郭真理,潘美華,沈 倩,李 恒,陳 杰,孫思柏
全自動(dòng)封閉式組織脫水機(jī)的應(yīng)用及預(yù)防性保養(yǎng)
郭真理1,潘美華2,沈 倩1,李 恒1,陳 杰1,孫思柏1
組織脫水機(jī);應(yīng)用;預(yù)防性保養(yǎng)
隨著現(xiàn)代病理技術(shù)的發(fā)展,脫水 -透明-浸蠟等一系列的組織前期處理已不再需要人工操作,取而代之的是生物組織全自動(dòng)脫水機(jī)備,它具有容量大、自動(dòng)化程度高、環(huán)保無(wú)污染等諸多優(yōu)點(diǎn)。機(jī)器帶來(lái)的便捷同時(shí)也對(duì)操作人員提出更高的要求,越精密的儀器越需要我們仔細(xì)保養(yǎng),盡量避免人為因素導(dǎo)致結(jié)果差異。由于故障出現(xiàn)大多數(shù)為非上班時(shí)間,長(zhǎng)時(shí)間浸泡在高濃度乙醇中的組織會(huì)變硬發(fā)脆,抑或是長(zhǎng)時(shí)間裸露在外的組織會(huì)干枯變形,上述情況均能造成組織的損壞,同時(shí)機(jī)器的維修和組織的補(bǔ)救均需要大量的時(shí)間。因此,良好的、專業(yè)的預(yù)防性保養(yǎng)維護(hù),是我們?nèi)粘9ぷ鞯那疤?。安徽省立醫(yī)院南區(qū)病理科自 2010年開(kāi)始使用 Leica ASP300型全自動(dòng)密閉式組織脫水機(jī)以來(lái),也多次出現(xiàn)故障,筆者查閱了多篇文獻(xiàn)并結(jié)合工作中的使用心得,著重從以下幾個(gè)方面對(duì)脫水機(jī)進(jìn)行保養(yǎng)維護(hù),現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 試劑的更換周期試劑是否需要更換,應(yīng)從標(biāo)本量多少、使用時(shí)間長(zhǎng)短、肉眼觀察液體混濁度及是否混有石蠟、鏡下觀察細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)是否分界清楚及核質(zhì)是否模糊等方面予以把握。以每日300個(gè)標(biāo)本為例,福爾馬林、乙醇及二甲苯一般每周更換1次,梯度乙醇只將第一缸低濃度乙醇廢棄,將后面的乙醇依次前移,最后一缸無(wú)水乙醇更新,Leica ASP300型全自動(dòng)密閉式組織脫水機(jī)按照乙醇濃度由低到高順序前移,廢棄的第一缸裝上無(wú)水乙醇后自動(dòng)成為最后一缸。二甲苯及浸蠟用的石蠟每2周更換1次,每次只將使用時(shí)間較長(zhǎng)、較混濁的一缸廢棄,重新裝上新的二甲苯及石蠟。如果試劑由于某種原因混有石蠟,無(wú)論使用時(shí)間多短都應(yīng)立即予以更換。另外,如果鏡下出現(xiàn)細(xì)胞核質(zhì)分界不清,應(yīng)注意前面第一缸低濃度乙醇是否濃度過(guò)高,過(guò)高的乙醇會(huì)使組織蛋白質(zhì)凝固,導(dǎo)致乙醇無(wú)法深入到組織內(nèi)部,造成脫水處理不佳。在對(duì)上述問(wèn)題綜合評(píng)估基礎(chǔ)上,我們應(yīng)根據(jù)各自實(shí)際情況靈活設(shè)置更換周期,要既能保證組織的處理質(zhì)量,又能最大限度的利用試劑,同時(shí)盡可能的減少?gòu)U液對(duì)環(huán)境的污染。
1.2 試劑更換注意事項(xiàng)(1)每次換試劑時(shí)均要仔細(xì)看清試劑名稱,因?yàn)樵S多盛放無(wú)水乙醇、95%乙醇、二甲苯以及福爾馬林的試劑瓶外觀一樣,應(yīng)避免混淆,最好是等一種換好后再換另一種,切莫混在一塊,否則會(huì)產(chǎn)生極其嚴(yán)重的后果,譬如把福爾馬林當(dāng)無(wú)水乙醇使用后會(huì)使組織灰白發(fā)軟,以致無(wú)法制片影響診斷。(2)試劑液面必須嚴(yán)格控制在最大值與最小值之間,剛換的試劑一般均會(huì)滿足要求,但在使用過(guò)程中應(yīng)予以動(dòng)態(tài)的監(jiān)控。①因?yàn)榻M織中含有的水分多在低濃度乙醇中脫去,特別是第一缸75%乙醇,工作中會(huì)經(jīng)常發(fā)現(xiàn)75%乙醇用了幾天后其試劑桶的液面上升,以致本來(lái)在最大值與最小值之間的液面超過(guò)最大值,從而導(dǎo)致脫水缸試劑排放受阻,產(chǎn)生故障。故一旦發(fā)現(xiàn)液面超過(guò)最大值,必須立即修正。②清洗用的二甲苯由于混入洗掉的石蠟及揮發(fā)等因素,有時(shí)會(huì)造成液面不足以覆蓋檢測(cè)探頭而造成報(bào)警,要及時(shí)予以添足或更換。③石蠟使用過(guò)程中易消耗,要密切觀察隨時(shí)予以補(bǔ)充。另外,注意三道石蠟缸液面最好維持同一平面,不要懸殊太大。(3)避免雜質(zhì)充斥在試劑瓶中,尤其第一缸福爾馬林固定的碎組織容易殘留其中,應(yīng)每周更換一次以防堵塞管道。(4)乙醇的脫水能力較強(qiáng),處理不當(dāng)可硬化組織造成過(guò)度收縮。鄭暉等[1]報(bào)道將第一缸乙醇倒掉,后面依次前移,但高濃度不斷向低濃度替換會(huì)造成低濃度乙醇的濃度越來(lái)越高,其會(huì)使組織表面變硬,乙醇不能深入組織內(nèi)部置換水分,造成脫水效果不理想。同時(shí)乙醇長(zhǎng)期使用后大量的脂肪及蛋白質(zhì)可能殘存其中,也會(huì)影響部分組織內(nèi)部水分的置換。對(duì)脫水的影響尤以大組織標(biāo)本為甚,影響后續(xù)的切片及染色。故應(yīng)按照傳統(tǒng)前移方法更換試劑,我們應(yīng)密切關(guān)注前面低濃度乙醇的濃度。(5)無(wú)水乙醇和二甲苯應(yīng)間隔一、兩天更換,否則同時(shí)更換會(huì)使組織塊收縮過(guò)度,變硬發(fā)脆,導(dǎo)致組織染色后細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)界限不清。(6)所用石蠟熔點(diǎn)變化時(shí)需相應(yīng)調(diào)整蠟缸設(shè)置溫度,如所用石蠟熔點(diǎn)由56~58℃換成58~60℃時(shí),相應(yīng)的蠟缸溫度設(shè)定應(yīng)增加2℃,否則石蠟會(huì)呈固液混合狀態(tài),造成管道堵塞以致停機(jī)維修。(7)標(biāo)本筐每次從第二缸二甲笨進(jìn)入第一缸石蠟的時(shí)候也將少許二甲苯帶入第一缸石蠟內(nèi),多次后會(huì)使第一缸石蠟內(nèi)二甲苯量增多,可以利用石蠟和二甲苯沸點(diǎn)不同[2](石蠟沸點(diǎn)>300℃、二甲苯沸點(diǎn)約144℃),二甲苯易揮發(fā)的特點(diǎn)每天把蓋子打開(kāi)2 h,使二甲苯揮發(fā)出去(另外2缸石蠟用紙板蓋上避免同時(shí)揮發(fā))以延長(zhǎng)石蠟使用時(shí)間,減少成本。需注意的是,如果石蠟中混入脂肪較多達(dá)不到浸蠟要求時(shí)應(yīng)立即予以更換。(8)定期將殘液瓶里廢液倒掉,以免倒吸引起管道阻塞。
氣溫較低時(shí)應(yīng)使用加熱功能,除石蠟外其余試劑缸的溫度應(yīng)設(shè)定為40℃,加熱后標(biāo)本固定所需時(shí)間可明顯縮短,且效果更佳。組織脫水程序中2缸二甲苯一般每缸時(shí)間設(shè)定為45~60 min,浸泡時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)造成脫水后組織標(biāo)本過(guò)脆。由于第一缸石蠟多為二甲苯和石蠟的混合液,組織標(biāo)本在第一缸石蠟中停留時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。有文獻(xiàn)[3]報(bào)道標(biāo)本在石蠟和二甲苯的混合液中浸泡 60 min以上會(huì)造成組織硬脆和鏡下細(xì)胞收縮,改為 5 min則情況明顯好轉(zhuǎn)。設(shè)定程序[4]時(shí)應(yīng)充分考慮時(shí)間、溫度、壓力以及試劑的種類及新舊程度等各項(xiàng)參數(shù),各單位可根據(jù)實(shí)際情況設(shè)置,目的是保證各參數(shù)的合理性以達(dá)到最佳的脫水、透明及浸蠟效果。在一定范圍內(nèi)上述各項(xiàng)參數(shù)互為相關(guān),即其中一個(gè)參數(shù)有變化時(shí),別的參數(shù)可能也要適時(shí)作出調(diào)整,才能保證有良好的處理效果。譬如可以適當(dāng)延長(zhǎng)浸泡時(shí)間和(或)提高溫度來(lái)彌補(bǔ)試劑陳舊的不足,抑或用取消壓力和(或)降低溫度來(lái)抵消延長(zhǎng)時(shí)間的作用。值得注意的是,當(dāng)其中一項(xiàng)參數(shù)變化過(guò)大超過(guò)一定范圍時(shí),調(diào)動(dòng)其它參數(shù)也毫無(wú)意義。同樣微小變化的各參數(shù)對(duì)處理效果并無(wú)太大影響,故而程序調(diào)動(dòng)不必過(guò)于頻繁。
3.1 脫水缸清潔(1)每次脫水程序后,應(yīng)立即用衛(wèi)生紙將脫水缸中處于熔融狀態(tài)的蠟搽拭干凈,既可以節(jié)省后續(xù)清洗程序中的二甲苯又可以避免一些細(xì)小的組織殘?jiān)鼫?。?)密閉式脫水機(jī)的脫水缸底部有一個(gè)過(guò)濾漏孔,組織前期處理過(guò)程中所有試劑均由漏孔抽入或排除組織處理槽,因此要定期將過(guò)濾器漏孔上附著的油脂及固體沉渣清除,以保障過(guò)濾網(wǎng)的通暢,切勿使之堵塞引起故障。(3)脫水缸上的缸蓋密封圈可能會(huì)因?yàn)闅埩暨^(guò)多石蠟影響脫水缸密封性能,從而導(dǎo)致脫水缸漏氣的故障。因此,我們要定期清除密封圈周圍溢出的石蠟并用相關(guān)溶劑清潔密封圈。(4)脫水缸內(nèi)側(cè)探測(cè)頭主要發(fā)揮檢測(cè)試劑液面高低的作用,如果受到污染可能引起機(jī)器中途停止運(yùn)行。因此,每次需在標(biāo)本上機(jī)前搽拭干凈以防故障出現(xiàn)。
3.2 標(biāo)本框清潔組織脫水程序完成后的標(biāo)本框、蓋上常常黏附著不少石蠟,這些石蠟在下一輪的脫水程序中經(jīng)過(guò)固定時(shí)的加溫有可能溶化,從而進(jìn)入脫水機(jī)的虹吸管道造成堵塞,引起各種試劑相互污染。故而每次程序運(yùn)行完成后必須將標(biāo)本框、蓋放在烤箱內(nèi)烤1 h。需注意的是,烤箱的溫度應(yīng)設(shè)定高于蠟的熔點(diǎn),并在下面墊上一個(gè)托盤(pán)用以接收融化的石蠟。
3.3 管道及閥門清潔(1)組織處理過(guò)程中可能會(huì)有囊腫內(nèi)的膠質(zhì)、含脂肪組織的油脂及部分血跡等異物混于試劑中,當(dāng)試劑途經(jīng)管道時(shí)長(zhǎng)期黏附于管道壁及閥門上。浸蠟時(shí)也有可能部分石蠟顆粒粘在其中,尤其注意的是試劑中的石蠟和脂肪的混合物更易造成管道阻塞(特別是在寒冷的冬天)。(2)當(dāng)上述各類異物雜質(zhì)黏附在4個(gè)空氣轉(zhuǎn)換閥(冷凝閥C、壓力閥P、真空閥V、空氣閥 A)里的一個(gè)或幾個(gè)時(shí),閥內(nèi)異物將使轉(zhuǎn)換閥無(wú)法正常運(yùn)轉(zhuǎn),從而導(dǎo)致抽吸的真空壓或壓力不夠。為盡量避免上述故障發(fā)生,我們要做到以下幾點(diǎn)。(1)定期清洗管道及閥門,用2%的洗衣粉液和65℃的熱水以及 95%乙醇清洗[5]。(2)采用干凈的清洗液清潔脫水缸,避免把雜質(zhì)和石蠟帶到管道和試劑瓶?jī)?nèi)。(3)脫水、透明、浸蠟所用的試劑要干凈,否則試劑中會(huì)產(chǎn)生脂肪和石蠟的混合物。(4)避免操作失誤導(dǎo)致脫水缸內(nèi)的石蠟流入公共管道,遇冷凝固的石蠟使管道發(fā)生堵塞。(5)管道阻塞可以用氣流吹法、熱水灌注法等處理管道堵塞,避免用細(xì)鐵絲去直接捅管道,易造成管道被捅破。
3.4 試劑桶內(nèi)壁清潔在混有脂肪、膠質(zhì)及血跡等雜質(zhì)的試劑桶內(nèi)壁上也會(huì)附著許多異物,如不及時(shí)清除既會(huì)降低試劑純度也有可能脫落后形成栓子隨試劑運(yùn)行到管道或閥門上,導(dǎo)致管道堵塞或閥門失靈。因此,每次更換試劑時(shí),務(wù)必用熱水沖洗試劑桶內(nèi)壁的油脂等雜物。
每個(gè)標(biāo)本框的最大容量為100個(gè)標(biāo)本,否則組織間相互擠壓可能會(huì)引起脫水的液體不能充分浸沒(méi)全部標(biāo)本,以致液體交換不足造成組織處理不良。避免重復(fù)開(kāi)關(guān)機(jī),否則可能會(huì)導(dǎo)致硬盤(pán)損壞或文件丟失無(wú)法還原,也有可能會(huì)導(dǎo)致觸摸屏黑屏或藍(lán)屏?;钚蕴坑镁煤罂扇〕龇庞诟稍锵鋬?nèi)烘干或放置通風(fēng)干燥處一段時(shí)間后繼續(xù)使用。機(jī)器的散熱風(fēng)扇及電路板上易吸附灰塵,不定期清除灰塵可能會(huì)引起散熱不良,從而影響設(shè)備運(yùn)行。因此,需要把脫水機(jī)放置在光線、通風(fēng)均良好的地方并定期除塵,以延長(zhǎng)機(jī)器使用的壽命。
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R 446.8
B
1001-7399(2017)01-0111-02
10.13315/j.cnki.cjcep.2017.01.031
接受日期:2016-10-28
1安徽省立醫(yī)院南區(qū)病理科,合肥 230031
2安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科,合肥 230032
郭真理,男,碩士,主管技師。E-mail:wycg1984@163.com潘美華,女,副主任技師,通訊作者。E-mail:meihua6668 @163.com