劉興華 劉鵬

450000河南省鄭州市第三人民醫(yī)院病理科

用1%冰醋酸去除血性胸腹水中紅細(xì)胞的方法

劉興華 劉鵬

450000河南省鄭州市第三人民醫(yī)院病理科

目的：尋找一種既能有效去除血性胸腹水中紅細(xì)胞，又能很好地保留腫瘤細(xì)胞的方法。方法：取血性胸腹水100 mL分別倒入50 mL的錐形離心管中2 000 r/min離心10 min，分A、B兩管，分別用95%酒精、1%的冰醋酸處理，觀察背景及染色情況。結(jié)果：B組細(xì)胞涂片背景干凈，腫瘤細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰。結(jié)論：用1%冰醋酸處理后的血性胸腹水標(biāo)本制片效果最佳。

血性胸腹水；紅細(xì)胞；腫瘤細(xì)胞

在病理科的日常工作中，胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)的檢測已成為病理診斷的常規(guī)手段，但因多數(shù)胸腹水中含有大量的紅細(xì)胞，易掩蓋腫瘤細(xì)胞，給病理醫(yī)生診斷帶來了很大的困擾?，F(xiàn)我們采用1%冰醋酸去除紅細(xì)胞的方法，應(yīng)用于工作中，取得了較滿意的效果，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

2013年1月-2016年9月選擇血性胸腹水標(biāo)本89例，男53例，女36例，年齡34～80歲，平均57歲。惡性胸腹水59例，炎性胸腹水30例，其中肺癌引起的胸水32例，乳腺癌引起的16例，子宮內(nèi)膜癌引起的11例。

方法：將送檢的血性胸腹水標(biāo)本充分混勻，取100 mL分別倒入50 mL的錐形離心管中，2 000 r/min離心10 min，用吸管棄去上清液后分為A、B兩管。其中先吸取A管少量沉淀物行液基薄層細(xì)胞學(xué)制片，后行HE染色。將剩余部分加同等量的95%酒精固定30 min(易形成凝塊，以利于包埋)，棄去95%酒精，加10%中性甲醛固定4 h后，用擦鏡紙包裹，常規(guī)脫水，透明，浸蠟，包埋，切片，行HE或免疫組化染色。另一管為B管，取0.45%的低滲生理鹽水加至50 mL，再加1%冰醋酸0.5 mL，在旋渦混合器上充分震蕩混勻，靜置5 min，2 000 r/min離心10 min，棄去上清液。再加0.45%的低滲生理鹽水至50 mL，2 000 r/min離心10 min，棄去上清液，先取少量沉淀物行薄層細(xì)胞學(xué)制片，后行HE染色。將剩余部分加10%中性甲醛固定4 h后，用擦鏡紙包裹，常規(guī)脫水，透明，浸蠟，包埋，切片，行HE或免疫組化染色。

結(jié)果

A組HE染色后，因紅細(xì)胞未去除，導(dǎo)致切片厚，細(xì)胞重疊，因遮擋視線而影響診斷。免疫組化染色后因紅細(xì)胞干擾，導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)非特異性染色。

B組HE染色后，切片背景清晰，細(xì)胞形態(tài)完整，核漿對比分明，色彩鮮艷。免疫組化后標(biāo)記蛋白定位準(zhǔn)確，對比度好，背景干凈，染色陽性。

討論

造成血性胸腹水的原因有很多，一般為惡性腫瘤。因其存在大量紅細(xì)胞，造成涂片模糊不清，染色效果不佳，涂片背景較混雜，甚至涂片在染色水洗中脫片。胸腹水細(xì)胞學(xué)檢查的陽性檢出率受多種因素的影響，特異性與敏感性并不理想。為了有效地提高胸腹水細(xì)胞學(xué)檢查的陽性檢出率，降低漏診誤診率，本實(shí)驗(yàn)對影響胸腹水細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果的主要影響因素進(jìn)行研究。有文獻(xiàn)報(bào)道用50%乙醇、淋巴細(xì)胞分離液和鹽酸等去除胸、腹水中的紅細(xì)胞，取得了一定的效果[1]。本方法的優(yōu)點(diǎn)是：1%的冰醋酸增加了紅細(xì)胞膜的脆性，使其在0.45%的低滲生理鹽水中快速膨脹裂解，裂解物可隨上清液被棄去，而間皮細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等結(jié)構(gòu)完整、不變形，核質(zhì)分明，核仁清晰[2]，從而提高了癌細(xì)胞的檢出率，對細(xì)胞學(xué)診斷具有較高的實(shí)用價值。另外，該方法簡便，較穩(wěn)定，易保存，值得臨床普遍推廣。

[1]潘獻(xiàn)柱,潘獻(xiàn)曉,陳命家.氯化銨去紅細(xì)胞法在血性胸腹水脫落細(xì)胞學(xué)診斷中應(yīng)用[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2013,29(6):695.

[2]陳廣峰,鐘緯經(jīng),梁浩和.血性胸腹水紅細(xì)胞的簡易去除法[J].診斷病理學(xué)雜志,2014,21 (3):3.

Method for removing red blood cells from bloody pleural effusion and ascites by 1%glacial acetic acid

Liu Xinghua,Liu Peng
Department of Pathology,the Third People's Hospital of Zhengzhou City,Henan Province 450000

Objective:To find a method that can effectively remove the red blood cells from bloody pleural effusion and ascites,and can well retain the tumor cells.Methods:100 mL bloody pleural effusion and ascites were poured into the conical tube of 50 mL respectively.They were centrifuged 10 minutes by 2 000 r/min,and they were divided into A tube and B tube.They were treated by 95%alcohol and 1%glacial acetic acid respectively.We observed the background and staining.Results:In the B group,the background of cell smear was clean and the structure of the tumor cells was clear.Conclusion:The effect of smear of bloody pleural effusion and ascites after treated with 1%glacial acetic acid was the best.

Bloody pleural effusion and ascites;Red blood cells;Tumor cell

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.6.60