王彩霞 劉崇梅 陽 娟 毛 敏 黃柳炎 毛 霞 陳 萍

(岳陽市一人民醫(yī)院，湖南 岳陽 414000)

細胞DNA倍體分析及CYFRA21-1、CEA、CA125水平檢測在老年良惡性胸腔積液診斷中的價值

王彩霞 劉崇梅1陽 娟1毛 敏1黃柳炎1毛 霞2陳 萍2

(岳陽市一人民醫(yī)院，湖南 岳陽 414000)

目的 探討胸腔積液中細胞DNA倍體分析與聯(lián)合檢測CYFRA21-1、CEA、CA125在其良惡性鑒別診斷方面的應用價值。方法 選取80例惡性及70例良性胸腔積液患者，平均年齡(64±3)歲，分別行CYFRA21-1、CEA、CA125檢測及細胞DNA倍體分析。結果 惡性胸腔積液組CYFRA21-1、CEA、CA125的含量明顯高于良性胸腔積液組(P<0.05)；細胞DNA倍體分析法聯(lián)合CYFRA21-1、CEA、CA125檢測的靈敏性及特異性均高于CYFRA21-1、CEA、CA125的測定(P<0.05)。結論 在胸腔積液良惡性的鑒別診斷方面，細胞DNA倍體分析聯(lián)合CYFRA21-1、CEA、CA125檢測法具有更好的診斷價值。

胸腔積液；細胞DNA倍體分析；CYFRA21-1；CEA；CA125

胸腔積液是臨床常見的癥狀，單憑某一種診斷方法很難對其明確診斷。傳統(tǒng)的診斷胸腔積液良惡性的方法是腫瘤標志物的測定或常規(guī)細胞學涂片，無論采取哪種方法，都不能對其及時做出明確診斷，而及時診斷胸腔積液的良惡性對臨床治療是至關重要的。本課題擬測定胸腔積液中腫瘤標志物細胞角蛋白19(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)及糖類抗原(CA)125的含量，同時對其細胞沉渣進行DNA倍體分析，比較其在診斷良惡性胸腔積液的價值。

1 資料與方法

1.1 一般材料 我院2013年9月至2014年8月胸腔積液患者150例，男79例，女71例，平均年齡(64±3)歲。良性胸腔積液70例，惡性胸腔積液80例，惡性胸腔積液患者均經(jīng)病理活檢或手術明確診斷為肺癌患者，良性胸腔積液為腎衰竭、結核等病人。

1.2 方法 取胸腔積液50 ml，3 000 r/min離心20 min，取上清液聯(lián)合檢測其中CYFRA21-1、CEA及CA125的含量，取細胞沉渣制片，對其進行細胞DNA倍體分析。

1.2.1 胸腔積液CYFRA21-1、CEA、CA125的測定 采用化學發(fā)光分析儀及配套試劑盒(均由美國雅培制藥有限公司提供)，嚴格按照儀器及試劑盒的說明書嚴格操作。

1.2.2 胸腔積液細胞沉渣細胞DNA倍體分析 采用麥克奧迪醫(yī)療診斷系統(tǒng)有限公司提供的試劑盒，嚴格按照說明書操作對細胞沉渣進行特殊染色，并用該公司提供的Motictometer全自動細胞圖像分析系統(tǒng)對所有Feulgen染色片進行掃描處理。標本染色質量控制采用標準片作對照。

1.2.3 結果判讀 腫瘤標志物CEA≥10 ng/ml，CA125≥35 U/ml，CYFRA21-1≥3.39 ng/ml視為陽性。細胞DNA倍體分析判定標準〔1〕：采用細胞DNA指數(shù)(即DI值)判定，在直方圖中，DI值有 3 個或更多的異倍體細胞(DI值>2.5)出現(xiàn)為陽性；無DI值>2.5的異倍體細胞出現(xiàn)為陰性。

1.2.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗。

2 結 果

2.1 80例惡性胸腔積液及70例良性胸腔積液中CYFRA21-1、CEA、CA125的含量測定結果及細胞DNA倍體分析 惡性胸腔積液中三種腫瘤標志物的含量明顯高于良性胸腔積液(P<0.05)。惡性胸腔積液細胞DNA倍體分析陽性率高于良性胸腔積液(P<0.05)。見表1。

表1 兩組標本細胞DNA倍體分析及CYFRA21-1、CEA、 CA125的含量比較

與良性胸腔積液比較：1)P<0.05

2.2 單用及聯(lián)用細胞DNA倍體分析法、CYFRA21-1、CEA、CA125的含量鑒定惡性胸腔積液 細胞DNA倍體分析法分別聯(lián)合CYFRA21-1、CEA、CA125含量測定法的靈敏性及特異性明顯高于單純CYFRA21-1、CEA、CA125的含量測定法(P<0.05)，細胞DNA倍體分析法聯(lián)合CYFRA21-1、CEA、CA125含量測定法能提高惡性胸腔積液的靈敏性及特異性，尤其是特異性，可以高達100%。見表2。

表2 單用及聯(lián)用細胞DNA倍體分析和腫瘤標志物檢測對 惡性胸腔積液診斷的靈敏性及特異性〔n(%)〕

1)與單用CYFRA21-1比較；2)與單用CEA比較；3)與單用CA125比較；4)與其他方法比較：P<0.05

3 討 論

在中國，惡性疾病累及胸膜導致胸腔積液是繼肺結核之后的第二大主要原因，明確惡性胸腔積液的原因對治療惡性胸腔積液是至關重要的，影響惡性胸腔積液患者生存率的最重要的因素是腫瘤的來源〔2〕。胸腔積液在臨床是常見的癥狀，它的出現(xiàn)不僅僅是由惡性腫瘤引起，有些良性疾病，比如腎衰竭、心衰竭，肺結核、胸膜炎等也可以導致胸腔積液。在老年人，主要表現(xiàn)為肺部惡性腫瘤或結核性胸膜炎，及時對胸腔積液做出良惡性的診斷，就可以為臨床提供治療指導。CYFRA21-1是上皮細胞支架蛋白，主要分布在上皮細胞，尤其是單層上皮細胞，在該類上皮來源的惡性腫瘤組織中的含量明顯升高〔3〕。CEA升高常見于大腸癌、胰腺癌、胃癌、乳腺癌、甲狀腺髓樣癌等。但吸煙、妊娠期和心血管疾病、糖尿病、非特異性結腸炎等疾病，15%～53%的病人血清CEA也會升高。CA125最常見于上皮性卵巢腫瘤患者的血清中，其診斷的敏感性較高，但特異性較差。腫瘤標志物多種多樣，單一的腫瘤標志物更是沒有很好的靈敏性及特異性，臨床應用價值有限〔4〕。所以多數(shù)學者主張多種腫瘤標志物聯(lián)合使用，以提高診斷價值〔4～8〕。有學者測定了惡性血清及胸腔積液中CEA的含量明顯高于良性組〔3〕，在本課題中，惡性胸腔積液中CYFRA21-1、CEA、CA125的含量明顯高于良性胸腔積液，與上述報道一致。細胞DNA倍體分析是近幾年迅速發(fā)展起來的一種新型技術，在細胞學良惡性診斷方面有著不可替代的優(yōu)越性，它從DNA水平對細胞進行分析，以直方圖和點陣分布圖的形式描繪出細胞中非整倍體細胞的個數(shù)。但是也有其不足之處，比如掃描結果直接受制片質量的影響，易將玻片上的污點或重疊的細胞核誤認為是異型細胞核，所以當出現(xiàn)該情況時，技術員應該重新制片，在顯微鏡下辨別可疑細胞核。在用該方法檢測80例惡性胸腔積液時，出現(xiàn)了61例陽性，19例陰性，19例陰性標本中有17例標本的細胞DNA掃描時發(fā)現(xiàn)1-2個細胞DNA異倍體，說明這17例標本中存在異型細胞，只是沒有達到該測量方法的陽性判讀標準，隨著病情的繼續(xù)發(fā)展，或許不久就會成為陽性標本。另外2例標本為陰性，分析原因估計是病人出現(xiàn)了癌栓堵塞淋巴管導致胸腔積液，而積液中的細胞未出現(xiàn)異型。70例良性胸腔積液中有1例出現(xiàn)了陽性，查閱其臨床資料，該患者為肺結核患者，可能是該患者的結核桿菌感染導致了間皮細胞的增生活躍，在細胞DNA掃描時誤將增生的間皮細胞判讀為異型癌細胞。

由此可見，單純地依靠腫瘤標志物的測定，很難對胸腔積液進行精確診斷。某一種或兩種標志物升高時不能武斷的診斷為惡性胸腔積液，其濃度沒有出現(xiàn)升高也不能武斷的診斷為良性胸腔積液。將多種腫瘤標志物聯(lián)合起來檢測，能提高胸腔積液診斷的靈敏性及特異性。細胞DNA倍體分析法也會有個別病例誤診或漏診，將細胞DNA倍體分析與多種腫瘤標記物聯(lián)合檢測，能最大程度上減少胸腔積液的誤診率及漏診率。

綜上，腫瘤標志物聯(lián)合細胞DNA倍體分析法檢測胸腔積液，能最大程度上提高癌性胸腔積液診斷靈敏性及特異性。

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〔2015-12-29修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

湖南省科技廳科技資助項目(2014SK3144)

劉崇梅(1972-)，男，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤病理學研究。

王彩霞(1980-)，女，主治醫(yī)師，碩士，主要從事病理診斷技術研究。

R734.2

A

1005-9202(2017)05-1158-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.05.054

1 岳陽市二人民醫(yī)院 2 岳陽職業(yè)技術學院