蔣天盛 李春來 袁洪濤

(貴陽市第一人民醫(yī)院， 貴州 貴陽 550001)

氣腹預(yù)處理對大鼠血液流變學(xué)的影響

蔣天盛△李春來 袁洪濤

(貴陽市第一人民醫(yī)院， 貴州 貴陽 550001)

目的 探討氣腹預(yù)處理對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響。 方法 選取健康SD大鼠30只，分為假氣腹組、氣腹組和氣腹預(yù)處理組，每組各10只。氣腹組大鼠臍旁插入氣腹針并連接SN/REF氣腹機充入CO2建立氣腹模型，腹壓保持在15 mmHg，持續(xù)90 min后解除氣腹；氣腹預(yù)處理組在建立氣腹前先進行預(yù)處理(充氣5 min，放氣5 min，重復(fù)2次)，其余同氣腹組；假氣腹組大鼠臍旁插入氣腹針但不充入CO2。實驗結(jié)束后各組大鼠開胸經(jīng)左心耳取血，檢測血液流變學(xué)指標(biāo)改變。結(jié)果 氣腹組大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度、紅細胞聚集指數(shù)、D-二聚體及纖維蛋白原濃度顯著高于假氣腹組(P<0.05)，而氣腹預(yù)處理組大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度、紅細胞聚集指數(shù)、D-二聚體及纖維蛋白原濃度較氣腹組顯著降低(P<0.05)。各組大鼠血沉方程K值、紅細胞比容差異均無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論 氣腹預(yù)處理能有效改善血液流變學(xué)指標(biāo)。

氣腹； 預(yù)處理； 血液流變學(xué)； 大鼠

腹腔鏡手術(shù)是目前普遍開展的一種微創(chuàng)手術(shù)，術(shù)中常需用CO2建立氣腹以維持必須的操作空間，而氣腹本身的壓力會造成組織缺血損傷[1]。因此隨著腹腔鏡技術(shù)的廣泛開展，CO2氣腹所導(dǎo)致的臟器病理生理改變及其對臟器功能的影響正日益引起關(guān)注[2]。近年來氣腹預(yù)處理對提高組織缺血耐受性的作用得到了廣泛認(rèn)可[3]，但其對患者血液流變學(xué)的影響尚不清楚。本實驗通過模擬臨床腹腔鏡手術(shù)的操作環(huán)境，通過建立CO2氣腹及氣腹預(yù)處理大鼠動物模型，初步探討CO2氣腹預(yù)處理對大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)的影響。

1 材料與方法

1.1 材料

8～12周成年健康雄性SD大鼠30只，體質(zhì)量220～260g，購自貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心；戊巴比妥鈉購自上海西塘生物科技有限公司；肝素抗凝管及枸櫞酸鈉抗凝管購自上海新睿生物科技有限公司。

1.2 動物分組及動物模型復(fù)制

將大鼠隨機分為假氣腹組、氣腹組和氣腹預(yù)處理組三組，每組各10只。采用1%戊巴比妥鈉40 mg/kg腹腔注射麻醉后，仰臥位固定。臍周采用75%酒精消毒滅菌，參照嵇武等[4]的方法建立氣腹模型。氣腹組大鼠臍旁插入氣腹針并連接SN/REF氣腹機(美國Stryker公司)充入CO2建立氣腹動物模型，腹壓維持在15 mmHg，持續(xù)90 min后解除氣腹；氣腹預(yù)處理組在建立氣腹前先進行預(yù)處理，具體方法為CO2充氣5 min，腹壓維持在15 mmHg，然后再放氣5 min，重復(fù)2次，其余同氣腹組；假氣腹組臍旁插入針頭但不充入CO2。手術(shù)結(jié)束后24 h(再灌注24 h后)于左心耳取血，檢測血液流變學(xué)指標(biāo)的變化。

1.3 實驗指標(biāo)的檢測方法

血液流變學(xué)指標(biāo)檢測：采用德國哈克公司RS600血液流變儀檢測全血低切還原粘度、全血高切還原粘度、血漿粘度、紅細胞聚集指數(shù)、血沉方程K值、紅細胞比容。凝血及纖溶指標(biāo)檢測：采用Sysmex-CA7000型凝血測定儀檢測D-二聚體濃度、纖維蛋白原濃度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組大鼠血液流變學(xué)指標(biāo)改變

氣腹組大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度及紅細胞聚集指數(shù)顯著高于假氣腹組(P<0.05)，而氣腹預(yù)處理組大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度及紅細胞聚集指數(shù)較氣腹組顯著降低(P<0.05)。各組大鼠血沉方程K值、紅細胞比容差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見表1。

表1 大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度、紅細胞聚集指數(shù)、血沉方程K值、紅細胞比容結(jié)果

注：與假氣腹組比較,△P<0.05；與氣腹組比較,▲P<0.05。

2.2 各組大鼠凝血及纖溶指標(biāo)變化

與假氣腹組比較，氣腹組大鼠血漿中D-二聚體及纖維蛋白原濃度顯著增高，而氣腹預(yù)處理組大鼠血漿中D-二聚體濃度及纖維蛋白原濃度則較氣腹組顯著降低。見表2。

表2 大鼠血漿D-二聚體及纖維蛋白原濃度±s，n=10)

注：與假氣腹組比較,△P<0.05,★P<0.01；與氣腹組比較,▲P<0.05。

3 討 論

氣腹包括CO2充氣和放氣兩個過程，CO2充氣先使腹腔壓力快速增加，可引起腹腔內(nèi)血管血流阻力增高、血液灌注不足，從而導(dǎo)致腹腔內(nèi)臟缺血[5]。Sassa等[6]研究表明，CO2氣腹壓力為12 mmHg時，腎小管周圍的毛細血管內(nèi)血流速度開始下降；氣腹壓力進一步增至25 mmHg時，毛細血管內(nèi)血流幾乎停滯。由此可見，隨著氣腹壓力增大，氣腹對周圍器官的血供影響也逐漸增大，嚴(yán)重時甚至?xí)斐山M織器官損傷。當(dāng)手術(shù)結(jié)束氣腹解除后腹腔內(nèi)壓驟降，內(nèi)臟血管阻力消除，血液灌流得以恢復(fù)。而血流再灌注可導(dǎo)致氧自由基大量生成，氧自由基可進一步損害組織器官功能，導(dǎo)致缺血—再灌注損傷的發(fā)生[7]。近年來有研究表明，氣腹預(yù)處理有類似缺血預(yù)處理的作用，能有效減輕腹腔鏡術(shù)中氣腹所致的肝、腎、小腸等臟器的損傷[8]。Ates等[9]報道，建立大鼠CO2氣腹前，給予5 min的充氣(15 mmHg)和5 min的放氣可顯著改善術(shù)中長時間氣腹產(chǎn)生的缺血—再灌注損傷。目前關(guān)于氣腹預(yù)處理的研究多集中于氣腹預(yù)處理對氣腹本身所造成的缺血再灌注損傷的影響，而關(guān)于氣腹預(yù)處理對患者血液流變學(xué)的影響報道甚少。血液流變學(xué)與微循環(huán)有著非常密切的關(guān)系，血液中各種血細胞、血流狀態(tài)、血管壁狀態(tài)等任何一方面的異常，都會引起或加重微循環(huán)障礙[10]，尤其是對已出現(xiàn)微循環(huán)障礙和血液粘滯如腦血栓、冠心病、糖尿病、高血脂的患者更應(yīng)注意。大量研究已證實，缺血再灌注后一般都伴隨著血液流變學(xué)的改變，包括紅細胞變形能力下降、紅細胞聚集程度及血液粘度提高、纖維蛋白原及D-二聚體含量升高等，血液呈現(xiàn)異常的高粘及高凝狀態(tài)[11]。上述這些變化可導(dǎo)致微循環(huán)障礙進一步加劇，組織損傷更為嚴(yán)重，而氣腹預(yù)處理能否通過改善患者的血液流變學(xué)，從而減輕缺血再灌注損傷目前尚不可知。

本研究通過模擬臨床腹腔鏡手術(shù)的操作環(huán)境，建立CO2氣腹及氣腹預(yù)處理動物模型并觀察各組大鼠血液流變學(xué)各項指標(biāo)的變化。研究結(jié)果顯示，氣腹組大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度、紅細胞聚集指數(shù)、纖維蛋白原及D-二聚體濃度顯著高于假氣腹組，表明建立CO2氣腹的過程中存在血液流變性改變和凝血系統(tǒng)的激活。其主要原因是CO2充氣和放氣造成的缺血再灌注可導(dǎo)致自由基產(chǎn)生增加、鈣超載以及能量產(chǎn)生減少，這些因素均可促進血細胞及血管內(nèi)皮細胞損傷，使血液粘度及血細胞的粘附聚集性進一步增高，血栓易于形成，從而使微循環(huán)障礙進一步加重[12]。而氣腹預(yù)處理組大鼠血漿粘度、全血低切還原粘度、全血高切還原粘度、紅細胞聚集指數(shù)、血漿纖維蛋白原及D-二聚體濃度較氣腹組明顯降低，這充分表明氣腹預(yù)處理能有效改善血液流變學(xué)指標(biāo)，維持血細胞正常功能，增強血流速度，改善微循環(huán)，從而達到減輕缺血再灌注損傷的目的。

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Effect of pneumoperitoneum preconditioning on hemorheology in rats

JiangTiansheng,LiChunlai,YuanHongtao.

TheFirstPeople'sHospitalofGuiyang,Guiyang550001,China.

ObjectiveTo investigate the effect of pneumoperitoneum preconditioning on hemorheology of rats. Methods 30 healthy SD rats were divided into sham pneumoperitoneum group, pneumoperitoneum group and pneumoperitoneum preconditioning group, 10 rats in each group. To insert the veress needle beside the navel of rats and to connect SN/REF pneumoperitoneum machine, then continue to insufflate CO2for 90 minutes to establish the pneumoperitoneum model, abdominal pressure maintained at 15 mmHg. The pneumoperitoneum preconditioning group was subjected to 5 min of insufflation and 5 min of deflation, repeat 2 times, then followed by pneumoperitoneum. The rats of sham pneumoperitoneum group were inserted needles but not filling CO2. After the experiment, the blood was taken from the left heart of rats. Changes of hemorheology indexes were detected. Results Compared with sham pneumoperitoneum group, the levels of plasma viscosity, low shear reduction viscosity, high shear reduction viscosity, hematocrit erythrocyte aggregation index, D-dimer and fibrinogen of pneumoperitoneum group were increased. Compared with pneumoperitoneum group, the levels of plasma viscosity, low shear reduction viscosity, high shear reduction viscosity, hematocrit erythrocyte aggregation index, D-dimer and fibrinogen of pneumoperitoneum preconditioning group were decreased. Conclusion Pneumoperitoneum preconditioning can effectively improve the hemorheology indexes.

Pneumoperitoneum; Preconditioning; Hemorheology; Rat

貴陽市衛(wèi)生局科學(xué)技術(shù)計劃項目[筑衛(wèi)科技合同字(2014)第2號]

R-332

A

1002-6975(2016)07-0804-03

2015-11-30)

△通信作者，andyjts@163.com