趙訓(xùn)智

（石首市第三人民醫(yī)院，湖北 石首 434400）

用UGT1A1基因檢測(cè)對(duì)1例Gilbert綜合征患者的病情進(jìn)行診斷的價(jià)值分析

趙訓(xùn)智

（石首市第三人民醫(yī)院，湖北 石首 434400）

Gilbert綜合征又叫體質(zhì)性肝功能不良性黃疸，是一種常見的遺傳性非結(jié)合高膽紅素血癥。該病患者的臨床表現(xiàn)主要是出現(xiàn)長期間歇性的輕、中度黃疸，部分患者還可出現(xiàn)乏力、消化不良、肝區(qū)不適等臨床表現(xiàn)。在本研究中，筆者主要探討用UGT1A1基因檢測(cè)對(duì)1例Gilbert綜合征患者的病情進(jìn)行診斷的臨床價(jià)值。

UGT1A1基因檢測(cè)；Gilbert綜合征；血清膽紅素

Gilbert綜合征是一種先天性的血清膽紅素增高癥。該病患者的病理改變主要是血清總膽紅素（主要為非結(jié)合膽紅素）的水平出現(xiàn)輕、中度的上升。該病具有一定的遺傳性。目前，臨床上認(rèn)為，Gilbert綜合征的發(fā)病機(jī)制主要是肝細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的膽紅素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶（UGT）的活性下降，致使非結(jié)合膽紅素葡萄糖醛酸化的過程出現(xiàn)障礙，導(dǎo)致非結(jié)合膽紅素的水平異常升高，進(jìn)而使患者出現(xiàn)黃疸等臨床表現(xiàn)[1]。Gilbert綜合征患者的臨床表現(xiàn)無特異性，因此其病情容易被漏診或誤診。近年來，臨床上用UGT1A1基因檢測(cè)診斷Gilbert綜合征顯現(xiàn)出良好的效果。本文就用UGT1A1基因檢測(cè)對(duì)1例Gilbert綜合征患者的病情進(jìn)行診斷的價(jià)值進(jìn)行分析。

1 病歷資料

鄧某，女，22歲，家住在山區(qū)，職業(yè)為文員。該患者因“發(fā)現(xiàn)肝功能異常1月余”入院，入院時(shí)無特殊不適。既往其身體健康，無飲酒史。對(duì)該患者進(jìn)行查體的結(jié)果顯示：其雙側(cè)鞏膜出現(xiàn)輕度黃染，未見肝掌及蜘蛛痣，其肝區(qū)無叩擊痛，其肝脾肋下未觸及。該患者在當(dāng)?shù)乜h醫(yī)院進(jìn)行肝功能檢查的結(jié)果顯示，其總膽紅素的水平為56.3 μmol/L，非結(jié)合膽紅素的水平為48.0 μmol/L，其余的肝功能指標(biāo)皆正常。入院后，對(duì)該患者進(jìn)行甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎抗體檢查及Coombs試驗(yàn)、PNH試驗(yàn)、HCV-RNA、非嗜肝病毒全套、肝病相關(guān)抗體、血清鐵加總鐵結(jié)合力、銅藍(lán)蛋白、α1-抗胰蛋白酶抗體、溶貧全套等檢查均未見異常。入院后對(duì)其進(jìn)行肝功能檢查的結(jié)果顯示，其總膽紅素的水平為60.3 μmol/L，非結(jié)合膽紅素的水平為47.2 μmol/L，其余的肝功能指標(biāo)皆正常。對(duì)其進(jìn)行肝臟影像學(xué)檢查未見異常。對(duì)該患者進(jìn)行UGT1A1﹡6（G211A）、UGT1A1﹡28（[TA]n）基因檢測(cè)的結(jié)果顯示，其UGT1A1﹡28突變雜合子。對(duì)該患者進(jìn)行2 d的饑餓試驗(yàn)（每天讓其攝入的總能量約為1400 KJ）。在進(jìn)行饑餓試驗(yàn)的第1 d，對(duì)其進(jìn)行肝功能檢查的結(jié)果顯示，其膽紅素的水平為72.6 μmol/L，非結(jié)合膽紅素的水平為62.9 μmol/L，其余的肝功能指標(biāo)皆正常。在進(jìn)行饑餓試驗(yàn)的第2 d，對(duì)其進(jìn)行肝功能檢查的結(jié)果顯示，其總膽紅素的水平為84.6 μmol/L，非結(jié)合膽紅素的水平為68.0 μmol/L，其余的肝功能指標(biāo)皆正常。第3 d讓該患者正常進(jìn)食，囑其勿食用油膩的食物，注意休息，然后對(duì)其進(jìn)行肝功能檢查。檢查的結(jié)果顯示，其總膽紅素的水平為58.6 μmol/L，非結(jié)合膽紅素的水平為41.7 μmol/L，其余的肝功能指標(biāo)皆正常。綜合基因檢測(cè)、生化檢查及饑餓試驗(yàn)的結(jié)果，診斷該患者患有Gilbert綜合征。

2 進(jìn)行UGT1 A1 基因檢測(cè)的方法

抽取該患者清晨空腹的外周靜脈血，用Sanger雙脫氧鏈終止法對(duì)其進(jìn)行UGT1A1基因檢測(cè)。以其外周血的DNA為模板，進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)試驗(yàn)。將純化的PCR產(chǎn)物直接進(jìn)行測(cè)序反應(yīng)，反應(yīng)的體積為10 μL，反應(yīng)的溫度為96℃，反應(yīng)的時(shí)間為2 min。將進(jìn)行測(cè)序反應(yīng)所得到的產(chǎn)物用異丙醇進(jìn)行沉淀，然后用ABIprism3100測(cè)序儀（AppliedBiosystems）進(jìn)行UGT1A1基因檢測(cè)。

3 討論

Gilbert綜合征是一種常見的遺傳性非結(jié)合高膽紅素血癥。該病屬于一種常染色體隱性遺傳疾病。該病的發(fā)生與膽紅素尿苷二磷酸葡萄糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶（UGT）的活性下降密切相關(guān)。臨床研究表明，控制Gilbert綜合征發(fā)病的UGT1A1基因在人類染色體2q37上。正常情況下，UGT1A1基因編碼的蛋白能夠促使膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合，使非結(jié)合膽紅素轉(zhuǎn)化為結(jié)合膽紅素。當(dāng)UGT1A1基因發(fā)生遺傳變異時(shí)，其基因的表達(dá)水平明顯下降，從而可導(dǎo)致非結(jié)合膽紅素葡萄糖醛酸化的過程出現(xiàn)障礙，最終引發(fā)Gilbert綜合征[2]。在UGT1A1基因中，控制Gilbert綜合征發(fā)病的是TA盒，該因子位于啟動(dòng)子上游距離啟動(dòng)子25～35個(gè)bp處。TATA盒序列正常的野生型純合子為-A(TA)6TAAA(TA)6TAA-(TA6/TA6)，突變純合子為-A(TA)7TAAA(TA)7TAA-(TA7/TA7)，突變雜合子為 -A(TA)6TAAA(TA)7TAA-（TA6/TA7， 也 叫 UGT1A1﹡28）。由于有TA的插入，使TATA盒序列延長，導(dǎo)致TATA盒序列與轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合減少，使UGT1合成受限，進(jìn)而可使UGT的活性下降。在Gilbert綜合征患者的基因序列中，較為常見的外顯子突變位點(diǎn)有UGT1A1﹡6、UGT1A1﹡ 7、UGT1A1﹡27和UGT1A1﹡ 62[3]。UGT1A1基因發(fā)生遺傳變異的類型譜包括UGT1A1啟動(dòng)子TATA盒TA插入突變、c-3279T＞G和外顯子突變。Gilbert綜合征兼有染色體隱性遺傳和顯性遺傳的特點(diǎn)，隱性遺傳由啟動(dòng)子遺傳變異起主導(dǎo)作用，顯性遺傳由外顯子編碼區(qū)突變起主導(dǎo)作用。目前，臨床上主要采用UGT1A1基因檢測(cè)診斷Gilbert綜合征，而輔助診斷該病的方法有饑餓試驗(yàn)（即低熱量飲食試驗(yàn)）、苯巴比妥試驗(yàn)、煙酸激發(fā)試驗(yàn)、利福平試驗(yàn)和肝臟穿刺術(shù)等[4]。在本文中，1例Gilbert綜合征患經(jīng)基因檢測(cè)、饑餓試驗(yàn)及生化檢查，其病情得到確診。后對(duì)該患者進(jìn)行隨訪，發(fā)現(xiàn)其孿生妹妹亦出現(xiàn)相同的癥狀。對(duì)該患者的妹妹進(jìn)行UGT1A1基因檢測(cè)，也診斷其患有Gilbert綜合征。這說明Gilbert綜合征具有一定的遺傳性。大多數(shù)Gilbert綜合征患者不需要進(jìn)行特殊的治療，其在注意休息、嚴(yán)格戒酒及攝入足夠的熱量后，黃疸可自然消退。對(duì)于部分黃疸癥狀嚴(yán)重的患者，可用苯巴比妥、格魯米特、氯貝丁酯等藥物進(jìn)行治療。

[1] 宋華,司徒愛明,宋力,等.一個(gè)Gilbert綜合征家系UGT1A1基因突變報(bào)告[J].臨床兒科雜志,2010,28(12):1141-1144.

[2] Drenth J P,Peters W H,Jansen J B.From gene to disease; uncon jugated hyperbilirubinemia:Gilbert’s syndrome and Crigler-Najjar types I and II[J].Nederlands Tijdschrift Voor Geneeskun de,2002,146(32):1488-1490.

[3] 車芳,駱子義.UGT1A1基因在Gilbert綜合征及Crigler-Najjar綜合征發(fā)病機(jī)制中研究進(jìn)展[J].中華實(shí)用診斷與治療雜志,2015,29（3）:219-222.

[4] 朱俊樂,施斌.Gilbert綜合征的研究現(xiàn)狀[J].臨床肝膽病雜志,2011,27(1):110-112.

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2095-7629-（2017）20-0169-02

趙訓(xùn)智，男，1974年9月出生，漢族，湖北石首人，本科學(xué)歷，主任醫(yī)師，研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療肝膽病