毛 東 于江文 陸 航

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外科，遼寧 錦州 121001)

結(jié)腸高分化腺癌中肝細(xì)胞生長因子和間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子表達(dá)與增殖指數(shù)的關(guān)系

毛 東 于江文 陸 航

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院普外科，遼寧 錦州 121001)

目的 探討結(jié)腸高分化腺癌中肝細(xì)胞生長因子(HGF)和間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子(C-met)的表達(dá)及其與腫瘤細(xì)胞增殖指數(shù)的關(guān)系。方法 78例結(jié)腸高分化腺癌組織作為觀察組，結(jié)腸非腫瘤性黏膜組織21例作為對照組，應(yīng)用免疫組化方法檢測兩組HGF、C-met和Ki67的表達(dá)。結(jié)果 觀察組HGF、C-met和Ki67表達(dá)的陽性率明顯高于對照組，且三者表達(dá)均與腫瘤的最大徑、浸潤深度密切相關(guān)，HGF和C-met的表達(dá)均與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。相關(guān)分析顯示HGF、C-met和Ki67之間均呈正相關(guān)。結(jié)論 結(jié)腸高分化腺癌中HGF/C-met高表達(dá)與腫瘤生長及浸潤有關(guān)，二者可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖作用。

結(jié)腸；高分化腺癌；肝細(xì)胞生長因子(HGF)；間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子(C-met)；Ki67

遺傳易感因素、基因和蛋白的表達(dá)失調(diào)是結(jié)腸癌病變的重要促進(jìn)因素〔1，2〕，結(jié)腸腺癌中高分化腺癌多見，其與低分化腺癌相比，細(xì)胞異型性小，腺管結(jié)構(gòu)存在，預(yù)后相對好。結(jié)腸高分化腺癌是高增殖性腫瘤，腫瘤增生活躍。間質(zhì)表皮轉(zhuǎn)化因子(C-met)是一種具有酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白，是肝細(xì)胞生長因子(HGF)的特異性受體，二者可能具有協(xié)同作用，能在多個通路的角度調(diào)節(jié)腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展〔3，4〕。本文對結(jié)腸高分化腺癌患者術(shù)后腫瘤組織中HGF、C-met和Ki67蛋白的表達(dá)進(jìn)行檢測，探討其臨床意義及相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 一般資料 2013年1月至2015年6月我院結(jié)腸高分化腺癌的患者78例作為觀察組，留取術(shù)后石蠟包埋的組織，其中男41例，女37例，年齡40～84歲，平均57.3歲。均經(jīng)病理醫(yī)師確診，并符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。選擇上述患者術(shù)后標(biāo)本中距腫物邊緣>3 cm的非腫瘤性結(jié)腸黏膜組織21例作為對照組，其中男11例，女10例，年齡42～80歲，平均57.6歲。兩組性別、年齡無明顯差異。

1.2 HGF、C-met和Ki67的檢測方法 兩組術(shù)后標(biāo)本中HGF、C-met和Ki67的檢測均基于石蠟包埋的組織。三種蛋白的檢測均應(yīng)用免疫組化SP法，二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色，嚴(yán)格按說明書手工進(jìn)行操作，減少誤差。

1.3 HGF、C-met和Ki67的判斷標(biāo)準(zhǔn) HGF、C-met的表達(dá)部位是細(xì)胞質(zhì)和(或)細(xì)胞膜，Ki67的表達(dá)部位是細(xì)胞核，以出現(xiàn)淡黃色-棕褐色顆粒為陽性。選擇上皮細(xì)胞集中且染色較為明顯的區(qū)域進(jìn)行觀察，共選擇5個400倍視野的熱點區(qū)進(jìn)行觀察，計算陽性率，取平均值。HGF、C-met以<10%為陰性，≥10%陽性。Ki67以<25%為陰性，≥25%陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行χ2檢驗和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組HGF、C-met和Ki67陽性率的比較 兩組HGF、C-met和Ki67的陽性率有統(tǒng)計學(xué)差異。見表1。

表1 二組中HGF、C-met和Ki67陽性率的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組HGF、C-met和Ki67在不同臨床特征中的比較 觀察組中HGF、C-met和Ki67的表達(dá)均與腫瘤的最大徑、浸潤深度密切相關(guān)，HGF和C-met的表達(dá)均與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。見表2。

表2 觀察組HGF、C-met和Ki67在不同臨床 特征中比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中HGF、C-met和Ki67的相關(guān)性 HGF和C-met(r=0.54，P=0.012 3)、HGF和Ki67(r=0.49，P=0.034 1)、C-met和Ki67(r=0.51，P=0.026 1)表達(dá)具有正相關(guān)性。

3 討 論

結(jié)腸腺癌中最常見的是高分化腺癌，雖然分化好作為腫瘤預(yù)后好的標(biāo)志，但是臨床中并不全是這樣，腫瘤的其他生物學(xué)行為如侵襲、轉(zhuǎn)移等因素可能對判斷臨床狀態(tài)更有價值〔5，6〕。在病變進(jìn)展中，蛋白表達(dá)可以出現(xiàn)明顯異常。Ki67的表達(dá)可以標(biāo)記腫瘤的增殖狀態(tài)，即Ki67高表達(dá)的腫瘤增殖活性高，細(xì)胞生長快。HGF位于人類第7號染色體長臂(7q21.1)，大小約70 kb，包括18個外顯子和17個內(nèi)含子，其前體部分是由728個氨基酸殘基組成的單鏈，HGF的活性形式主要是與蛋白酶的水解有關(guān)〔7，8〕。C-met屬于受體酪氨酸激酶超家族的成員，為原癌基因MET編碼的一類具有自主磷酸化活性的跨膜受體，其編碼基因位于7號染色體q31區(qū)，大小約110 kb，包括21個外顯子。目前C-met是HGF的特異性受體，因此二者可能有一定的協(xié)同作用〔9，10〕。在正常生理條件下，HGF和C-met形成有效的結(jié)合后，可以使上皮細(xì)胞間的連接松散，尤其是腫瘤細(xì)胞的黏附性下降，而易于離開原發(fā)灶，此時細(xì)胞的運動性增強，細(xì)胞易于遷移，轉(zhuǎn)移潛能升高〔11，12〕。張瑞濤等〔13〕觀察HGF、C-met在卵巢上皮性癌中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)二者在腫瘤中高表達(dá)，認(rèn)為HGF、C-met高表達(dá)可能協(xié)同參與卵巢上皮性癌的惡性進(jìn)展。劉崇梅等〔14〕通過在鼻咽癌中觀察HGF、C-met的表達(dá)與細(xì)胞增殖的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)HGF、C-met與增殖細(xì)胞核抗原的表達(dá)呈正相關(guān)，認(rèn)為HGF、C-met可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖。

本實驗結(jié)果提示HGF、C-met和Ki67在腫瘤形成過程中有重要促進(jìn)作用。HGF和C-met可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，使腫瘤細(xì)胞體積增大，腫瘤生長活躍，腫瘤細(xì)胞增生明顯，腫瘤侵襲性增強〔15，16〕。本文結(jié)果提示HGF、C-met高表達(dá)是腫瘤進(jìn)展的重要促進(jìn)因素。HGF、C-met與轉(zhuǎn)移的關(guān)系提示二者高表達(dá)時腫瘤處于高轉(zhuǎn)移狀態(tài)，此時在臨床及病理診斷中對淋巴結(jié)及遠(yuǎn)隔器官進(jìn)行檢查是必要的。也有研究認(rèn)為二者促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移的作用是通過調(diào)節(jié)其他轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白實現(xiàn)的〔12〕。研究顯示HGF/C-met信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路可以下調(diào)E-cadherin蛋白的表達(dá)，對腫瘤的黏附作用進(jìn)行調(diào)控〔17〕。HGF/C-met可以激活蛋白激酶結(jié)構(gòu)域中酪氨酸激酶(PTK)，使絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化，使尿激酶纖溶酶原表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)細(xì)胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶，使細(xì)胞外基質(zhì)降解，對腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用〔18〕。也有研究認(rèn)為二者可以促進(jìn)間質(zhì)的血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，使間質(zhì)的血供豐富，為腫瘤組織生長提供必要的營養(yǎng)〔19〕。

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〔2015-06-07修回〕

(編輯 杜 娟)

陸 航(1975-)，男，博士，副主任醫(yī)師，主要從事普外科疾病研究。

毛 東(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事普外科疾病研究。

R737

A

1005-9202(2017)04-0918-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.04.060