□ 都麗莉 鞍山市食品藥品檢驗(yàn)所（食品化驗(yàn)室）

氣相色譜法測(cè)食品中的甜蜜素新舊國(guó)標(biāo)方法的比對(duì)

□ 都麗莉 鞍山市食品藥品檢驗(yàn)所（食品化驗(yàn)室）

食品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉（又名甜蜜素）被提取后和亞硝酸鈉在酸性條件下反應(yīng)，生成環(huán)己醇和環(huán)己醇亞硝酸脂，利用氣相色譜法進(jìn)行定性和定量分析，是一種較成熟的分析方法。新的國(guó)標(biāo)方法GB5009．97-2016對(duì)比舊國(guó)標(biāo)GB5009．97-2003進(jìn)行了大量改進(jìn)，本文對(duì)比分析這兩種國(guó)標(biāo)方法，討論新方法的優(yōu)點(diǎn)，希望對(duì)從事食品檢驗(yàn)工作的人員有所幫助。

甜蜜素；氣相色譜法；國(guó)標(biāo)方法

甜蜜素是食品加工中一種較為常見(jiàn)的水溶性人工甜味劑，其專業(yè)名稱為“環(huán)已基氨基磺酸鈉”，甜度為蔗糖的30倍，口感好，價(jià)格低廉，在食品行業(yè)中廣泛應(yīng)用[1]。研究表明，過(guò)量食用添加甜蜜素超標(biāo)的食品會(huì)對(duì)人體的肝臟及神經(jīng)系統(tǒng)造成危害，《GB2760-2014食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中對(duì)甜蜜素的使用量有著嚴(yán)格規(guī)定，但在實(shí)際應(yīng)用中，甜蜜素過(guò)量使用的情況時(shí)有發(fā)生。因此，采取科學(xué)方法準(zhǔn)確測(cè)定食品中的甜蜜素至關(guān)重要。本文通過(guò)對(duì)比新舊國(guó)標(biāo)方法的區(qū)別，分析新國(guó)標(biāo)方法的先進(jìn)性和科學(xué)性。

1 實(shí)驗(yàn)原理

環(huán)己基氨基磺酸鈉具有良好的水溶性，用水將樣品中的環(huán)己基氨基磺酸鈉進(jìn)行提取，在硫酸介質(zhì)中環(huán)己基氨基磺酸鈉與亞硝酸反應(yīng)，生成環(huán)己醇和環(huán)己醇亞硝酸脂，利用氣相色譜氫火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行分離及分析，保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

2 前處理方法的改進(jìn)分析

2.1 藥品的改變及增加

2.1.1 正己烷改為正庚烷

衍生化反應(yīng)生成環(huán)己醇和環(huán)己醇亞硝酸脂，利用有機(jī)溶劑將二者提取，舊國(guó)標(biāo)GB5009.97-2003中使用有機(jī)溶劑正己烷作為介質(zhì)，GC溶劑峰會(huì)出現(xiàn)較大拖尾現(xiàn)象，影響了檢出效率。新國(guó)標(biāo)GB5009.97-2016[2]改為正庚烷避免了拖尾現(xiàn)象，大大提高了檢出效率。

2.1.2 增加了石油醚、亞鐵氰化鉀、硫酸鋅的使用

對(duì)于樣品的前處理，目的就是盡量提高回收率，舊國(guó)標(biāo)試驗(yàn)中只將樣品分為固體樣品和液體樣品兩類，沒(méi)用明確列出固液混合、半固體、高脂肪、高蛋白樣品，尤其是高蛋白，高脂肪樣品回收率不高。新國(guó)標(biāo)方法將樣品分類更加細(xì)化，提取方法更科學(xué)，更完善。

對(duì)于高蛋白高脂肪樣品，按照舊方法處理過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量氣泡，乳化現(xiàn)象嚴(yán)重，樣品與有機(jī)溶劑無(wú)法分層，提取不充分，新方法中針對(duì)高蛋白樣品加入硫酸鋅使蛋白質(zhì)脫水沉淀，用水洗滌殘?jiān)占癁V液備用；高脂肪樣品利用相似相溶的原理使用石油醚將脂肪溶解兩次，棄石油醚，再加入硫酸鋅沉淀，用水洗滌殘?jiān)?，收集濾液，整個(gè)過(guò)程都在衍生化之前，分層現(xiàn)象明顯，大大提高了提取效率。

2.2 色譜條件的改變

舊國(guó)標(biāo)中使用填充柱進(jìn)行分離，填充柱的樣品負(fù)荷量大，可用于制備色譜，其缺點(diǎn)是柱滲透性較小，傳質(zhì)阻力較大，柱子不能過(guò)長(zhǎng)，所以分離效率較低。新國(guó)標(biāo)中改用內(nèi)徑為0.53 mm的毛細(xì)管柱，不僅擁有大的柱容量，而且效率更高，更適用于痕量分析。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液系列的制備及衍生化

舊國(guó)標(biāo)配制濃度為10 mg/mL的環(huán)己基氨基磺酸鈉溶液，吸取1 mL進(jìn)行衍生化，用10 mL正己烷提取，提取液進(jìn)樣1～5 μL于氣相色譜，濃度相當(dāng)于1、2、3、4 mg/mL和5 mg/mL，根據(jù)響應(yīng)值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。新國(guó)標(biāo)直接制備了濃度為0.01、0.02、0.05、0.10、0.20 mg/mL和0.50 mg/mL，臨時(shí)儲(chǔ)備液進(jìn)行衍生化，最終濃度為0.02、0.04、0.1、0.2、0.4 mg/mL和1 mg/mL，每種濃度獨(dú)立衍生化，提取1 μL于氣相色譜，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?？梢钥闯?，舊國(guó)標(biāo)方法選取的濃度較大，往往超過(guò)樣品中所含甜蜜素濃度的數(shù)倍，而新國(guó)標(biāo)濃度較小，濃度點(diǎn)更多，基本涵蓋了樣品中所含甜蜜素的濃度，選取更科學(xué)合理。

3 結(jié)語(yǔ)

新國(guó)標(biāo)對(duì)比舊國(guó)標(biāo)無(wú)論是從前處理方式、衍生化，還是標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，都有了更科學(xué)合理的改進(jìn)，提高了回收率，降低了檢出限，是目前比較完善的甜蜜素檢測(cè)方法。

[1]顧建華，何鵬 ．高脂固體食品中甜蜜素含量的毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定方法研究[J]．中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009(8)：1809-1811．

[2]中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)．GB/T5009．97-2016食品中環(huán)己基氨基磺酸鈉的測(cè)定[S]．北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2017．