于海榮 王一帆 陳建雙

(承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000)

決明子蒽醌苷對兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚及舒張功能的影響

于海榮 王一帆 陳建雙

(承德醫(yī)學(xué)院，河北 承德 067000)

目的 觀察決明子蒽醌苷對兩腎一夾高血壓大鼠心室肌肥厚及舒張功能的影響。方法 復(fù)制兩腎一夾高血壓大鼠動物模型，隨機分為模型組、0.2、0.4 g/kg決明子蒽醌苷組及佐芬普利(0.01 g/kg)組。另取10只大鼠作為假手術(shù)組。各組大鼠灌胃給藥8 w。給藥后第57天測量大鼠頸動脈平均壓(mCAP)、左室舒張末期壓(LVEDP)、左室壓力最大下降速率(LV-dp /dtmax)及左室質(zhì)量與脛骨長度比值(LVW/TL)。制備心肌組織勻漿，放免法測定上清液中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)及內(nèi)皮素(ET)含量。結(jié)果 決明子蒽醌苷能明顯抑制兩腎一夾高血壓大鼠的左心室肥厚，改善心室舒張功能，與模型組比較，LVW/TL、LVEDP值明顯降低、LV-dp /dtmax值明顯升高(P<0.05或P<0.01)，該作用與其抑制心內(nèi)AngⅡ、ALD及ET表達有關(guān)(P<0.05或P<0.01)。結(jié)論 明子蒽醌苷能抑制腎源性高血壓所致心肌肥厚，改善心室舒張功能，且其能夠有效降低心臟局部AngⅡ、ALDAET分泌有關(guān)。

決明子蒽醌苷；兩腎一夾高血壓；心肌肥厚；血管緊張素Ⅱ；醛固酮；內(nèi)皮素

高血壓會造成心、腦、腎等重要靶器官損傷，嚴重危害人類健康。評價一種抗高血壓藥物的療效，除觀察其降壓效果外還要看其是否具有靶器官保護作用。臨床一線降壓藥物作用明顯，但普遍存在部分患者不能耐受的不良反應(yīng)，目前從具有多靶點、多途徑、毒副作用小的傳統(tǒng)中藥中篩選新型降壓藥已成為高血壓藥物治療的研究熱點。決明子為豆科植物決明或小決明的干燥成熟種子，其味甘、苦、咸、性微寒，具有清肝明目、潤腸通便等功效〔1〕。蒽醌苷是決明子主要功效成分之一，含量約占1%〔2〕，決明子蒽醌苷對丙酸睪丸酮所致高血壓大鼠有明顯的降壓作用〔3〕。本文觀察決明子蒽醌苷對兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚及舒張功能的影響。

1 材料與方法

1.1 動物 清潔級Wistar雄性大鼠(12周齡)，體重(200±20)g，購自天津山川紅實驗動物中心提供，合格證號SCXK(津)2010-001。

1.2 儀器與藥品 BP-6 無創(chuàng)傷血壓測量系統(tǒng)BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司)；哺乳動物手術(shù)器械一套； 直徑0.25 mm 無菌針灸針。決明子(安國市昌達中藥材飲片有限公司)；水合氯醛(武漢市和盛化工，批號1005412)； 注射用青霉素鈉(華北制藥股份有限公司，批號 Y1001328)；佐芬普利(濟南富創(chuàng)醫(yī)藥科技有限公司)；血管緊張素(Ang)Ⅱ、醛固酮(ALD)及內(nèi)皮素(ET)試劑盒(武漢博士德生物有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 兩腎一夾高血壓大鼠模型復(fù)制及分組 Wistar大鼠80只，術(shù)前24 h禁食，自由飲水。以10%水合氯醛(3.5 ml/kg)腹腔注射麻醉，仰臥位固定，大鼠腹部脫毛，消毒皮膚，于劍突下1.5 cm處沿腹正中切開，于左腎門處游離腎動脈，隨機取10只作為假手術(shù)組，其余70只在腎動脈下穿入無菌絲線，把直徑為0.25 mm的針灸針與腎動脈血管長軸緊貼平行放置，用無菌絲線結(jié)扎腎動脈和針灸針，然后抽出針灸針，造成單側(cè)腎動脈狹窄〔4〕。術(shù)后3 d每日腹腔注射青霉素鈉預(yù)防感染，并于術(shù)后24 h禁食不禁水，此后自由進食和飲水。術(shù)后第4周末測量大鼠尾動脈收縮壓，達150 mmHg 以上者視為造模成功。將兩腎一夾高血壓大鼠50只，隨機分為模型組，0.2、0.4 g/kg蒽醌苷組及佐芬普利組(0.01 g/kg)，每組10只，各組大鼠1次/d連續(xù)灌胃給藥8 w，給藥容積為10 ml/kg體重，溶劑為生理鹽水。模型組與假手術(shù)組給予等體積生理鹽水。

1.3.2 測量指標 各組大鼠用藥后第57天，稱重，腹腔注射10%水合氯醛(3.5 ml/kg)麻醉，左頸總動脈插管經(jīng)壓力換能器連接BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)，記錄平均頸動脈壓(mCAP)；隨即將插管送入左心室，記錄左室舒張末期壓(LVEDP)及左室壓力最大下降速率(LV-dp/dtmax)。大鼠開胸取出心臟，4℃PBS液灌洗，去除主動脈殘留，心房及右心室游離壁，保留室間隔及左心室，用濾紙吸干水分，準確稱取左室質(zhì)量(LVW)；分離大鼠左脛骨并測量長度(TL)，計算左室質(zhì)量與脛骨長度比值(LVW/TL)，作為左室心肌肥厚的評定指標。取大鼠左室游離壁200 mg浸入1 L 0.5% mol/L乙酸中，100℃水浴15 min，冷卻后制成心肌組織勻漿(制備心肌組織勻漿全過程在4℃條件下進行)，低速離心(3 000 r/min)20 min，放免法測定上清液中AngⅡ、ALD及ET含量，按試劑盒說明進行操作。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.5軟件進行單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1 大鼠mCAP、LVEDP、LV-dp/dtmax及LVW/TL比較 與假手術(shù)組比較，模型組大鼠左室明顯增厚，LVW/TL值明顯升高；左室舒張功能減弱，LVEDP值明顯升高、LV-dp/dtmax值明顯降低(P<0.01)。決明子蒽醌苷組較模型組上述指標變化明顯(P<0.01或P<0.05)，提示決明子蒽醌苷能明顯抑制丙腎一夾高血壓大鼠的左室肥厚，改善心室舒張功能，見表1。

組別mCAP(mmHg)LVEDP(mmHg)LV-dp/dtmax(mmHg/s)LVW/TL(g/m)AngⅡ(ng/g)ALD(pmol/g)ET(ng/g)假手術(shù)組118.25±14.582)29.98±6.512)-5624±2672)31.75±5.372)4.87±0.542)57.24±3.282)1.24±0.172)模型組165.85±16.8749.31±9.25-4454±23862.48±5.2314.87±0.8778.34±4.413.01±0.240.2g/kg蒽醌苷組151.57±12.591)41.26±8.671)-4785±3682)55.60±6.311)11.39±0.642)74.54±3.981)2.87±0.181)0.4g/kg蒽醌苷組132.44±9.872)33.48±7.542)-5139±3122)40.65±5.822)6.34±0.432)67.37±3.072)1.94±0.222)佐芬普利組120.64±11.562)32.45±7.682)-5241±3012)38.74±4.872)5.12±0.472)60.31±2.572)1.48±0.192)

與模型組比較：1)P<0.05，2)P<0.01

2.2 大鼠左室心肌組織AngⅡ、ALD及ET含量比較 模型組大鼠心肌組織AngⅡ、ALD及ET含量較假手術(shù)組明顯升高(P<0.01)，決明子蒽醌苷組上述指標較模型組明顯減小(P<0.05或P<0.01)，提示蒽醌苷抑制兩腎一夾高血壓大鼠左室肥厚，改善心室舒張功能的作用與其抑制心內(nèi)AngⅡ、ALD及ET分泌有關(guān)，見表1。

3 討 論

高血壓導(dǎo)致心臟損傷的早期病理變化主要是心室肥厚，雖然心肌肥厚在一定程度上可以增強心肌收縮力，對抗壓力負荷維持心輸出量的相對穩(wěn)定，但長時間、過度的心肌肥厚可誘發(fā)充血性心力衰竭，亦是缺血性心臟病、心律失常及心臟猝死的獨立危險因素〔5，6〕。本文結(jié)果提示模型組大鼠發(fā)生了明顯的心肌肥厚，與文獻報道一致〔7〕。兩腎一夾高血壓大鼠由于腎組織缺血，腎素分泌增多，造成全身及心、腎等靶器官局部腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活，心臟局部過度分泌的Ang Ⅱ、ALD可刺激心肌細胞增生肥大，并可促進心肌成纖維細胞分裂增殖及膠原合成，從而造成心肌及血管周圍間質(zhì)膠原沉積與纖維化，心肌舒張功能降低，最終導(dǎo)致心力衰竭〔8〕。ET除具有強縮血管作用外，還是強有絲分裂素，可促進心肌細胞肥大增生，導(dǎo)致心肌肥厚，肥厚心肌鈣內(nèi)流與攝取減慢，再加上ET所致心肌缺血缺氧易致心肌舒縮功能障礙〔9〕。決明子蒽醌苷組LVW/TL、LVEDP較模型組大鼠明顯降低，LV-dp/dtmax較模型組明顯升高，證明決明子蒽醌苷灌胃治療能明顯抑制腎源性高血壓所致心肌肥厚，改善心室舒張功能，且該作用與其有效降低心臟局部Ang Ⅱ、ALD及ET分泌有關(guān)。

1 高艷青，劉 俊.決明子的藥理作用及其研究進展〔J〕.中國藥業(yè)，2008;17(8)：63-4.

2 劉 斌，鞏鴻霞，肖學(xué)鳳，等.決明子化學(xué)成分及藥理作用研究進展〔J〕.藥物評價研究，2010;33(4)：312-5.

3 李續(xù)娥，郭寶江，曾 志.決明子蛋白質(zhì)、低聚糖及蒽醌苷降壓作用的實驗研究〔J〕.中草藥，2003;34(9)：842-5.

4 戴 勇，彭武建，徐卓佳.兩腎一夾腎性高血壓大鼠模型的改進〔J〕.實驗動物科學(xué)與管理，2006;23(2)：60-2.

5 劉軍翔，宋冬林，張方寧，等.復(fù)合離子鹽對兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚和纖維化的影響及其作用機制的初步探討〔J〕.中國實驗診斷學(xué)，2011;15(2)：214-7.

6 Varagic Jasmina，F(xiàn)rohlich Edward D.Local cardiacrenin-angiotensin system：hypertension and cardiac failure〔J〕.J Mol Cell Cardiol，2002;34 (11)：1435-42.

7 于小紅，盛紅專，吳曉暉.培多普利逆轉(zhuǎn)腎血管性高血壓大鼠心肌肥厚及對心功能的影響〔J〕.中國血液流變學(xué)雜志，2005;15(4)：548-57.

8 徐厚謙，田 豐，顏春魯，等.當歸補血湯對心衰大鼠血漿醛固酮、內(nèi)皮素的影響〔J〕.中醫(yī)研究，2010;23(5)：22-4.

9 劉軍翔，宋冬林，張方寧，等.復(fù)合離子鹽對兩腎一夾高血壓大鼠左室心肌肥厚和纖維化的影響及其作用機制的初步探討〔J〕.中國實驗診斷學(xué)，2011;15(2)：214-7.

〔2013-08-10修回〕

(編輯 苑云杰/曹夢園)

河北省高等學(xué)校科學(xué)技術(shù)研究青年基金項目(No.C2011149)

陳建雙(1978-)，女，碩士，副教授，主要從事中藥藥理學(xué)研究。

于海榮(1971-)，女，碩士，副教授，主要從事中藥抗高血壓研究。

R541.4

A

1005-9202(2017)01-0034-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.01.014