于海榮 王一帆 陳建雙

(承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000)

決明子蒽醌苷對(duì)兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚及舒張功能的影響

于海榮 王一帆 陳建雙

(承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000)

目的 觀察決明子蒽醌苷對(duì)兩腎一夾高血壓大鼠心室肌肥厚及舒張功能的影響。方法 復(fù)制兩腎一夾高血壓大鼠動(dòng)物模型，隨機(jī)分為模型組、0.2、0.4 g/kg決明子蒽醌苷組及佐芬普利(0.01 g/kg)組。另取10只大鼠作為假手術(shù)組。各組大鼠灌胃給藥8 w。給藥后第57天測(cè)量大鼠頸動(dòng)脈平均壓(mCAP)、左室舒張末期壓(LVEDP)、左室壓力最大下降速率(LV-dp /dtmax)及左室質(zhì)量與脛骨長(zhǎng)度比值(LVW/TL)。制備心肌組織勻漿，放免法測(cè)定上清液中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)及內(nèi)皮素(ET)含量。結(jié)果 決明子蒽醌苷能明顯抑制兩腎一夾高血壓大鼠的左心室肥厚，改善心室舒張功能，與模型組比較，LVW/TL、LVEDP值明顯降低、LV-dp /dtmax值明顯升高(P<0.05或P<0.01)，該作用與其抑制心內(nèi)AngⅡ、ALD及ET表達(dá)有關(guān)(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論 明子蒽醌苷能抑制腎源性高血壓所致心肌肥厚，改善心室舒張功能，且其能夠有效降低心臟局部AngⅡ、ALDAET分泌有關(guān)。

決明子蒽醌苷；兩腎一夾高血壓；心肌肥厚；血管緊張素Ⅱ；醛固酮；內(nèi)皮素

高血壓會(huì)造成心、腦、腎等重要靶器官損傷，嚴(yán)重危害人類健康。評(píng)價(jià)一種抗高血壓藥物的療效，除觀察其降壓效果外還要看其是否具有靶器官保護(hù)作用。臨床一線降壓藥物作用明顯，但普遍存在部分患者不能耐受的不良反應(yīng)，目前從具有多靶點(diǎn)、多途徑、毒副作用小的傳統(tǒng)中藥中篩選新型降壓藥已成為高血壓藥物治療的研究熱點(diǎn)。決明子為豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子，其味甘、苦、咸、性微寒，具有清肝明目、潤(rùn)腸通便等功效〔1〕。蒽醌苷是決明子主要功效成分之一，含量約占1%〔2〕，決明子蒽醌苷對(duì)丙酸睪丸酮所致高血壓大鼠有明顯的降壓作用〔3〕。本文觀察決明子蒽醌苷對(duì)兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚及舒張功能的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 清潔級(jí)Wistar雄性大鼠(12周齡)，體重(200±20)g，購自天津山川紅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)SCXK(津)2010-001。

1.2 儀器與藥品 BP-6 無創(chuàng)傷血壓測(cè)量系統(tǒng)BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)；哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套； 直徑0.25 mm 無菌針灸針。決明子(安國(guó)市昌達(dá)中藥材飲片有限公司)；水合氯醛(武漢市和盛化工，批號(hào)1005412)； 注射用青霉素鈉(華北制藥股份有限公司，批號(hào) Y1001328)；佐芬普利(濟(jì)南富創(chuàng)醫(yī)藥科技有限公司)；血管緊張素(Ang)Ⅱ、醛固酮(ALD)及內(nèi)皮素(ET)試劑盒(武漢博士德生物有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 兩腎一夾高血壓大鼠模型復(fù)制及分組 Wistar大鼠80只，術(shù)前24 h禁食，自由飲水。以10%水合氯醛(3.5 ml/kg)腹腔注射麻醉，仰臥位固定，大鼠腹部脫毛，消毒皮膚，于劍突下1.5 cm處沿腹正中切開，于左腎門處游離腎動(dòng)脈，隨機(jī)取10只作為假手術(shù)組，其余70只在腎動(dòng)脈下穿入無菌絲線，把直徑為0.25 mm的針灸針與腎動(dòng)脈血管長(zhǎng)軸緊貼平行放置，用無菌絲線結(jié)扎腎動(dòng)脈和針灸針，然后抽出針灸針，造成單側(cè)腎動(dòng)脈狹窄〔4〕。術(shù)后3 d每日腹腔注射青霉素鈉預(yù)防感染，并于術(shù)后24 h禁食不禁水，此后自由進(jìn)食和飲水。術(shù)后第4周末測(cè)量大鼠尾動(dòng)脈收縮壓，達(dá)150 mmHg 以上者視為造模成功。將兩腎一夾高血壓大鼠50只，隨機(jī)分為模型組，0.2、0.4 g/kg蒽醌苷組及佐芬普利組(0.01 g/kg)，每組10只，各組大鼠1次/d連續(xù)灌胃給藥8 w，給藥容積為10 ml/kg體重，溶劑為生理鹽水。模型組與假手術(shù)組給予等體積生理鹽水。

1.3.2 測(cè)量指標(biāo) 各組大鼠用藥后第57天，稱重，腹腔注射10%水合氯醛(3.5 ml/kg)麻醉，左頸總動(dòng)脈插管經(jīng)壓力換能器連接BL-420F生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，記錄平均頸動(dòng)脈壓(mCAP)；隨即將插管送入左心室，記錄左室舒張末期壓(LVEDP)及左室壓力最大下降速率(LV-dp/dtmax)。大鼠開胸取出心臟，4℃PBS液灌洗，去除主動(dòng)脈殘留，心房及右心室游離壁，保留室間隔及左心室，用濾紙吸干水分，準(zhǔn)確稱取左室質(zhì)量(LVW)；分離大鼠左脛骨并測(cè)量長(zhǎng)度(TL)，計(jì)算左室質(zhì)量與脛骨長(zhǎng)度比值(LVW/TL)，作為左室心肌肥厚的評(píng)定指標(biāo)。取大鼠左室游離壁200 mg浸入1 L 0.5% mol/L乙酸中，100℃水浴15 min，冷卻后制成心肌組織勻漿(制備心肌組織勻漿全過程在4℃條件下進(jìn)行)，低速離心(3 000 r/min)20 min，放免法測(cè)定上清液中AngⅡ、ALD及ET含量，按試劑盒說明進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.5軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠mCAP、LVEDP、LV-dp/dtmax及LVW/TL比較 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠左室明顯增厚，LVW/TL值明顯升高；左室舒張功能減弱，LVEDP值明顯升高、LV-dp/dtmax值明顯降低(P<0.01)。決明子蒽醌苷組較模型組上述指標(biāo)變化明顯(P<0.01或P<0.05)，提示決明子蒽醌苷能明顯抑制丙腎一夾高血壓大鼠的左室肥厚，改善心室舒張功能，見表1。

組別mCAP(mmHg)LVEDP(mmHg)LV-dp/dtmax(mmHg/s)LVW/TL(g/m)AngⅡ(ng/g)ALD(pmol/g)ET(ng/g)假手術(shù)組118.25±14.582)29.98±6.512)-5624±2672)31.75±5.372)4.87±0.542)57.24±3.282)1.24±0.172)模型組165.85±16.8749.31±9.25-4454±23862.48±5.2314.87±0.8778.34±4.413.01±0.240.2g/kg蒽醌苷組151.57±12.591)41.26±8.671)-4785±3682)55.60±6.311)11.39±0.642)74.54±3.981)2.87±0.181)0.4g/kg蒽醌苷組132.44±9.872)33.48±7.542)-5139±3122)40.65±5.822)6.34±0.432)67.37±3.072)1.94±0.222)佐芬普利組120.64±11.562)32.45±7.682)-5241±3012)38.74±4.872)5.12±0.472)60.31±2.572)1.48±0.192)

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01

2.2 大鼠左室心肌組織AngⅡ、ALD及ET含量比較 模型組大鼠心肌組織AngⅡ、ALD及ET含量較假手術(shù)組明顯升高(P<0.01)，決明子蒽醌苷組上述指標(biāo)較模型組明顯減小(P<0.05或P<0.01)，提示蒽醌苷抑制兩腎一夾高血壓大鼠左室肥厚，改善心室舒張功能的作用與其抑制心內(nèi)AngⅡ、ALD及ET分泌有關(guān)，見表1。

3 討 論

高血壓導(dǎo)致心臟損傷的早期病理變化主要是心室肥厚，雖然心肌肥厚在一定程度上可以增強(qiáng)心肌收縮力，對(duì)抗壓力負(fù)荷維持心輸出量的相對(duì)穩(wěn)定，但長(zhǎng)時(shí)間、過度的心肌肥厚可誘發(fā)充血性心力衰竭，亦是缺血性心臟病、心律失常及心臟猝死的獨(dú)立危險(xiǎn)因素〔5，6〕。本文結(jié)果提示模型組大鼠發(fā)生了明顯的心肌肥厚，與文獻(xiàn)報(bào)道一致〔7〕。兩腎一夾高血壓大鼠由于腎組織缺血，腎素分泌增多，造成全身及心、腎等靶器官局部腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活，心臟局部過度分泌的Ang Ⅱ、ALD可刺激心肌細(xì)胞增生肥大，并可促進(jìn)心肌成纖維細(xì)胞分裂增殖及膠原合成，從而造成心肌及血管周圍間質(zhì)膠原沉積與纖維化，心肌舒張功能降低，最終導(dǎo)致心力衰竭〔8〕。ET除具有強(qiáng)縮血管作用外，還是強(qiáng)有絲分裂素，可促進(jìn)心肌細(xì)胞肥大增生，導(dǎo)致心肌肥厚，肥厚心肌鈣內(nèi)流與攝取減慢，再加上ET所致心肌缺血缺氧易致心肌舒縮功能障礙〔9〕。決明子蒽醌苷組LVW/TL、LVEDP較模型組大鼠明顯降低，LV-dp/dtmax較模型組明顯升高，證明決明子蒽醌苷灌胃治療能明顯抑制腎源性高血壓所致心肌肥厚，改善心室舒張功能，且該作用與其有效降低心臟局部Ang Ⅱ、ALD及ET分泌有關(guān)。

1 高艷青，劉 俊.決明子的藥理作用及其研究進(jìn)展〔J〕.中國(guó)藥業(yè)，2008;17(8)：63-4.

2 劉 斌，鞏鴻霞，肖學(xué)鳳，等.決明子化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展〔J〕.藥物評(píng)價(jià)研究，2010;33(4)：312-5.

3 李續(xù)娥，郭寶江，曾 志.決明子蛋白質(zhì)、低聚糖及蒽醌苷降壓作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中草藥，2003;34(9)：842-5.

4 戴 勇，彭武建，徐卓佳.兩腎一夾腎性高血壓大鼠模型的改進(jìn)〔J〕.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理，2006;23(2)：60-2.

5 劉軍翔，宋冬林，張方寧，等.復(fù)合離子鹽對(duì)兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚和纖維化的影響及其作用機(jī)制的初步探討〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2011;15(2)：214-7.

6 Varagic Jasmina，F(xiàn)rohlich Edward D.Local cardiacrenin-angiotensin system：hypertension and cardiac failure〔J〕.J Mol Cell Cardiol，2002;34 (11)：1435-42.

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8 徐厚謙，田 豐，顏春魯，等.當(dāng)歸補(bǔ)血湯對(duì)心衰大鼠血漿醛固酮、內(nèi)皮素的影響〔J〕.中醫(yī)研究，2010;23(5)：22-4.

9 劉軍翔，宋冬林，張方寧，等.復(fù)合離子鹽對(duì)兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚和纖維化的影響及其作用機(jī)制的初步探討〔J〕.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2011;15(2)：214-7.

〔2013-08-10修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢(mèng)園)

河北省高等學(xué)?？茖W(xué)技術(shù)研究青年基金項(xiàng)目(No.C2011149)

陳建雙(1978-)，女，碩士，副教授，主要從事中藥藥理學(xué)研究。

于海榮(1971-)，女，碩士，副教授，主要從事中藥抗高血壓研究。

R541.4

A

1005-9202(2017)01-0034-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.01.014