□ 趙旭峰 衡水市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

食品中甜蜜素提取方法改進(jìn)及測(cè)定

□ 趙旭峰 衡水市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心

現(xiàn)階段，用于測(cè)定食品中甜蜜素的主要方法為國(guó)標(biāo)法GB/T5009．97-2003，該方法在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中存在一定的不足，對(duì)其進(jìn)行一定的改進(jìn)和優(yōu)化迫在眉睫。改進(jìn)測(cè)定方法仍舊以國(guó)標(biāo)食品中甜蜜素測(cè)定法為基礎(chǔ)，但是使用毛細(xì)管柱代替了不銹鋼填充柱，提高了升溫條件。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定顯示，改進(jìn)后的國(guó)標(biāo)方法測(cè)定所得到的甜蜜素峰形尖銳，且色譜峰與溶劑峰和雜質(zhì)峰之間的分離效果提高。所以，這種以國(guó)標(biāo)方法為基礎(chǔ)的改進(jìn)食品中甜蜜素提取方法具有一定的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。

甜蜜素；食品甜味劑；毛細(xì)管柱

作為一種人工合成的食品甜味劑——甜蜜素屬于非營(yíng)養(yǎng)型添加劑，其為白色結(jié)晶或者是白色晶體粉末狀態(tài)，與水之間有較好的互溶性。現(xiàn)階段，甜蜜素作為我國(guó)食品行業(yè)中應(yīng)用最為廣泛的一種甜味劑，其甜度約是蔗糖的30～50倍，所以在蜜餞、飲料等食品中被廣泛應(yīng)用[1]。一旦甜蜜素用量超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)，就會(huì)帶來(lái)一定的食品安全問(wèn)題。對(duì)于人體來(lái)說(shuō)，長(zhǎng)期食用過(guò)量的甜蜜素，不僅會(huì)增加肝臟的負(fù)擔(dān)，也會(huì)對(duì)腎臟有一定的副作用，具有一定的致癌性[2]。因此，我國(guó)對(duì)甜蜜素的使用食品范圍以及用量標(biāo)準(zhǔn)等都進(jìn)行了嚴(yán)格規(guī)定。

1 材料與方法

為了提高測(cè)定效果、應(yīng)用方法靈敏性、重現(xiàn)性以及測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，本文對(duì)第一法氣相色譜法進(jìn)行了一定的改進(jìn)，同時(shí)對(duì)儀器的使用條件以及制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法進(jìn)行了一定的優(yōu)化處理，建立了毛細(xì)管氣相色譜法。

1.1 材料

1.1.1 主要試劑和原料

正己烷、氯化鈉、50 g/L亞硝酸鈉溶液（準(zhǔn)確稱取25 g亞硝酸鈉，用水稀釋至500 mL）、100 g/L硫酸溶液（準(zhǔn)確稱取50 g硫酸，并將其緩慢加入到400 mL的水中，之后加水至500 mL定容。甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.500 0 g甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)品，其中標(biāo)準(zhǔn)品中甜蜜素含量超過(guò)98%，加水稀釋并定容至50 mL，通過(guò)計(jì)算所得標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度大小為10.0 mg/mL，配置完成后將其放置在1～4 ℃冰箱中保存使用。

1.1.2 主要儀器

本次試驗(yàn)中使用的主要儀器分別是6890N氣相色譜儀、IKA-T18BS高速均質(zhì)器、離心機(jī)等。

1.2 方法

1.2.1 樣品處理

用移液管準(zhǔn)確移取10.0 mg/mL的甜蜜素標(biāo)準(zhǔn)使用溶液0.1、0.20、0.50、1.00 mL和2.00 mL置于100 mL的帶塞比色管內(nèi)，并加水20.00 mL，放置于冰水浴中，加入5.00 mL的50 g/L亞硝酸鈉溶液，5.00 mL的100 g/L的硫酸溶液，搖均勻，放置在冰浴上30 min，不定期搖晃，之后再加入10.00 mL的正己烷，并搖勻。將5.00 g氯化鈉加入其中，并放置在 渦混合器上振動(dòng)約1 min，之后靜置30 min。量取上述各濃度標(biāo)準(zhǔn)上清液1 μL注入氣相色譜儀中，進(jìn)行甜蜜素含量-峰面積標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.2.2 色譜參考條件

本次試驗(yàn)測(cè)定中色譜柱采用的是DB-1型毛細(xì)管柱，規(guī)格為30 m×0.53 mm×1.50 μm，升溫程序控制參數(shù)設(shè)定為60 ℃，時(shí)間為12 min，進(jìn)樣口溫度為200 ℃，進(jìn)樣容積為1 μL，采用的是不分流進(jìn)樣方式。另外，檢測(cè)器采用的是氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），溫度參數(shù)設(shè)定為250 ℃，以高純氮?dú)鉃檩d氣，流量設(shè)定值為8.0 mL/min，其中氫氣流量為40 mL/min，空氣流量設(shè)定為350 mL/min。

2 結(jié)果與分析

2.1 色譜條件改進(jìn)及優(yōu)化分析

填充柱分析是原標(biāo)準(zhǔn)氣相色譜所使用的主要方法，且該方法在實(shí)際應(yīng)用中存在和溶劑峰干擾強(qiáng)烈、分離效果低、準(zhǔn)確性差以及靈敏度低等情況，同時(shí)在含雜質(zhì)基質(zhì)樣品中的應(yīng)用效果較差。另外，對(duì)含量低的樣品也無(wú)法完成測(cè)定試驗(yàn)。而本文研究中使用DB-1型毛細(xì)管柱取代了傳統(tǒng)的不銹鋼填充柱，究其原因是毛細(xì)管柱在應(yīng)用過(guò)程中具有理論塔板數(shù)高、分析效率高等特點(diǎn)。而本次試驗(yàn)結(jié)果顯示，DB-1型毛細(xì)管柱使用所得出的甜蜜素峰形尖銳，溶劑拖尾現(xiàn)象降低、分離速度快，靈敏性高，同時(shí)對(duì)甜蜜素與雜質(zhì)用填充柱存在分離難的問(wèn)題進(jìn)行了一定的改善。試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果顯示，出峰時(shí)間在6.3～6.6 min，標(biāo)準(zhǔn)峰與溶劑峰、雜質(zhì)峰的分離效果好，回收率和精密度都比較高，符合食品中甜蜜素檢測(cè)分析的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.2 實(shí)際樣品測(cè)定分析

為了進(jìn)一步驗(yàn)證改進(jìn)方法應(yīng)用的優(yōu)勢(shì)，本次試驗(yàn)研究過(guò)程中從市場(chǎng)中購(gòu)買(mǎi)了100份樣品，樣品主要包括飲料、糕點(diǎn)以及葡萄酒等，試驗(yàn)中使用毛細(xì)管柱氣相色譜測(cè)定方法測(cè)定100份試驗(yàn)樣品，其中結(jié)果顯示：30份陽(yáng)性樣品，在飲料中的甜蜜素檢出率最高。從這一數(shù)據(jù)中可以看出，改進(jìn)方法的應(yīng)用符合現(xiàn)階段我國(guó)食品中甜蜜素分析的標(biāo)準(zhǔn)要求。

3 結(jié)語(yǔ)

本文改進(jìn)方法以國(guó)標(biāo)第一法氣相色譜法為基礎(chǔ)，使用毛細(xì)管柱取代了不銹鋼填充柱，對(duì)升溫條件進(jìn)行了一定的優(yōu)化，同時(shí)對(duì)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法也進(jìn)行了一定的改進(jìn)。最終結(jié)果顯示，改進(jìn)方法測(cè)定所得甜蜜素具有峰形尖銳、分離效果好、平均標(biāo)回回收率高、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小等優(yōu)點(diǎn)，其與國(guó)標(biāo)測(cè)定方法的應(yīng)用相比，改進(jìn)方法的準(zhǔn)確度更高，精密度好，定量值準(zhǔn)確，操作更合乎規(guī)范，完全符合現(xiàn)階段我國(guó)有關(guān)甜蜜素分析的標(biāo)準(zhǔn)要求。另外，改進(jìn)方法所需的時(shí)間更短，靈敏度高，整個(gè)操作過(guò)程也比較簡(jiǎn)便，這就在一定程度上降低了由人為操作所引起的測(cè)定錯(cuò)誤現(xiàn)象。

[1]許士明．食品醬 菜中甜蜜素的氣相色譜法檢測(cè)條件的優(yōu)化[J]．中國(guó)食品添加劑，2016(6)：187-189．

[2]李秀英．優(yōu)化高效液相色譜法和氣相色譜法測(cè)定食品中甜蜜素的對(duì)比研究[J]．廣東化工，2016(14)：235-236．