汪小紅 武書庚 崔耀明 齊廣海 王 晶 張海軍

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，生物飼料開發(fā)國(guó)家工程研究中心，北京100081)

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茶多酚對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和抗氧化能力的影響

汪小紅 武書庚*崔耀明 齊廣海 王 晶 張海軍

(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，農(nóng)業(yè)部飼料生物技術(shù)重點(diǎn)開放實(shí)驗(yàn)室，生物飼料開發(fā)國(guó)家工程研究中心，北京100081)

本試驗(yàn)旨在研究茶多酚(TP)對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和抗氧化能力的影響。試驗(yàn)選用450只24周齡的健康海蘭灰產(chǎn)蛋雞，分為5個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加40、80、200和400 mg/kg TP。試驗(yàn)期63 d，其中預(yù)試期7 d、正試期56 d。結(jié)果表明，與對(duì)照組相比：1)400 mg/kg TP顯著降低了試驗(yàn)期前4周的平均蛋重(P<0.05)；200 mg/kg TP顯著改善試驗(yàn)期后4周的料蛋比(P<0.05)；TP未顯著影響產(chǎn)蛋率和平均日采食量(P>0.05)。2)飼糧中添加TP未顯著影響蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度、哈夫單位和蛋黃顏色(P>0.05)。3)TP顯著提高了血漿總超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性(P<0.05)；顯著提高試驗(yàn)期第8周時(shí)血漿總抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05)。4)TP顯著提高了肝臟和蛋黃T-AOC和T-SOD活性(P<0.05)；顯著降低肝臟和蛋黃中丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。由此可見，飼糧中添加TP未顯著影響蛋雞蛋品質(zhì)；400 mg/kg TP降低了平均蛋重，200 mg/kg TP改善了料蛋比，兩者均提高了蛋雞的抗氧化能力，其中以200 mg/kg組效果最佳。

茶多酚；蛋雞；生產(chǎn)性能；蛋品質(zhì)；抗氧化能力

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

TP由無錫太陽綠寶科技有限公司提供(純度≥80%，批次號(hào)：505083)。采用《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測(cè)方法》(GB/T 8313—2008)檢測(cè)，TP含量為66.73%，兒茶素為37.25%。試驗(yàn)飼糧中TP以此實(shí)測(cè)結(jié)果為依據(jù)添加，逐級(jí)混合到配合飼料中。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物與飼糧

試驗(yàn)選用450只24周齡的健康海蘭灰產(chǎn)蛋雞，采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)，將試驗(yàn)雞分為5個(gè)組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15只雞。試驗(yàn)包括預(yù)試期7 d、正試期56 d。在基礎(chǔ)飼糧(表2)中分別添加0、40、80、200和400 mg/kg的TP構(gòu)成試驗(yàn)飼糧。

1.3 飼養(yǎng)管理

采用半開放式雞舍3層立體籠養(yǎng)，自然光照加人工補(bǔ)光，光照時(shí)間16 h/d、光照強(qiáng)度16 lx，相對(duì)濕度50%～90%，自然通風(fēng)結(jié)合縱向負(fù)壓通風(fēng)。飼喂干粉料，自由采食和飲水，每天布料、勻料、撿蛋、清糞各2次，每周消毒1次。常規(guī)防疫和管理。

1.4 指標(biāo)測(cè)定與方法

1.4.1 樣品采集與制備

正試期，每天按重復(fù)記錄產(chǎn)蛋數(shù)、稱蛋重，計(jì)算平均蛋重和產(chǎn)蛋率。每2周以重復(fù)為單位計(jì)算平均日采食量和料蛋比。分別于正試期的第2、4、6和8周末，每重復(fù)采4枚蛋，測(cè)定蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度、哈夫單位、蛋黃顏色和蛋形指數(shù)。

于正試期的第4和8周末，每組隨機(jī)選取體重相近的蛋雞，空腹無菌翅靜脈采血，3 000 r/min離心10 min制備血漿，-20 ℃保存，待測(cè)血漿抗氧化指標(biāo)。8周末，每組隨機(jī)選取體重相近的蛋雞，屠宰，摘取肝臟，液氮保存待用。

組織勻漿的制備：將肝臟用生理鹽水沖洗，除去血液，濾紙吸干，稱取約0.5 g，加9倍生理鹽水，剪碎，置勻漿機(jī)中制成10%的組織勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清液，-20 ℃保存待測(cè)，備檢肝組織抗氧化指標(biāo)。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供Premix provided the following per kg of diet：VA 12 500 IU，VD34 125 IU，VE 15 IU，VK 2 mg，硫胺素 thiamine 1 mg，核黃素 riboflavin 8.5 mg，泛酸鈣 calcium pantothenate 50 mg，煙酸 nicotinic acid 32.5 mg，吡哆醇 pyridoxine 8 mg，VB 125 mg，生物素 biotin 2 mg，膽堿 choline 0.92 mg，F(xiàn)e 60 mg，Cu 8 mg，Zn 66 mg，Mn 65 mg，Se 0.3 mg，I 1 mg。

2)營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。Nutrient levels were calculated values.

1.4.2 測(cè)定方法

蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度、哈夫單位和蛋黃顏色采用以色列ORKA公司生產(chǎn)的系列雞蛋品質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定；蛋形指數(shù)采用日本富士坪公司生產(chǎn)的蛋形指數(shù)測(cè)定儀測(cè)定，蛋黃和蛋殼重量采用萬分之一天平測(cè)定；總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性采用黃嘌呤氧化酶法測(cè)定；MDA含量采用硫代巴比妥酸(TBA)法測(cè)定；GPx活性和總抗氧化能力(T-AOC)采用比色法測(cè)定。所用試劑盒均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0單因素方差分析(one-way ANOVA)程序進(jìn)行方差分析，采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較。TP添加水平的線性和二次線性效應(yīng)采用正交多項(xiàng)式進(jìn)行分析。以P<0.05為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 TP對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，飼糧中添加TP未顯著影響產(chǎn)蛋率和平均日采食量(P>0.05)。平均日采食量在試驗(yàn)后期(4～8周)和試驗(yàn)全期(1～8周)隨TP添加水平升高呈二次曲線變化(P<0.05)。與對(duì)照組相比，飼糧中添加TP對(duì)平均蛋重和料蛋比影響較為明顯。試驗(yàn)前期(1～4周)，隨著TP添加水平的升高，平均蛋重線性降低(P<0.05)，400 mg/kg組平均蛋重顯著低于對(duì)照組和40 mg/kg組(P<0.05)；各組平均蛋重在試驗(yàn)后期及全期無顯著差異(P>0.05)，但平均蛋重在試驗(yàn)后期隨TP添加水平升高呈二次曲線趨勢(shì)變化(P<0.05)。試驗(yàn)前期，各組料蛋比無顯著變化(P>0.05)；試驗(yàn)后期，料蛋比隨TP添加水平升高呈二次曲線變化(P<0.05)，其中200 mg/kg組料蛋比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，其他TP組與對(duì)照組無顯著差異(P>0.05)。整個(gè)試驗(yàn)期，料蛋比隨TP添加水平升高先降低后升高，200 mg/kg組料蛋比最佳。

表2 TP對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩注不同字母表示差異顯著(P<0.05)，相同字母或者無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different letter superscripts mean significant differences (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant differences (P>0.05). The same as below.

2.2 TP對(duì)蛋品質(zhì)的影響

由表3可知，第2、4、6、8周時(shí)，與對(duì)照組相比，TP對(duì)蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度、蛋白高度、哈夫單位和蛋黃顏色的影響均不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)第8周時(shí)，蛋殼強(qiáng)度隨TP添加水平升高呈線性降低(P<0.05)。

2.3 TP對(duì)蛋雞抗氧化能力的影響

2.3.1 TP對(duì)血漿抗氧化指標(biāo)的影響

由表4可知，與對(duì)照組相比，TP組血漿MDA含量均降低(P>0.05)，且第4和8周末，均以200 mg/kg組最低，但與其他組差異不顯著(P>0.05)。與對(duì)照組相比，TP可顯著提高血漿T-SOD活性(P<0.05)；第4周末，400 mg/kg組血漿T-SOD活性最高，與各TP組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；第8周末，血漿T-SOD活性隨TP添加水平升高呈線性和二次曲線變化(P<0.05)，且線性變化更為顯著(P<0.01)，其中以200 mg/kg組最高，除與400 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)外，均顯著高于其他組(P<0.05)。第4周末，與對(duì)照組相比，各TP組血漿T-AOC隨TP添加水平升高而提高，但差異不顯著(P>0.05)；第8周末，各TP組血漿T-AOC隨TP添加水平升高呈線性升高(P<0.05)，其中以200 mg/kg組最高，除與80和400 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)外，顯著高于其他組(P<0.05)。第4周末，各TP組血漿GPx活性均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；各TP組血漿GPx活性隨TP添加水平升高線性升高(P<0.05)，以400 mg/kg組最高，顯著高于其他組(P<0.05)；第8周，各TP組血漿GPx活性隨TP添加量升高呈二次曲線變化(P<0.05)，以200 mg/kg組最高，顯著高于其他組(P<0.05)。

表3 TP對(duì)蛋品質(zhì)的影響

2.3.2 TP對(duì)肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

由表5可知，與對(duì)照組相比，TP顯著降低了肝臟MDA含量(P<0.05)，其中200 mg/kg組最低，與400 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)，顯著低于其他組(P<0.05)；TP顯著提高了肝臟T-SOD活性(P<0.05)，其中200 mg/kg組最高，且顯著高于其他組(P<0.05)，80和400 mg/kg組顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，但2組間差異不顯著(P>0.05)；肝臟MDA含量和T-SOD活性隨TP添加水平升高呈線性和二次曲線變化(P<0.05)，且線性變化更為顯著(P<0.01)；200 mg/kg組肝臟T-AOC最高，與80和400 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于其他組(P<0.05)。

表4 TP對(duì)蛋雞血漿抗氧化指標(biāo)的影響

表5 TP對(duì)蛋雞肝臟抗氧化指標(biāo)的影響

2.3.3 TP對(duì)蛋黃抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，與對(duì)照組相比，各TP組蛋黃MDA含量均顯著降低(P<0.05)，其中400 mg/kg組最低，與80和200 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)；蛋黃T-SOD活性以400 mg/kg組最高，與80和200 mg/kg組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于其他組(P<0.05)；蛋黃MDA含量和T-SOD活性隨TP添加水平升高呈線性變化(P<0.05)；各TP組蛋黃T-AOC顯著提高(P<0.05)，以200 mg/kg組最高，與其他TP組差異不顯著(P>0.05)。

表6 TP對(duì)蛋黃抗氧化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 TP對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，TP影響平均蛋重和料蛋比，未影響產(chǎn)蛋率和平均日采食量。本試驗(yàn)中，400 mg/kg TP降低了試驗(yàn)前期的平均蛋重，與相關(guān)報(bào)道相近，如飼糧中添加0.67%茶葉提取物，略微降低平均蛋重[7]；1%綠茶粉可提高蛋重，而5%和10%綠茶粉顯著降低了蛋重[8]。

料蛋比是蛋雞生產(chǎn)上的重要指標(biāo)之一。本試驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，200 mg/kg TP組對(duì)蛋雞試驗(yàn)前期料蛋比無顯著影響，但顯著降低了試驗(yàn)后期料蛋比，表明TP對(duì)降低料蛋比可能具有時(shí)間累積效應(yīng)[9]。試驗(yàn)后期，400 mg/kg TP組料蛋比有升高趨勢(shì)，表明較高劑量TP不利于蛋雞生產(chǎn)。何柳青等[10]研究表明，200和400 mg/kg TP能顯著降低料蛋比，100 mg/kg TP時(shí)蛋雞生產(chǎn)性能最佳。飼糧中添加100 mg/kg TP料蛋比低于對(duì)照組，而150～200 mg/kg TP有降低產(chǎn)蛋率和升高料蛋比的趨勢(shì)[5]，以上結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果不相一致，可能因不同的TP樣品，其實(shí)際含有的TP水平與宣稱值不相一致，致實(shí)際飼糧TP劑量存在偏差(試驗(yàn)前期，已采購(gòu)多種TP產(chǎn)品，進(jìn)行TP及兒茶素含量測(cè)，實(shí)測(cè)值均與宣稱值差異較大)。上述結(jié)果均提示，適宜TP水平有改善飼料效率的作用，較高TP影響飼料效率，降低了平均蛋重，可能的原因有：TP中含有的酚酸、咖啡堿及縮合單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子，破壞或阻礙蛋雞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收；或兒茶素抑制了腸道對(duì)脂肪的吸收和脂肪合酶活性，蛋黃脂質(zhì)形成受阻[7-8]，進(jìn)而影響蛋重；多酚及其在腸道中代謝物能促進(jìn)有益菌、抑制有害菌，選擇性地調(diào)節(jié)腸道易感微生物的生長(zhǎng)[11]，從而保證胃腸道微生物菌群健康，有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收與利用，改善飼料效率。高劑量TP影響生產(chǎn)性能，除與其含有抗?fàn)I養(yǎng)因子等因素有關(guān)外，還可能由于TP屬于黃酮類物質(zhì)，具有植物雌激素活性，少量促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，過量可作為雌激素拮抗劑，影響動(dòng)物生產(chǎn)性能[12]。

3.2 TP對(duì)蛋品質(zhì)的影響

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，TP未見顯著影響蛋品質(zhì)。有報(bào)道認(rèn)為飼糧中添加0.5%綠茶提取物和1.5%綠茶粉對(duì)蛋品質(zhì)無顯著影響[13]；也有報(bào)道指出，5%和10%綠茶粉組蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度和哈氏單位有降低的趨勢(shì)，且10%組蛋殼厚度顯著低于未添加組[8]；改善蛋品質(zhì)報(bào)道指出，3%綠茶葉或0.15 L/kg綠茶提取物顯著升高蛋殼厚度，蛋黃顏色隨添加量升高而升高[14]；0.6%綠茶粉可顯著提高雞蛋貯存期開始、第5和10天的蛋白高度和哈氏單位[15]。以上研究結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果不盡相同，可能與TP樣品組成不同有關(guān)。

3.3 TP對(duì)蛋雞抗氧化能力的影響

TP可提高蛋雞正常或應(yīng)激狀態(tài)下機(jī)體的抗氧化能力，隨著TP劑量增加，機(jī)體的抗氧化能力隨之提高，但當(dāng)TP超過一定劑量時(shí)，機(jī)體抗氧化能力不再升高，甚至?xí)陆怠１驹囼?yàn)第8周時(shí)，200 mg/kg組血漿GPx活性顯著高于400 mg/kg組以及其他試驗(yàn)組。前人研究表明，蛋雞飼糧中添加橙皮素或柚皮素(類黃酮多酚物質(zhì))，血漿中SOD、CAT和GPx等抗氧化酶活性均在2%組最高，4%組下降[21]，提示TP或黃酮類物質(zhì)與機(jī)體抗氧化水平存在最佳劑量效應(yīng)，高劑量可影響機(jī)體抗氧化，酚類分子供H+或作為還原劑時(shí)，其分子本身也是較穩(wěn)定的自由基，多酚與過渡金屬離子的互作可使促氧化劑的產(chǎn)生，當(dāng)體內(nèi)酚類的氧化中間產(chǎn)物或氧化終產(chǎn)物(如半醌或醌類)濃度較高時(shí)，可作為促氧化劑損害機(jī)體健康[22-23]。

本試驗(yàn)第8周時(shí)血漿和肝臟中的T-SOD活性均以200 mg/kg TP組最高，蛋黃中T-SOD以400 mg/kg組最高；血漿和肝臟中MDA含量均以200 mg/kg組最低，蛋黃中MDA含量則以400 mg/kg組最低。可見，TP對(duì)蛋雞血漿、肝臟和蛋黃抗氧化能力的改善效果不同。研究表明，大鼠連續(xù)口服0.6%茶多酚第28天，在食道、大腸、腎、膀胱和肺等器官中檢出表沒食子兒茶素(EGC)和表兒茶素(EC)，而其在肝、脾、心和甲狀腺中含量較低，提示TP在體內(nèi)代謝分布存在不均衡性[9]，這與本試驗(yàn)結(jié)果相一致。這可能是由于胃腸道中經(jīng)過解聚或解離作用后的TP及其微生物代謝產(chǎn)物相繼進(jìn)行肝臟Ⅰ相與Ⅱ相代謝，后被血液循環(huán)系統(tǒng)運(yùn)輸?shù)礁鹘M織器官以發(fā)揮生物學(xué)作用或經(jīng)尿液排出體外[25]。代謝路徑中，多酚及其代謝產(chǎn)物會(huì)因構(gòu)象不斷改變導(dǎo)致酚羥基數(shù)量及活性不斷降低，使TP在不同器官部位的抗氧化活性不同[26]。綜上，200、400 mg/kg TP組可顯著提高蛋雞機(jī)體抗氧化能力。

4 結(jié) 論

① 飼糧添加400 mg/kg TP降低雞蛋平均蛋重，200 mg/kg TP改善料蛋比；200和400 mg/kg TP可顯著提高蛋雞的抗氧化能力，但兩者抗氧化效果無顯著差異。飼糧中添加TP未顯著影響雞蛋品質(zhì)。

② 本試驗(yàn)條件下，添加200 mg/kg TP對(duì)蛋雞生產(chǎn)性能及機(jī)體抗氧化效果最佳。

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*Corresponding author, professor, E-mail: wushugeng@caas.cn

(責(zé)任編輯 田艷明)

Effects of Dietary Tea Polyphenols on Performance, Egg Quality and Antioxidant Ability of Laying Hens

WANG Xiaohong WU Shugeng*CUI Yaoming QI Guanghai WANG Jing ZHANG Haijun

(NationalEngineeringResearchCenterofBiologicalFeed,KeyLaboratoryofFeedBiotechnologyofMinistryofAgriculture,FeedResearchInstitute,ChineseAcademyofAgriculturalScience,Beijing100081,China)

The experiment was conducted to study the effects of dietary tea polyphenols (TP) on performance, egg quality and antioxidant ability of laying hens. Four hundred and fifty healthy Hy-Line Gray laying hens of 24-week-old were randomly allotted to 5 groups with 6 replicates per group and 15 hens per replicate. The laying hens in the control group were fed a basal diet, and those in experimental groups were fed the basal diets supplemented with 40, 80, 200 and 400 mg/kg TP, respectively. The experiment lasted for 63 days followed an adaptation period of 7 days. The results showed as follows, compared with the control group: 1) adding 400 mg/kg TP significantly decreased the average egg weight during the first 4 weeks (P<0.05); adding 200 mg/kg TP significantly decreased the ratio of feed to egg (F/E) during the second 4 weeks (P<0.05); there were no significant differences on egg production and average daily feed intake (P>0.05). 2) Dietary supplementation of TP did not significantly affect the egg shape index, eggshell thickness, albumen height, Haugh unit and yolk color (P>0.05). 3) The activities of total superoxide dismutase (T-SOD) and glutathione peroxidase (GPx) in plasma were significantly increased (P<0.05), and the total antioxidant capacity (T-AOC) in plasma was significantly increased at the end of 8 weeks of this experiment (P<0.05) by TP supplementation. 4) The T-AOC and T-SOD activity both in liver and yolk were significantly increased (P<0.05), and the malondialdehyde (MDA) content in liver and yolk was significantly decreased (P<0.05) by TP supplementation. In conclusion, dietary supplementation of TP do not significantly affect egg quality, but 400 mg/kg TP can decrease the average egg weight and 200 mg/kg can improve F/E in some content. Both TP supplemental levels above can improve the antioxidant ability of laying hens, and 200 mg/kg is the optimum supplemental level.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(1)：193-201]

tea polyphenols; laying hens; performance; egg quality; antioxidant ability

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.01.022

2016-06-30

家禽產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系北京市創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)(CARS-PSTP)；國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2011BAD26B03)；現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-41-K13)

汪小紅(1990—)，女，江西上饒人，碩士研究生，從事蛋品質(zhì)營(yíng)養(yǎng)調(diào)控研究。E-mail: w_xh_1992@163.com

*通信作者：武書庚，研究員，碩士生導(dǎo)師，E-mail: wushugeng@caas.cn

S816.7

A

1006-267X(2017)01-0193-09