謝曉燕

長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，吉林長春 130021

丹參為唇形科植物丹參的干燥根及根莖，主要化學(xué)成分為水溶性酚酸和酯溶性二萜醌，藥理作用為活血通經(jīng)、祛瘀止痛、清心除煩。丹參素是丹參中含量較多的水溶性酚酸類化合物，具有改善冠脈循、抗血小板凝集、抗感染、拮抗鈣等功效，廣泛應(yīng)用于心、腦、肝等疾病的活血化瘀治療[1-3]。丹參注射液是臨床常用丹參藥物，主要成分為為鄰苯二羥基類化合物丹參素，丹酚酸A、B、C，迷迭香酸，原兒茶醛、原兒茶酸、四甲基丹酚酸等。其中丹參素常作為預(yù)測(cè)、評(píng)價(jià)丹參注射液穩(wěn)定性的參考指標(biāo)。有研究發(fā)現(xiàn)丹酚酸A、B、C和迷迭香酸在加溫條件下可發(fā)生酯鍵水解生成丹參素進(jìn)而對(duì)丹參素含量測(cè)定造成干擾。臨床實(shí)習(xí)教學(xué)工作是培養(yǎng)優(yōu)秀的醫(yī)務(wù)人才的重要步驟，該文選擇2016年8月—2017年8月來該院實(shí)習(xí)的實(shí)習(xí)生14名作為研究對(duì)象，參與加溫加速條件下丹參注射液中含量測(cè)定對(duì)照教學(xué)，效果良好，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取來該醫(yī)院實(shí)習(xí)的實(shí)習(xí)生14名作為研究對(duì)象，將其隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組7名。試驗(yàn)組：女性 4 名，男性 3 名，年齡 20～22 歲，平均（21.0±1.1）歲；對(duì)照組：女性3名，男性4名，年齡19～22歲，平均年齡（21.5±1.4）歲。兩組實(shí)習(xí)生在年齡、性別、專業(yè)基礎(chǔ)等基礎(chǔ)資料方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑

高效液相色譜儀（山東金普分析儀器有限公司）、超級(jí)恒溫水浴箱(重慶)、電子天平、TGL216G高速臺(tái)式離心機(jī)(上海安亭科儀器廠)、DVW210紫外檢測(cè)器、Hypersil2ODS2色譜柱(4.6 mm×150 mm ，5 μm)；丹參注射液(自制，規(guī)格2 mL/支)；丹參素鈉對(duì)照品(含測(cè)用)；其余試劑均為分析純。

1.3 方法

對(duì)照組學(xué)生采用傳統(tǒng)的教學(xué)模式進(jìn)行教學(xué)，由帶教老師按照臨床實(shí)習(xí)教學(xué)大綱進(jìn)行丹參素含量測(cè)定相關(guān)理論知識(shí)的講授，并定期對(duì)學(xué)生進(jìn)行考核，并聽取學(xué)生和領(lǐng)導(dǎo)的教學(xué)反饋。試驗(yàn)組實(shí)習(xí)生參與帶教老師的藥品含量測(cè)定對(duì)照研究教學(xué)。①供試品的制備知識(shí)：丹參素對(duì)照品溶液的制備，稱取150 mg丹參素鈉對(duì)照品，溶于100 mL容量瓶，加水定容至刻度，搖勻灌封于2 mL安瓿中；丹參注射液，該實(shí)驗(yàn)室擬定工藝制備的1 g/mL丹參藥材(規(guī)格2 mL/支)的注射液。②丹參素含量測(cè)定：采用HPLC進(jìn)行丹參素含量測(cè)定，以甲醇0.2 mol/L醋酸銨(12∶88，H2SO4調(diào)節(jié) pH=2.2)為流動(dòng)相于280 nm下檢測(cè)③恒溫加速試驗(yàn)：取供試樣品分別置于80、85、90、95℃的恒溫水浴(溫差±1℃)內(nèi)加熱。不同時(shí)間間隔定時(shí)取樣，每次2支，迅速冰水浴冷卻，混勻，依法測(cè)定含量。實(shí)習(xí)結(jié)束后，對(duì)兩組實(shí)習(xí)生進(jìn)行考核，考核內(nèi)容包括理論知識(shí)治療方法及對(duì)教學(xué)滿意度等情況。

1.4 觀察指標(biāo)及判定標(biāo)準(zhǔn)

①丹參素含量變化。②實(shí)習(xí)生的考核成績比較[4-7]。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

比較兩組數(shù)據(jù)用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析，計(jì)數(shù)資料采用百分比（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 丹參素對(duì)照品、丹參注射液加溫加速實(shí)驗(yàn)含量測(cè)定結(jié)果

2 結(jié)果

2.1 兩組測(cè)定丹參素含量變化

該研究中丹參素含量在加溫加速條件下含量變化見表1。在試驗(yàn)各溫度下，試驗(yàn)組丹參素含量隨加速時(shí)間的延長而增加，且溫度愈高，加速時(shí)間愈長，含量增加愈多。

2.2 兩組實(shí)習(xí)生考核成績比較

試驗(yàn)組考核成績明顯好于對(duì)照組，試驗(yàn)組最高分為96分，最低分80分；對(duì)照組最高分83分，最低分76分，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.67，P=0.002），見表 2。

表2 兩組實(shí)習(xí)生考核平均成績比較[（±s），分]

表2 兩組實(shí)習(xí)生考核平均成績比較[（±s），分]

組別平均分對(duì)照組（n=7）試驗(yàn)組（n=7）t值 P值75.06±5.45 88.21±5.13 1.67 0.002

3 討論

丹參為唇形科植物丹參的干燥根及根莖，主要化學(xué)成分為水溶性酚酸和酯溶性二萜醌，具有活血通經(jīng)、祛瘀止痛、清心除煩的藥理作用。丹參制劑是臨床常用的于心、腦、肝等疾病的活血化瘀治療，其內(nèi)含有的丹參素，是一種水溶性酚酸類化合物，具有明顯的改善冠脈循、抗血小板凝集、抗感染、拮抗鈣等功效。但是，丹參制劑容易受外界條件影響發(fā)生降解或者制劑中其他成分在加溫加速條件下其他物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)生成丹參素，進(jìn)而影響藥物制劑中丹參素的含量。測(cè)定丹參素的含量是臨床評(píng)價(jià)預(yù)測(cè)丹參制劑質(zhì)量及穩(wěn)定性的重要參考指標(biāo)。

在該研究中，試驗(yàn)組丹參素含量隨加速時(shí)間的延長而增加，且溫度愈高，加速時(shí)間愈長，含量增加愈多。分析其原因可能為加溫加速條件下丹參注射液中含有的丹酚酸A，B，C及迷迭香酸等酚酸類化合物易發(fā)生酯鍵水解生成丹參素，從而使注射液中丹參素測(cè)定含量增加，此外，也要注意到加溫加速條件下丹參素為酚酸類化合物，含鄰苯二羥基，在水溶液中易解離形成氧負(fù)離子自動(dòng)氧化而生成有色醌類物質(zhì)，丹參素也會(huì)發(fā)生降解，故實(shí)際生成的丹參素含量會(huì)比測(cè)定值更高。故而在臨床評(píng)估預(yù)測(cè)丹參制劑穩(wěn)定性中，要綜合考慮溫度、時(shí)間的影響。丹參制劑教學(xué)方面，相較于對(duì)照組傳統(tǒng)教學(xué)模式，試驗(yàn)組的教學(xué)方法更加深入、具體、全面，實(shí)習(xí)生對(duì)于丹參素含量測(cè)定相關(guān)理論知識(shí)掌握更充分、全面，對(duì)測(cè)試方法、注意事項(xiàng)、原理機(jī)制的理解也更具象，自主學(xué)習(xí)能力也有很大提升。該研究中試驗(yàn)組平均成績?yōu)椋?8.21±5.13）分，對(duì)照組平均成績?yōu)椋?5.06±5.45）分，實(shí)驗(yàn)組成績明顯優(yōu)于對(duì)照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

綜上所述，加溫加速條件，丹參制劑中丹參素含量增加，且溫度愈高，時(shí)間愈長，含量愈多，在預(yù)測(cè)、評(píng)價(jià)丹參制劑的穩(wěn)定性時(shí)要綜合考慮溫度時(shí)間的影響。在臨床教學(xué)中，指導(dǎo)實(shí)習(xí)生積極參與藥物含量測(cè)定的對(duì)照研究中，實(shí)習(xí)生對(duì)于藥物基本知識(shí)、藥理作用機(jī)制、藥物間相互影響等相關(guān)理論的掌握更系統(tǒng)全面，臨床操作技能明顯提升，值得廣泛推廣應(yīng)用。

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