗阻比較：2)P<0.05；與發(fā)作后1 h時(shí)比較：3)P<0.05

2.2 不同腦電圖檢查異常癲癇患者血清IL-1β、TNF-α水平比較 發(fā)作后1、24 h，腦電圖檢查異常癲癇患者血清IL-1β、TNF-α水平均高于腦電圖檢查正常的癲癇患者，并且隨著腦電圖檢查異常的逐漸嚴(yán)重，血清IL-1β、TNF-α水平越高(P<0.05)，見表2。經(jīng)Pearson秩相關(guān)分析，腦電圖檢查結(jié)果與血清IL-1β、TNF-α水平呈正相關(guān)(r=0.672、0.738，P<0.05)。

表2 不同腦電圖檢查異常癲癇患者血清IL-1β、 TNF-α水平比較

與正常患者比較:1)P<0.05;與輕度異?；颊弑容^:2)P<0.05;與中度異常患者比較:3)P<0.05

2.3 血清IL-1β、TNF-α的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson積矩相關(guān)分析，癲癇發(fā)作1、24 h后，血清IL-1β與TNF-α呈正相關(guān)(r=0.785、0.816，P<0.05)。

3 討 論

全世界人口癲癇的發(fā)病率約為1%～2%〔7〕。腦電圖檢查是目前臨床診斷癲癇最主要的手段。但是關(guān)于癲癇發(fā)病的機(jī)制，目前人們研究較多的是免疫-神經(jīng)-內(nèi)分泌網(wǎng)絡(luò)學(xué)說，相關(guān)文獻(xiàn)通過體內(nèi)外癲癇模型以及臨床研究均證實(shí)免疫異常參與了癲癇的發(fā)病過程〔8，9〕。研究者發(fā)現(xiàn)，炎癥性細(xì)胞因子在癲癇的免疫學(xué)機(jī)制中發(fā)揮了不可替代的作用〔10〕。IL-1β在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)是由神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞所分泌的具有多種生物學(xué)效應(yīng)的炎癥細(xì)胞因子，研究認(rèn)為IL-1β參與癲癇發(fā)作的機(jī)制主要包括：①IL-1β可以增強(qiáng)谷氨酰胺神經(jīng)元的功能，進(jìn)而促進(jìn)癲癇的發(fā)作以及維持癲癇發(fā)作的時(shí)間，IL-1β水平的上升能夠促進(jìn)包括腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)生長(zhǎng)因子等親神經(jīng)性因子的表達(dá)，而上述這些因子在癲癇的發(fā)生過程中有重要作用；②驚厥發(fā)作后星形細(xì)胞以及小膠質(zhì)細(xì)胞可以促進(jìn)IL-1β mRNA的表達(dá)升高，使IL-1β水平升高，進(jìn)而誘導(dǎo)炎癥性反應(yīng)的發(fā)生以及細(xì)胞水腫，同時(shí)IL-1β水平的升高也可以誘導(dǎo)其自身的合成，正性反饋的環(huán)路使IL-1β水平再次升高，作用進(jìn)一步增強(qiáng)，IL-1β通過使某些激酶得到激活而形成對(duì)海馬神經(jīng)元的谷氨酰胺受體的抑制作用，進(jìn)而興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)而參與癲癇的發(fā)生過程〔11，12〕。研究顯示，TNF-α可以誘導(dǎo)IL-8的表達(dá)并使其分泌量明顯升高，使得在累及的組織內(nèi)免疫細(xì)胞浸潤(rùn)、聚集并釋放多種具有生物活性的物質(zhì)，并最終造成局部組織的炎癥性反應(yīng)〔13〕。TNF-α參與癲癇的病理生理過程可能涉及以下機(jī)制：① TNF-α可以興奮海馬CA3錐體細(xì)胞，并使抑制性突觸后電位所致的異常癲癇樣放電減弱；②TNF-α通過使膠質(zhì)細(xì)胞中的谷氨酰胺合成酶活性受到抑制，進(jìn)而使谷氨酸的活性增強(qiáng)而參與癲癇發(fā)生；③TNF-α刺激膠質(zhì)細(xì)胞的增生并促使其產(chǎn)生其他與癲癇發(fā)生過程密切相關(guān)的細(xì)胞因子〔14，15〕。

有研究認(rèn)為IL-1β、TNF-α參與了癲癇的發(fā)生過程，也有研究通過meta分析發(fā)現(xiàn)IL-1β與癲癇發(fā)生無明顯關(guān)系〔16〕。本研究結(jié)果提示IL-1β、TNF-α可能參與了癲癇的發(fā)生過程，與有關(guān)研究結(jié)果一致〔17，18〕。本研究說明隨著時(shí)間的推移，血清IL-1β、TNF-α水平有逐漸下降的趨勢(shì)，可能是因?yàn)榘d癇、急性腦梗死患者發(fā)病初期病情最猛，隨著時(shí)間的推移，病情有略微變緩的趨勢(shì)。

本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，IL-1β、TNF-α與腦電圖檢查結(jié)果有密切的關(guān)系。另外IL-1β、TNF-α可能通過影響神經(jīng)元細(xì)胞的興奮性來參與癲癇的發(fā)生發(fā)展過程，血清IL-1β、TNF-α水平越高，癲癇患者的腦電圖檢查異常越嚴(yán)重。而且IL-1β、TNF-α聯(lián)合檢測(cè)可作為腦電圖檢查的重要輔助指標(biāo)。

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〔2016-09-01修回〕

(編輯 郭 菁/滕欣航)

陳 嵐(1969-)，女，主任醫(yī)師，主要從事腦血管病研究。

鄭 艷(1980-)，女，碩士，主治醫(yī)師，主要從事癲癇研究。

R445

A

1005-9202(2017)05-1217-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.084