馬亞娟，王寶春，殷海霞，朱小芳

（江西中醫(yī)藥大學藥學院，江西 南昌 330004）

液質(zhì)聯(lián)用技術在中藥成分研究中的應用

馬亞娟，王寶春，殷海霞，朱小芳

（江西中醫(yī)藥大學藥學院，江西 南昌 330004）

液質(zhì)聯(lián)用技術將液相色譜的良好分離性與質(zhì)譜選擇靈敏性好結合起來，有分析范圍廣，分離能力強等優(yōu)點。本文重點介紹液質(zhì)聯(lián)用的關鍵技術-接口技術，及該技術在中藥成分研究中的應用。

液質(zhì)聯(lián)用技術；接口；中藥成分分離；中藥成分鑒定

1 液質(zhì)聯(lián)用接口技術概述

液質(zhì)聯(lián)用技術（LC－MS）是近年發(fā)展起來的一門綜合性分析技術，它將HPLC的高分離效能與MS的強大結構測定功能組合起來，使樣品的分離定性及定量成為連續(xù)的過程[1]。但是曾經(jīng)LC與MS聯(lián)用被認為是“不可能的結合”，傳統(tǒng)的HPLC系統(tǒng)中遇到的高流速和質(zhì)譜儀要求的真空度難以協(xié)調(diào)。為克服上述困難，必須找到合適的接口才能實現(xiàn)液質(zhì)聯(lián)用。下面將對液質(zhì)聯(lián)用發(fā)展過程中的接口技術進行概述。

有以下五中接口技術[2-4]。（1）直接液體導入（DLI）接口。在真空泵的承受范圍里，以較小的液流直接導入質(zhì)譜。液相的柱后流出物被分流，通過負壓的驅(qū)動經(jīng)噴射作用流進脫溶劑室形成細小的液滴，然后經(jīng)加熱脫去溶劑。脫溶劑時沒有離子產(chǎn)生，其離子化過程在離子源內(nèi)，是被分析物分子和溶劑作用的結果。其碎片是靠電子轟擊源的電子轟擊產(chǎn)生。（2）移動帶技術（MB）。在液相柱后增加了速度可變的流出物的傳送帶，柱后流出物滴落在傳送帶上，大部分溶劑經(jīng)紅外加熱被除掉，后進入真空室，傳送帶的改變依照流動相的組成進行，流量高，含水多時帶的移動速度要比較慢。在真空中既能進一步脫去溶劑，又能出現(xiàn)分析物分子的揮發(fā)。離子化是以EI或CI進行，有的儀器也曾使用FAB。（3）熱噴霧接口（TS/TSP）。熱噴霧接口設計中直接進樣桿的位置被噴霧探針取代，流動相經(jīng)噴霧探針時被加熱到低于流動相完全蒸發(fā)點5～10℃的溫度，體積膨脹后以超聲速噴出探針形成霧狀混合物。熱噴霧接口的主要特點是可以適應較大的LC流動相流速，較強的加熱蒸發(fā)作用可以適應高比例水的流動相，這是優(yōu)于其他接口的最大特點。（4）粒子束接口（PB）。能夠獲得像氣相色譜一樣且可用圖庫檢索的EI譜是PB接口的最有價值的優(yōu)點。帶PB接口的LC-MS已將GC-MS的應用擴展到了更多極性和較高分子質(zhì)量的化合物。由于兩種離子化方式中的任何一種均屬軟電離，因此只能導致有限的碎裂。為了從TSP-LC-MS分析中獲得特征的碎片譜，常使用串聯(lián)的四極質(zhì)譜儀。（5）常壓離子化技術（API）。以大氣壓電離源（簡稱API）為接口，包括電噴霧（ESI）和大氣壓化學電離技術（APCI），視樣品不同而選用。主要給出分子量信息，一定條件下可提供有限的結構信息。對于純度高的樣品可做直接進樣。

2 液質(zhì)聯(lián)用技術在中藥化學成分研究中的應用

中藥成分繁多，不易分離，特別是含量少、無紫外吸收的化合物，傳統(tǒng)方法很難對其做出分析檢測。然而LC-MS技術可解決上述問題，它的前處理簡便，同時得到化合物保留時間、分子量及特征結構碎片等信息。在對未知成分的研究中，通過質(zhì)譜檢測器給出的大量結構信息，結合同類化合物的裂解規(guī)律，即可對未知成分進行分析。下面將對液質(zhì)聯(lián)用技術在中藥成分研究中的應用進行綜述。

在中藥化學成分分離中的應用。曾茂貴[5]等通過高效液相色譜—飛行時間質(zhì)譜聯(lián)用技術對藍花參中化學成分進行分析鑒定，初步推斷出6個化學成分均為首次發(fā)現(xiàn)，分別是紫云英苷，蘆丁，槲皮素－7－O－葡萄糖苷，橙皮苷，槲皮素芹菜苷。王兆基[6]等用LC-MS法測定烏頭屬藥材及有關中成藥中烏頭類生物堿的含量，結果表明分析樣品中各烏頭堿濃度在0.5～40 mg/L范圍內(nèi)，色譜峰面積與濃度有良好的線性關系。

在中藥化學成分鑒定中的應用。劉夢嬌[7]等采用超高效液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時間質(zhì)譜定性分析復方三黃片中化學成分，快速準確的鑒定了38個化合物，包括1個生物堿類成分，1個二蒽酮類化合物，6個鞣質(zhì)類成分，7個蒽醌苷類成分，6個游離蒽醌類成分，17個黃酮類成分。張晨曦[8]等應用液質(zhì)聯(lián)用技術在正負離子模式下分析連翹中的主要化學成分，鑒定24個化合物，有12個苯乙醇苷類成分、7個木脂素類成分、5個黃酮類化合物，其中有5個化合物：3，4-二羥基苯乙醇苷、2-甲氧基-3，4，5-三羥基苯乙醇苷、β-羥基化連翹酯苷H、6-羥基二氫黃酮、二氫楊梅素為首次從連翹中得到鑒定。

3 展 望

中藥是我國中醫(yī)藥寶庫中一朵奇葩，其發(fā)展前景十分廣闊。但是中藥成分復雜，作用廣泛，這對其深入研究造成了巨大的困難。液質(zhì)聯(lián)用技術將色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高鑒別特點能力相結合，可以實現(xiàn)對中藥的物質(zhì)基礎、質(zhì)量控制、藥代動力學等多方面進行研究。隨著現(xiàn)代化進程的持續(xù)推進，液質(zhì)聯(lián)用技術將不斷完善，必將在中藥研究領域中發(fā)揮越來越重要的作用。

[1] 吳定慧,陳關鍵.液質(zhì)聯(lián)用技術在中藥研究中的應用概述[J].實用中醫(yī)藥雜志,2012,28(1):65-66.

[2] Bi H.Hoffman KL.Pace G.et al.Mixed-mechanismionization to enhance sensitivity in atomospheric pressureionization LC/MS[J].J Pharein Biomed Anal,2000,22(5):861.

[3] Niessen WMA.Advances in instrumentation in liquid chromatography mass spectrometry and related liquid-introduction techniques[J].J Chromatogr A,1998,794(122):407.

[4] Yang M,Sun J,Lu Z,et al.Phytochemical analysis of traditional Chinese medicine using liquid chromatography coupled with mass spectrometry[J].J Chromatogr A,2009,1216(11):2045-2062.

[5] 曾茂貴,張 寬,羅 蘭.基于HPLC-DAD-Q-TOF-MS的藍花參化學成分定性研究[J].中國醫(yī)院藥學雜志,2017,37(11):1023-1027.

[6] 王兆基,何紹基,徐樹棋.液相色譜/質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用法測定烏頭屬藥材及中成藥中烏頭類生物鹼含量[J].分析化學,2001,(第4期):391-395.

[7] 劉夢嬌,王 云,李 玲,等.云三黃片化學成分的UPLC-Q-TOFMS/MS快速鑒定分析[J].中國中藥雜志,2017,42(9):1685-1692.

[8] 張晨曦,劉素香,趙艷敏,等.基于液質(zhì)聯(lián)用技術的連翹化學成分分析[J].中草藥,2016,(12):2053-2060.

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ISSN.2095-8242.2017.056.11076.02

本文編輯：吳 衛(wèi)