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        猴頭菇子實(shí)體對運(yùn)動后細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用*

        2020-03-24 12:55:20于學(xué)考劉海東
        中國食用菌 2020年2期
        關(guān)鍵詞:猴頭菇清除率光度

        于學(xué)考,劉海東

        (1.四川商務(wù)職業(yè)學(xué)院,四川 成都 611131;2.成都師范學(xué)院體育學(xué)院,四川 成都 611130)

        猴頭菇(Hericium erinaceus) 屬于藥食兼用真菌,作為食用菌王國的珍品,以其藥用價(jià)值受到廣大消費(fèi)者的青睞。新鮮的猴頭菇子實(shí)體呈白色球形,干制品的猴頭菇子實(shí)體色澤白中帶黃,其肉質(zhì)、內(nèi)實(shí),無柄,因其形狀似猴子的頭而得名。猴頭菇富含多種人體必需氨基酸、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)元素[1],自古就有“山中猴頭,海味魚翅”的說法,與魚翅、熊掌、燕窩并譽(yù)為四大名菜。中醫(yī)認(rèn)為“猴頭菇性平味甘,有利五臟、能夠助消化、滋補(bǔ)身體”,常被用于胃病的治療[2];而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,猴頭菇還能夠提高人體免疫力、延緩衰老,具有抗疲勞、滋養(yǎng)氣血等功效,猴頭菇子實(shí)體中的多糖是提高人體抗氧化能力和免疫力的活性物質(zhì)來源,也是其藥理活性的主要成分。猴頭菇多糖具有抗腫瘤、抗衰老、提高人體免疫力等作用,可清除人體內(nèi)各類活性氧自由基[3]。而自由基生物醫(yī)學(xué)理論研究表明,人體內(nèi)氧自由基的產(chǎn)生和清除是基本平衡的,當(dāng)機(jī)體內(nèi)的自由基過量時(shí)就會引起細(xì)胞內(nèi)多種物質(zhì)的不良變化等,導(dǎo)致運(yùn)動細(xì)胞損傷,引起衰老、疲勞等現(xiàn)象。通過針對猴頭菇多糖營養(yǎng)成分進(jìn)行測定分析,并對其氧化和還原穩(wěn)定性開展試驗(yàn),研究分析猴頭菇多糖的含量和相關(guān)的理化性質(zhì)進(jìn)行測定,研究其對運(yùn)動細(xì)胞氧化損傷的保護(hù)作用,為猴頭菇多糖產(chǎn)品的研制提供一定的理論依據(jù)。

        1 試驗(yàn)試劑

        試驗(yàn)主要材料為猴頭菇子實(shí)體粉,提取正常采用水提法制備猴頭菇多糖樣品溶液備用。

        2 猴頭菇多糖體外抗氧化活性試驗(yàn)

        2.1 對超氧陰離子(O2-)清除能力的測定

        用 10 mmol·L-1HCl配置 30 mmol·L-1鄰苯三酚溶液0.4 mL;取pH 8的50 mmol·L-1三羥甲基氨基甲烷緩沖液5.4 mL,加入0.2 mL猴頭菇多糖樣品溶液搖勻;將兩溶液同時(shí)放入水浴鍋在(25±2)℃下靜置15 min,取出后迅速混合均勻,在320 nm處用分光光度計(jì)每隔30 s測量一次吸光度,共計(jì)時(shí)6 min,取12次吸光度的平均值作樣品組;用等量蒸餾水代替猴頭菇多糖樣品溶液,作為空白組;用10 mmol·L-1HCl溶液代替鄰苯三酚溶液,用等量蒸餾水代替猴頭菇多糖樣品溶液,作為對照組進(jìn)行對比試驗(yàn),清除率(OE,%)計(jì)算公式為:

        式中:X為樣品吸光度;X1為對照組吸光度;X0為空白組吸光度。

        2.2 對1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)清除能力的測定

        用無水乙醇為溶劑配置1 mL,0.03 mg·mL-1的DPPH·溶液,加入猴頭菇多糖樣品溶液2 mL,混合均勻后在室溫下靜置30 min,在520 nm處的測量其吸光度,作為樣品組;以2 mL蒸餾水代替猴頭菇多糖樣品溶液作為空白組;用2 mL無水乙醇混合液作為對照組進(jìn)行對比實(shí)驗(yàn),DPPH·清除率(DE,%)計(jì)算方式為:

        式中:X為樣品吸光度;X2為對照組吸光度;X0為空白組吸光度。

        2.3 對羥自由基(·OH) 清除能力的測定

        通過芬頓(Fenton) 反應(yīng)來得到·OH[4],羥自由基和水楊酸的反應(yīng)會產(chǎn)生一種有色物質(zhì),通過測量這種有色物質(zhì)的吸光度來測量·OH的清除能力。取猴頭菇多糖樣品溶液1 mL,依次加入4 mmol·L-1硫酸亞鐵液1 mL、0.01%H2O2溶液1 mL,每次加入均需混合均勻后再加入下一溶液,將最終的混合溶液放入恒溫水浴鍋,在(35±2)℃下水浴30 min。最后加入4 mmol·L-1的水楊酸溶液1 mL,混合均勻后在520 nm處測量其吸光度,作為樣品組;用1 mL蒸餾水代替1 mL水楊酸溶液,測量猴頭菇多糖樣品溶液的吸光度,作為本底組;用蒸餾水代替抗氧化劑作為空白對照組,·OH清除率(OHE,%)計(jì)算公式為:

        式中:X為樣品吸光度;X3為對照組吸光度;X0為本底吸光度。

        3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

        3.1 對超氧陰離子(O2-)清除效果

        對猴頭菇多糖樣品進(jìn)行O2-的清除效果,結(jié)果如圖1所示。

        由圖1可知,猴頭菇多糖對O2-的清除效果明顯,并隨猴頭菇多糖樣品溶液濃度升高,對O2-的清除效果越好,1 mg·mL-1濃度時(shí)對O2-的清除率可達(dá)到35.2%,當(dāng)濃度達(dá)到了10 mg·mL-1時(shí)O2-清除率可達(dá)58.5%,說明猴頭菇多糖具有較強(qiáng)的清除O2-的活性,且清除效果與多糖濃度成正比。

        3.2 對1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)清除效果

        對猴頭菇多糖樣品進(jìn)行DPPH·自由基的清除效果,結(jié)果如圖2所示。

        由圖2可知,猴頭菇多糖對DPPH·的清除效果明顯,并隨猴頭菇多糖樣品溶液濃度升高,對DPPH·的清除效果越好,1 mg·mL-1濃度時(shí)對DPPH·的清除率可達(dá)42.3%,當(dāng)濃度達(dá)到10 mg·mL-1時(shí)DPPH·清除率可達(dá)74.1%,說明猴頭菇多糖具有較強(qiáng)的清除DPPH·的活性,且清除效果與多糖濃度成正比。

        3.3 對羥自由基(·OH) 清除效果

        對猴頭菇多糖進(jìn)行·OH的清除試驗(yàn),結(jié)果如圖3所示。

        由圖3可知,猴頭菇多糖對·OH的有較高的清除率,是一種較好的·OH清除劑。并且隨著多糖的濃度升高,對·OH的清除效果越好,1 mg·mL-1的猴頭菇多糖對·OH的清除率為22.3%,10 mg·mL-1的猴頭菇多糖對·OH的清除率達(dá)55.6%,說明猴頭菇多糖也是一種較好的·OH清除劑。

        4 結(jié)論

        以猴頭菇子實(shí)體為原料,對猴頭菇子實(shí)體的體外抗氧化性進(jìn)行了研究。通過對O2-、DPPH·、·OH的清除效果試驗(yàn)表明,猴頭菇多糖具有良好的清除多種自由基的能力,且清除效果與多糖的濃度成正比關(guān)系。這說明猴頭菇多糖有良好的體外抗氧化活性,可以對運(yùn)動細(xì)胞氧化損傷直到一定的保護(hù)作用。

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