沈可欣 王亞東 王 蕓 張佳宇 諶 通 李永超

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長春 130033)

干細(xì)胞標(biāo)志物CD133、PSCA和Oct-4在胃癌組織中表達(dá)及其臨床意義

沈可欣 王亞東 王 蕓1張佳宇 諶 通 李永超

(吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院，吉林 長春 130033)

目的 探討胃癌組織中腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133、前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)和Oct-4的表達(dá)情況及其在胃癌中的診斷意義。方法 胃癌根治手術(shù)后病例60例，留取胃癌、癌旁組織及正常組織標(biāo)本，免疫組化法檢測組織中CD133、PSCA和Oct-4的表達(dá)情況。結(jié)果 與正常胃組織相比，癌旁組織組中CD133和Oct-4蛋白的表達(dá)水平略有提高(P<0.05)，胃癌組織中CD133和Oct-4蛋白的表達(dá)水平顯著增高(P<0.01)；正常胃癌組織中PSCA蛋白有明顯表達(dá)，癌旁組織中僅有少量表達(dá)，但是在胃癌組織中沒有PSCA蛋白表達(dá)。結(jié)論 腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD133、PSCA和Oct-4聯(lián)合分析可以作為胃癌的臨床診斷的分子標(biāo)記。

胃癌；CD133；PSCA；Oct-4

癌干細(xì)胞是惡性腫瘤發(fā)生的啟動細(xì)胞，其表達(dá)數(shù)量與腫瘤發(fā)生、發(fā)展、治療耐受及疾病預(yù)后密切相關(guān)。所以，探討胃癌中腫瘤干細(xì)胞的表達(dá)情況，有利于了解胃癌的發(fā)生、發(fā)展程度和提高診斷疾病和判定預(yù)后的作用。CD133抗原是鑒定和分離干細(xì)胞和祖細(xì)胞的重要分子標(biāo)記〔1〕，同時也有研究認(rèn)為其可以作為癌癥的預(yù)后指標(biāo)〔2〕。前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)可在特殊癌癥細(xì)胞中起到一定的抗癌作用，但是在前列腺癌以及上皮惡性腫瘤中其與腫瘤的進(jìn)展呈正相關(guān)，在其他組織中還沒有更好的定位〔3〕。Oct-4在胚胎干細(xì)胞和生殖細(xì)胞中高表達(dá)，也在惡性腫瘤，如精原細(xì)胞瘤、中樞系統(tǒng)生殖細(xì)胞腫瘤、卵巢無性細(xì)胞瘤和胚胎性癌中高表達(dá)〔4〕。本研究擬分析胃癌手術(shù)患者組織標(biāo)本中CD133、PSCA和Oct-4的表達(dá)及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 藥品及主要試劑 CD133蛋白抗體(美國 Abcam公司)，PSCA蛋白抗體(美國 Abcam公司)，Oct-4蛋白抗體(美國 Abcam 公司)，SP免疫組化試劑盒(Broad Spectrum，博奧森)。

1.2 標(biāo)本收集 術(shù)前和患者充分溝通，簽署知情同意書。收集中日聯(lián)誼醫(yī)院胃腸外科胃癌根治手術(shù)的臨床病例60例，留取胃癌、癌旁組織及正常組織標(biāo)本并分為三組：正常對照組、癌旁組和胃癌組。入選標(biāo)準(zhǔn)：患者術(shù)前沒有任何基礎(chǔ)疾??；沒有任何放射性以及重金屬工作史；術(shù)前沒有化療及放療史。

1.3 檢測方法 通過免疫組化(SP法)檢查胃癌組織中CD133、PSCA和OCT-4蛋白表達(dá)。每張切片在400×鏡下隨機選擇5個視野，用Motic Image Advanced 3.2圖形分析系統(tǒng)對每張免疫組化切片所有陽性細(xì)胞進(jìn)行總的灰度分析。

2 結(jié) 果

與正常胃組織相比，胃癌癌旁組中CD133和Oct-4蛋白的表達(dá)水平略有提高(P<0.05)，胃癌組織中CD133和Oct-4蛋白的表達(dá)水平顯著增高(P<0.01)，見圖1和圖2。正常胃癌組織中PSCA蛋白有明顯表達(dá)，胃癌癌旁組織中僅有少量表達(dá)，在胃癌組織中沒有PSCA蛋白表達(dá)，見圖3。

圖2 三組Oct-4蛋白的表達(dá)(DAB，×400)

圖3 三組PSCA蛋白的表達(dá)(DAB，×400)

3 討 論

現(xiàn)階段的研究認(rèn)為胃癌的發(fā)病機制與遺傳因素、吸煙、幽門螺桿菌感染及飲食相關(guān)，近些年提出了“腫瘤干細(xì)胞理論”對胃癌的研究進(jìn)展提供了新的思路，其觀點認(rèn)為在腫瘤中有一小部分具有干細(xì)胞特性的腫瘤細(xì)胞，其具有侵襲、轉(zhuǎn)移及抵抗化療的特征，其在適應(yīng)的環(huán)境中可以無限制的進(jìn)行增值和分化。經(jīng)過查閱文獻(xiàn)，我們發(fā)現(xiàn)了現(xiàn)階段對干細(xì)胞的研究主要通過分子標(biāo)記物對干細(xì)胞進(jìn)行鑒別和分離。本研究在正常組織中，CD133蛋白沒有表達(dá)，在癌旁組織中其有少量表達(dá)，而在癌組織中大量表達(dá)，說明在胃癌組織中有胃癌干細(xì)胞的表達(dá)。陳軍〔5〕的研究通過免疫熒光方法也證明了在胃癌中CD133蛋白的高表達(dá)，其研究結(jié)果與本研究一致。PSCA作為前列腺癌診斷的金指標(biāo)，近年研究發(fā)現(xiàn)其在正常的胃癌組織中有表達(dá)，本研究發(fā)現(xiàn)，在正常對照組中PSCA有表達(dá)，但是在胃癌組中其表達(dá)明顯降低，所以我們懷疑PSCA可能有抗癌作用。張文濤〔6〕對西北地區(qū)胃癌發(fā)病風(fēng)險相關(guān)性研究中通過組織芯片技術(shù)發(fā)現(xiàn)在正常的胃組織中有PSCA的表達(dá)，在胃癌組織中表達(dá)下調(diào)，這同時也說明了PSCA可能對胃癌有抗癌的作用。本研究中我們發(fā)現(xiàn)了胃癌組織中Oct-4蛋白高表達(dá)，但其在正常組織中沒有表達(dá)，這說明了胃癌組織中有胃癌干細(xì)胞的存在。陳忠〔7〕的研究中也發(fā)現(xiàn)了Oct-4蛋白在胃癌組織中高表達(dá)，同時其也通過RT-PCR方法檢測到了胃癌組織中Oct-4基因的高表達(dá)在癌旁組織低表達(dá)，所以說Oct-4表達(dá)情況與胃癌發(fā)生情況相關(guān)。

綜上，我們發(fā)現(xiàn)胃癌組織中CD133、PSCA和Oct-4蛋白表達(dá)與胃癌發(fā)病情況相關(guān)，其可能與胃癌干細(xì)胞有關(guān)系，將其聯(lián)合分析可以作為胃癌檢測和診斷的分子標(biāo)記。

1 黃 婧，何愛娜，姚 陽.CD133作為腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物的研究進(jìn)展〔J〕.癌癥進(jìn)展，2012；9(10)：462-5.

2 Zhao P，Li Y，Lu Y.Aberrant expression of CD 133 protein correlates with Ki-67 expression and is a prognostic marker in gastric adenocarcinoma〔J〕.BMC Cancer,2010;10(1):1-6.

3 Tsang YH，Lamb A，Romero-Gallo J，etal.Helicobacter pylori CagA targets gastric tumor suppressor RUNX3 for proteasome-mediated degradation〔J〕.Oncogene，2010；29：5643-50.

4 Kotoula V，Papamiehos SI，LambroPoulos AF.Revisiting OCT4 expression in peripheral blood mono-nuclear cells〔J〕.Stem Cells，2008；26：290-1.

5 陳 軍.胃癌干細(xì)胞干性特征及化療藥物對其影響的初步研究〔D〕.重慶第三軍醫(yī)大學(xué)，2013.

6 張文濤.前列腺干細(xì)胞抗原基因(PSCA)單核苷酸多態(tài)性及基因表達(dá)與胃癌發(fā)病風(fēng)險的相關(guān)性研究〔D〕.西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2014.

7 陳 忠.干細(xì)胞標(biāo)記物Oct4、Nanog和ABCG2在胃癌中的檢測及診斷意義〔D〕.蘇州：江蘇大學(xué)，2009.

〔2016-06-03修回〕

(編輯 郭 菁)

吉林省衛(wèi)生廳和財政廳聯(lián)合課題(3D5140503430)

李永超(1975-)，男，主治醫(yī)師，主要從事胃腸道腫瘤研究。

沈可欣(1983-)，男，主治醫(yī)師，主要從事胃腸道腫瘤研究。

R735.2

A

1005-9202(2017)01-0046-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.01.020

1 吉林省肝膽病醫(yī)院