周濤

摘 要：近年來，食品安全事故不斷，相關人員深入研究食品檢測技術，其主要目的是提高食品安全性。本文通過分析在食品安全檢測中如何應用的各種生物技術，以便為食品安全的檢測提供參考。

關鍵詞：生物技術；食品檢測；應用

中圖分類號：TS207.3 文獻標識碼：A

1.FTA-PCR的技術

FTAR 卡屬于特制的棉纖維卡片， 主要通過螯合劑與強力的變性劑共同浸泡，其纖維基質中包含化學物質，一旦FTAR捕捉細胞，石炭酸、EDTA以及SDS會自動地把細胞裂解，而聚丙烯酰胺會結合核酸，確保樣品中的DNA具有穩(wěn)定性，同時確保核酸不會受到紫外線、核酸以及氧化劑破壞，還有利于其他微生物以及細菌生長。該種方式不僅可以直接提取DNA，而且所提取的DNA能夠于室溫下保存，給PCR檢測創(chuàng)造了條件。在食品檢測中，采用FTA-PCR方法，有著明顯優(yōu)勢。Robert使用FTA卡來提取流感病毒RNA，聯(lián)合PCR的技術檢測流感病毒。李偉昊使用FTA卡與PCR方式相結合，提取以及檢測鮮肉中的沙門氏菌，從雞肉、豬肉、羊肉與牛肉勻漿液中實際檢出限大約70CFU/mL，能夠在六小時以內結束肉中的沙門氏菌檢測，現階段主要使用先增菌PCR的檢測方法可以節(jié)省時間12～24小時，和GB/T 4789.4-2003的方式比起來，用這種方式檢測，所用時間與檢出率效果都比較好[1]。

2.環(huán)介導的等溫擴增術（LAMP）

環(huán)介導的等溫擴增術屬于恒溫核酸的擴增方式，主要是針對基因四種特異的引物以及六個區(qū)域的設計，在常規(guī)水浴的條件下，即在65℃條件下一個小時，就能夠結束核酸擴增反應；和普通PCR比起來，無需紫外觀察、模板熱變性以及溫度循環(huán)等過程。完成擴增以后，可以按照管內的沉淀情況對結果進行評估。由于這種技術操作比較便利以及靈敏度比較高，所以廣泛應用于食品檢測中。聞偉剛[2]使用RT-LAMP技術構建了具有特異、快速以及靈敏特征的菜豆莢中斑駁病毒檢驗方式，用這種方式檢測的靈敏度比病毒的稀釋液高出3～10倍，與常規(guī)RT-PCR 檢測方式相比，靈敏度提高1000多倍。徐芊采用LAMP技術檢測水產品副溶血弧菌，只需一個小時就可以結束檢測，并且檢測限高達89CFU/g，與常規(guī)PCR的檢測方式相比，縮短將近1/2的時間。易海華研發(fā)出志賀菌LAMP檢測方式，在一個小時以內可以結束檢測，每微升檢測限高達200拷貝。LAMP 是恒溫擴增的反應之一，可以縮短普通PCR的反應升降溫耗具體時間，并且能夠通過肉眼看到檢測結果，通常在0.5～1小時內結束反應過程，所以在食品檢測中有著明顯優(yōu)勢。然而由于LAMP的方式對實驗技術者與實驗環(huán)境方面有著較高要求，未達到相關要求時容易出現假陽性問題，還需要深入研究，不斷地對這種檢測技術進行完善。

3.核酸探針技術

核酸探針能夠促進單鏈核酸的配對，然后構成雙鏈，通過標記物對信號進行釋放，進而實現檢測的目的。在核酸樣品的基因序列檢測中用核酸探針檢測，由于病原體具備特異性核酸序列的片段，通過標記技術與分離手段，可以把特定片段研制為核酸探針，并用在病原體的檢測以及疾病診斷中。在病原微生物中應用核酸探針，可以鑒別高相似度基因的寄生蟲與毒株。Malic通過核酸探針的原味雜交方式，檢測與檢定球狀、銅綠假單細胞、金黃色葡萄球菌與鏈球細菌屬，經檢測得知銅綠假單胞菌侵染比較明顯，可以用于多項指標檢測。Almeida使用核酸探針原位雜交方式檢測奶粉中阪崎腸桿菌，該方式特異性高達百分之百，即便存在其他混合菌類，檢出限仍達到1CFU/10g。Almeida應用同種方式拓展樣品檢測的范圍，檢測了糞便、血液與供應水中沙門氏菌，其檢出限達到1 CFU/10g（mL），實際檢測時間在20小時以內，與常規(guī)PCR檢測方式相比，其靈敏度大大提高。曲海娜使用核酸探針方式檢測動物毛皮中耐β-內酰胺病原菌，其檢出限為529pgDNA，與傳統(tǒng)的藥敏實驗相比采用這種檢測方式可以降低檢測成本，將檢測周期縮短，提高食品檢測效果。鄒金峰研發(fā)出鴨圓環(huán)病毒核酸探針技術，同時用于檢測中，最低檢出量約5pgDNA，和常規(guī)PCR技術比起來，采用這種方式可以規(guī)避假陰性、假陽性發(fā)生的可能[3]。

4.基質分子的印跡技術

基質分子的印跡技術主要是應用分子印記的方式，把包含分子大小、形狀識別空洞膜印記到載體或是基質上，也就是把分子與載體印記到聚合物單體上。如2-乙烯基以及甲基的丙烯酸等，建立檢測靶與分子之間的鏈接鏈，使用電聚合、自組裝以及分子聚合和模板分子構成相應的配合物，然后添加交聯(lián)劑。例如，添加多元醇與有機二元酸交聯(lián)劑，然后在載體上構成膜，再把模板的分子包裹于膜中，然后將膜內的模板分子清除，將模板分子特異性的印記留下。因為所形成印記構造和模板分子之間互補，也就是只有印記和需檢測、分離分子形狀匹配時，這種分子才可以占據印跡的空洞。而且因為印跡三維結構中的一維屬于傳導載體，所以可以把該分子識別的過程快速、直接轉變?yōu)榭勺R別信號。而開始基質分子的印記技術主要用于醫(yī)學臨床檢驗如肌紅蛋白檢測中，目前逐漸應用于抗生素的檢測中。Wang研制出分子的印跡技術膠質晶體類模版，能夠對蜂蜜與牛奶樣品中的金霉素、四環(huán)素、土霉素殘留進行檢測，其檢出限為0.04～0.24μmol/L。Shi把甲礬霉素作為模板，構建了層析法分子印跡的固相萃取方式，可以對河蟹中的殘留氟苯尼考胺、氯霉素、氟苯尼考與甲礬霉素進行檢測，其檢出限分別為0.03μg/kg、0.02μg/kg，0.10μg/kg、0.09μg/kg，在一天以內能夠結束全部檢測。分子的印跡技術的檢測限和色譜技術比較相似，但是其檢測的成本比色譜技術低，用該技術檢測產品時，既可以用在食品檢測中，還可以用在食品現場的自檢中，檢測范圍主要包含殺蟲劑、真菌毒素以及細菌檢測等。

5.免疫層析技術

免疫層析技術是當前興起的診斷與鑒別技術，原理是某抗原特異性的抗體容易被熒光微粒、金粒子標記，容易吸附于固相載體點樣的區(qū)域，并且同一種抗原的另一種特異性抗體會固定于固相載體另一端，一旦液體樣品浸入點樣的區(qū)域以后，已標記樣品以及特異性的抗體容易在毛細血管的作用下沿固相的載體超前移動；如果樣品之中存在待檢的抗原，待檢的抗原就會和已標記特異性的抗體結合，構成相應的復合物，復合物移至特異性的抗體區(qū)域時，抗原部分容易破壞此處特異性的抗體。

6.生物的傳感器

生物的傳感器主要是通過固定化生物活性的物質，例如生物膜、酶、DNA、蛋白質與微生物等，作為理化換能器以及敏感原件。換能器主要包括壓電晶體、氧電極、場效應管以及光敏管，同時還可以構成分析檢測的裝置，而待測的物質經過擴散作用以后，會進入分子中，對元件進行識別，在識別的作用下，和分子識別的元件進行結合，從而產生生物、化學反應。

總而言之，生物技術具有高效、經濟科學的特點，在檢測食品的過程中，應用生物檢測技術，能夠提升檢測的精度以及提高檢測的速度，是現階段食品檢測領域的新型技術，因此，食品檢測領域需要全面了解生物檢測技術，盡可能從食品的檢測細節(jié)與工作著手，在食品檢測中應用各種先進檢測技術，以確保食品檢測的安全性。

參考文獻：

[1]姜思遠，郭明英，吳艷玲.生物技術在食品生產加工與檢測中的應用[J].內蒙古石油化工，2014，21（22）.

[2]於筱嵐，徐 寧，何 勇.近紅外分析技術在食品氨基酸檢測中應用的研究進展[J].光譜學與光譜分析，2014，15（9）：415-416.

[3]李詩源.食品檢測領域生物技術的應用實踐及意義探尋[J].食品安全導刊，2015，24（30）.