朱秋芳，陳俊英，陳軍如，黃杰榮，張少雄，章國營，林心遠，張魯榕，林金科*（.福建農(nóng)林大學茶學系，福建福州 35000；.福建省個體化主動免疫治療重點實驗室，福建福州 350005）

不同品類鐵觀音對H22荷瘤鼠造血功能的影響

朱秋芳1，陳俊英2，陳軍如1，黃杰榮1，張少雄1，章國營1，林心遠1，張魯榕2，林金科1*
（1.福建農(nóng)林大學茶學系，福建福州 350002；2.福建省個體化主動免疫治療重點實驗室，福建福州 350005）

由于茶葉中含有茶多酚，可能與鐵生成復合物而降低鐵的吸收，因而被認為可導致貧血。為了探討不同品類鐵觀音對荷瘤鼠整個造血功能的影響，我們比較了荷瘤鼠經(jīng)不同品類鐵觀音喂養(yǎng)27天后全血象的變化，結(jié)果表明：（1）與對照組相比，不同濃度清香型鐵觀音使荷瘤鼠白細胞和血小板略有提高，但可顯著提高荷瘤鼠中紅細胞含量，極顯著提高血紅蛋白、紅細胞壓積的含量；（2）與對照組相比，不同品類鐵觀音對荷瘤鼠白細胞和血小板亦影響不大，但能夠提高荷瘤鼠中紅細胞總數(shù)、血紅蛋白、紅細胞壓積的含量?？傊瑢嶒灲Y(jié)果表明不同濃度清香型鐵觀音和不同品類鐵觀音對白細胞和血小板無明顯影響，而且不但不會導致荷瘤鼠患貧血，反而可改善紅細胞系的部分指標。

鐵觀音；荷瘤鼠；造血功能；影響

烏龍茶按產(chǎn)區(qū)主要分閩南烏龍、閩北烏龍、廣東烏龍和臺灣烏龍，已有研究證實烏龍茶具有抑菌[1]、降血糖[2]、降血脂[3]、降壓[4]、抗氧化[5,6]、抗動脈硬化[7,8]和抗癌[9-18]等功效，鐵觀音作為閩南烏龍茶的典型代表[19,20]，其保健功效格外值得研究和探索。

對茶葉是否有不利健康的因子存在亦有不同說法。有人認為茶葉中含有茶多酚，可能與鐵生成復合物而降低鐵的吸收利用，導致貧血。王守禮[21]等人認為茶葉中的兒茶素可與鐵發(fā)生氧化反應，將三價鐵離子還原成二價鐵離子，或者與鐵絡合形成絡合物從而降低鐵離子的活性，阻礙鐵與血紅蛋白的結(jié)合。秦有學等人[22-26]調(diào)查研究得出：女性、兒童、老人以及癌癥患者不宜喝濃茶。2010年寶國秀[27]調(diào)查臨床160例缺鐵性貧血患者，發(fā)現(xiàn)：貧血人群中由于惡性腫瘤導致缺鐵性貧血的占到6.25%，飲濃茶導致缺鐵性貧血的也占到6.25%。相反，美國加州大學食品科學研究人員研究發(fā)現(xiàn)：飲茶不會導致貧血，反而還可以防止貧血[28-30]。

為了探明飲茶對荷瘤患者造血功能的影響，我們給予荷瘤鼠飲不同濃度的清香型鐵觀音或不同品類的鐵觀音，27天后用URIT-2900Vet Plus全自動動物血細胞分析儀檢測腫瘤鼠全血象的變化，進行了統(tǒng)計分析，首次報道了鐵觀音對荷瘤鼠全血象的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

SPF級ICR雌性小鼠、普通飼料和墊料均購自上海斯萊克動物有限責任公司。

不同品類鐵觀音的來源：清香型鐵觀音、濃香型鐵觀音、鐵觀音陳茶和鐵觀音茶末由安溪縣桃源有機茶場有限公司提供；鐵觀音速溶茶由大閩食品（漳州）有限公司提供；高咖啡堿鐵觀音速溶茶由福建仙洋洋食品科技有限公司提供；鐵觀音鮮葉采自福建農(nóng)林大學茶園教學實驗基地。

1.2 飼養(yǎng)方法

將66只6周齡的ICR雌性小鼠，隨機分成11組，每組6只，體重在23～26g。

茶湯制備：清香型鐵觀音按照1:25、1:50、1:100的比例，在95℃水浴鍋中，浸提30min；濃香型鐵觀音、陳香型鐵觀音、鐵觀音茶末按1:50比例在95℃水浴鍋中浸提30min；由于鐵觀音鮮葉與制成干茶比率為4:1，干茶與制成速溶茶比率為1:5，因此按干茶茶水比1:50來算，鐵觀音鮮葉按照1:12.5、鐵觀音速溶茶、高咖啡堿鐵觀音速溶茶按照1:250的比例，95℃水浴鍋中浸提30min。

步驟：將ICR小鼠隨機分組，每組6只，各處理如表1所示，標記并稱重；造模前，給予茶湯進行適應性喂養(yǎng)1周；1周后皮下接種5×105個H22肝癌細胞，繼續(xù)給茶。飲茶27天后，各組間腫瘤出現(xiàn)明顯差異此時進行尾靜脈放血。

1.3 血液樣本采集

于1.5ml的離心管中加入50μL 1.5%的EDTA，并放取尾靜脈血0.3 ml。

1.4 儀器及血液測定

采用URIT-2900Vet Plus全自動動物血細胞分析儀，使用公司原配試劑進行血細胞檢測。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用Excel和SPSS19.0軟件處理數(shù)據(jù)，方差分析，檢驗其顯著性，結(jié)果以x ±SD形式表示。

表1 實驗組別的分類與處理

2 結(jié)果

2.1 不同濃度清香型鐵觀音對荷瘤鼠造血功能的測定

2.1.1 不同濃度清香型鐵觀音對荷瘤鼠白細胞的測定

經(jīng)過測定得到：飲1:100和1:25濃度的清香型鐵觀音荷瘤鼠的血液中白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)、中間細胞總數(shù)和中性粒細胞總數(shù)的含量均高于對照組，但未達到顯著差異。其中白細胞總數(shù)、中間細胞總數(shù)和中性粒細胞總數(shù)的變化隨清香型鐵觀音濃度升高有增加的趨勢，而淋巴細胞總數(shù)的變化則表現(xiàn)出隨清香型鐵觀音濃度升高而減少的趨勢，如表2所示。著/極顯著水平。下同。

表2 不同濃度清香型對荷瘤鼠白細胞的影響（±S，n=6）

表2 不同濃度清香型對荷瘤鼠白細胞的影響（±S，n=6）

說明：平均值±標準誤，*/**表示與對照組相比，P＜0.05/P＜0.01，達到顯

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2.1.2 不同濃度清香型鐵觀音對荷瘤鼠紅細胞的測定

比較了不同濃度清香型鐵觀音對荷瘤鼠紅細胞的影響，得出：1:100和1: 25濃度的清香型鐵觀音荷瘤鼠中的紅細胞總數(shù)、血紅蛋白、紅細胞壓積、平均血紅蛋白濃度和紅細胞分布寬度CV的含量均高于對照組，且含量隨清香型鐵觀音濃度升高有增加趨勢。與對照組相比，紅細胞總數(shù)均達到顯著差異，血紅蛋白和紅細胞壓積均達到極顯著差異，平均血紅蛋白濃度和紅細胞分布寬度CV均未達到顯著差異。與對照組相比，紅細胞平均體積和平均血紅蛋白含量均低于對照組，且表現(xiàn)出隨清香型鐵觀音濃度升高而減少的趨勢，其中清高組的紅細胞平均體積達到極顯著水平，其他無顯著差異。與對照組相比，清低組荷瘤鼠紅細胞分布寬度SD略高，但未達到顯著差異，而清高組幾乎不變。如表3所示。

表3 不同濃度清香型對荷瘤鼠紅細胞的影響（±S，n=6）

表3 不同濃度清香型對荷瘤鼠紅細胞的影響（±S，n=6）

對照組 清低組 清高組紅細胞總數(shù)(?10/L) 6.53–0.34 7.99–0.32* 8.40–0.14*血紅蛋白(g/L) 117.17–6.90 141.83–5.02 ** 147.50–2.36 **紅細胞壓積(%) 34.33–1.93 41.50–1.65** 42.47–0.68 **紅細胞平均體積(fL) 52.62–0.45 52.05–0.36 50.60–0.46**平均血紅蛋白含量(pg) 17.87–0.21 17.75–0.19 17.50–0.21平均血紅蛋白濃度(g/L) 340.50–5.74 341.50–2.81 346.83–3.38紅細胞分布寬度CV(%) 14.68–0.29 15.32–0.17 15.42–0.20紅細胞分布寬度SD(fL) 29.03–0.43 29.68–0.40 29.03–0.27

2.1.3 不同濃度清香型鐵觀音對荷瘤鼠血小板的測定

如表4所示：與對照組相比，清低組和清高組荷瘤鼠的血小板總數(shù)略高，但未達到顯著差異，且其含量隨清香型鐵觀音濃度升高有增加的趨勢；清低組的血小板平均體積、血小板分布寬度和大血小板比率均高于對照組，也高于清高組，整體呈現(xiàn)出隨清香型鐵觀音濃度升高而降低的趨勢；清低組和清高組的血小板壓積均高于對照組，但未達到顯著差異，其表現(xiàn)出隨清香型鐵觀音濃度升高而減少的趨勢。

表4 不同濃度清香型對荷瘤鼠血小板的影響（S，n=6）

表4 不同濃度清香型對荷瘤鼠血小板的影響（S，n=6）

對照組 清低組 清高組血小板總數(shù)(?10/L) 320.50–47.92 361.33–40.23 381.00–26.73血小板平均體積(fL) 11.12–0.57 11.30–0.31 10.60–0.29血小板分布寬度(fL) 7.72–1.36 7.82–0.24 7.35–0.23血小板壓積(%) 0.36–0.07 0.41–0.06 0.40–0.04大血小板比率(%) 20.88–3.69 22.77–1.81 19.77–1.86

2.2 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠造血功能的測定

綜合不同濃度清香型鐵觀音對荷瘤鼠造血功能的影響，下面研究以1:50濃度清香型鐵觀音及其以加工得率換算得到的不同品類鐵觀音對荷瘤鼠造血功能的影響。

2.2.1 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠白細胞的測定

對比了不同品類鐵觀音對荷瘤鼠白細胞的影響，得到：與對照組相比，鮮葉組、清香組、陳香組和茶末組荷瘤鼠的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)、中間細胞總數(shù)和中性粒細胞總數(shù)均降低，但未達到顯著差異；速溶組荷瘤鼠的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)和中間細胞總數(shù)略低于對照組，中性粒細胞總數(shù)略高于對照組，但均未達到顯著差異；高咖組荷瘤鼠的白細胞總數(shù)和中性粒細胞總數(shù)均高于對照組，而淋巴細胞總數(shù)和中間細胞總數(shù)均低于對照組，但未達到顯著差異；濃香組荷瘤鼠的白細胞總數(shù)、淋巴細胞總數(shù)、中間細胞總數(shù)和中性粒細胞總數(shù)均高于對照組，但未達到顯著差異；如表5所示。

表5 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠白細胞的影響（±S，n=6）

表5 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠白細胞的影響（±S，n=6）

對照組 鮮葉組 清香組 濃香組 陳香組 茶末組 速溶組 高咖組白細胞總數(shù)(?10/L) 24.23–4.71 17.00–2.68 18.47–2.25 33.78–8.37 19.00–2.88 13.93–1.19 20.77–1.68 25.30–2.21淋巴細胞總數(shù)(?10/L) 4.77–1.08 3.17–0.49 3.37–0.51 7.45–3.35 3.43–0.50 2.42–0.41 3.25–0.43 3.93–0.22中間細胞總數(shù)(?10/L) 12.67–2.36 8.37–1.46 10.30–1.19 16.82–2.79 9.70–2.27 7.35–0.62* 10.43–1.03 11.58–1.16中性粒細胞總數(shù)(?10/L) 6.80–1.49 5.47–1.03 4.80–0.77 9.52–2.47 5.87–0.74 4.17–0.38 7.08–1.05 9.78–3.32

表6 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠紅細胞的影響（±S，n=6）

表6 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠紅細胞的影響（±S，n=6）

對照組 鮮葉組 清香組 濃香組 陳香組 茶末組 速溶組 高咖組紅細胞總數(shù)(?10/L) 6.53–0.34 8.94–0.73** 8.32–0.23* 8.23–0.19 8.24–0.43 8.66–0.58* 6.97–1.40 9.01–0.20**血紅蛋白(g/L) 117.17–6.90 159.00–13.06** 147.67–4.54** 147.67–4.61 ** 146.00–9.38** 140.17–2.86* 147.33–3.90** 151.33–4.25**紅細胞壓積(%) 34.33–1.93 44.97–3.32** 43.48–1.21** 42.60–1.11** 41.97–2.30* 43.75–2.70** 43.48–0.98** 44.70–1.01**紅細胞平均體積(fL) 52.62–0.45 50.60–0.74* 52.35–0.42 51.83–0.60 50.97–0.72 50.65–0.44* 52.10–0.91 49.70–0.61**平均血紅蛋白含量(pg) 17.87–0.21 17.75–0.26 17.70–0.22 17.87–0.35 17.60–0.29 16.45–0.99* 17.48–0.46 16.73–0.29平均血紅蛋白濃度(g/L) 340.50–5.74 352.00–4.40 339.00–2.41 346.00–4.01** 346.50–5.11 320.40–21.13 337.00–4.53 337.83–3.36紅細胞分布寬度CV(%) 14.68–0.29 15.42–0.28 15.22–0.27 16.03–0.40** 15.47–0.22 15.40–0.41 15.48–0.18 15.87–0.46*紅細胞分布寬度SD(fL) 29.03–0.43 28.82–0.40 29.25–0.29 29.68–0.40 28.82–0.40 28.60–0.34 29.38–0.32 29.03–0.27

2.2.2 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠紅細胞的測定

對比了不同品類鐵觀音對荷瘤鼠紅細胞的影響，得到：與對照組相比，鮮葉組極顯著提高了荷瘤鼠中紅細胞總數(shù)、血紅蛋白和紅細胞壓積，顯著提高了紅細胞平均體積，平均血紅蛋白濃度和紅細胞分布寬度CV略有提高，但未達到顯著差異，顯著降低了紅細胞平均體積，平均血紅蛋白含量和紅細胞分布寬度SD略有提高，但未達到顯著差異；清香組極顯著提高了荷瘤鼠中血紅蛋白和紅細胞壓積，顯著提高紅細胞總數(shù)，紅細胞分布寬度均略有提高，但未達到顯著差異，紅細胞平均體積、平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度略有降低，但未達到顯著差異；濃香組極顯著提高了荷瘤鼠中血紅蛋白、紅細胞壓積、平均血紅蛋白濃度和紅細胞分布寬度CV，紅細胞總數(shù)和紅細胞分布寬度SD略有升高，但未達到顯著差異，紅細胞平均體積略有降低，平均血紅蛋白含量幾乎不變；陳香組極顯著提高了荷瘤鼠中血紅蛋白含量，顯著提高紅細胞壓積，紅細胞總數(shù)、平均血紅蛋白濃度和紅細胞分布寬度CV略有升高，但未達到顯著差異，紅細胞平均體積、平均血紅蛋白含量和紅細胞分布寬度SD略有降低；茶末組極顯著提高了荷瘤鼠紅細胞壓積，顯著提高紅細胞總數(shù)和血紅蛋白含量，紅細胞分布寬度CV略有提高，顯著降低了荷瘤鼠紅細胞平均體積和平均血紅蛋白含量，平均血紅蛋白濃度和紅細胞分布寬度SD有所降低，但未達到顯著差異；速溶組極顯著提高了荷瘤鼠血紅蛋白和紅細胞壓積，紅細胞總數(shù)和紅細胞分布寬度均有所提高，但紅細胞平均體積、平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度略有降低，但未達到顯著差異；高咖組極顯著提高了荷瘤鼠中紅細胞總數(shù)、血紅蛋白和紅細胞壓積，顯著提高了紅細胞分布寬度CV，而紅細胞分布寬度SD幾乎不變，極顯著降低了紅細胞平均體積，平均血紅蛋白含量和平均血紅蛋白濃度略有降低；如表6所示。

表7 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠血小板的影響（±S，n=6）

表7 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠血小板的影響（±S，n=6）

對照組 鮮葉組 清香組 濃香組 陳香組 茶末組 速溶組 高咖組血小板總數(shù)(?102 266.50–55.3 8 335.83–22.0 5 346.50–30.8 6 302.50–9.1 4 330.00–33.9 3 263.33–69.1 7 309.00–33.39血小板平均體積(fL) 11.12–0.57 10.42–0.3 4血小板分布寬度(fL) 7.72–1.36 10.22–0.56 11.25–0.31 11.03–0.39 10.68–0.54 10.63–0.44 10.32–0.43 10.22–1.52 7.52–0.30 7.40–0.32 7.40–0.44 8.47–1.37 7.22–0.41 7.75–0.39血小板壓積(%) 0.36–0.07 0.28–0.08 0.37–0.03 0.38–0.04 0.32–0.02 0.35–0.05 0.27–0.08 0.32–0.04大血小板比率(%) 20.88–3.69 13.00–4.66 22.88–1.76 21.62–2.66 19.08–2.99 17.38–3.45 14.37–4.17 16.92–2.9 0

2.2.3 不同品類鐵觀音對荷瘤鼠血小板的測定

如表7所示，與對照組相比，鮮葉組、陳香組、速溶組和高咖組均使荷瘤鼠中血小板總數(shù)、血小板平均體積、血小板壓積和大血小板比率降低，未達到顯著水平；清香組、濃香組和茶末組提高了荷瘤鼠中血小板總數(shù)，但未達到顯著水平；鮮葉組、茶末組和高咖組提高了荷瘤鼠中血小板分布寬度，但未達到顯著差異；清香組和濃香組提高了荷瘤鼠中血小板壓積和大血小板比率，但未達到顯著差異；陳香組和速溶組荷瘤鼠的血小板總數(shù)、血小板平均體積、血小板分布寬度、血小板壓積和大血小板比率均降低，但未達到顯著差異。

3 討論

3.1 鐵觀音對荷瘤鼠白細胞的影響

前人研究得到茶葉具有殺菌消炎的作用[31-33]，本實驗得到：1:25和1:100濃度的清香型鐵觀音、濃香型鐵觀音可使荷瘤鼠中白細胞總數(shù)、中間細胞總數(shù)和中性粒細胞總數(shù)增加，增強殺菌消炎的作用，與前人研究相符；而鐵觀音鮮葉、1:50濃度清香型鐵觀音、陳香型鐵觀音、鐵觀音茶末、鐵觀音速溶茶和高咖啡堿鐵觀音速溶茶降低了荷瘤鼠中淋巴細胞總數(shù)和中間細胞總數(shù)，使得荷瘤鼠殺菌消炎能力下降，如何解釋這一現(xiàn)象，尚待探討。

3.2 鐵觀對荷瘤鼠紅細胞的影響

前人研究對飲茶能否導致貧血有不同看法[21-30]，而本實驗證實了：不同濃度的清香型鐵觀音和不同品類鐵觀音均使荷瘤鼠中的紅細胞總數(shù)、血紅蛋白、紅細胞壓積升高，而紅細胞平均體積和平均血紅蛋白含量有所降低，其中1:25濃度的清香型鐵觀音和高咖啡堿鐵觀音速溶茶極顯著降低了荷瘤鼠中紅細胞平均體積，鐵觀音鮮葉、鐵觀音茶末顯著降低了荷瘤鼠中紅細胞平均體積，鐵觀音茶末顯著降低了荷瘤鼠中平均血紅蛋白含量，但整體綜合來看，無明顯貧血現(xiàn)象。

3.3 鐵觀音對荷瘤鼠血小板的影響

不同濃度清香型鐵觀音和濃香型鐵觀音均升高了荷瘤鼠中血小板總數(shù)和血小板壓積，說明清香型鐵觀音和濃香型鐵觀音具有增加荷瘤鼠凝血的潛能，而鐵觀音鮮葉、陳香型鐵觀音、鐵觀音速溶茶和高咖啡堿鐵觀音速溶茶無此效果。

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安溪縣人民政府科技資助項目（KH1500790，K1515059A）；福建農(nóng)林大學科技發(fā)展資金（KF2015122）。

朱秋芳（1989-），女，碩士研究生，研究方向：茶葉深加工與資源利用。

*責任作者：林金科（1967-），男，博士，教授，研究方向：茶葉深加工與資源利用，茶樹安全優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)與生物技術(shù)等，E-mail: ljk213@163.com.