張露勇，劉 婷，劉師卜

·臨床醫(yī)學(xué)· ·論著·

兩種增加骨密度功能保健食品的功效研究

張露勇，劉 婷，劉師卜

目的 對(duì)2種以碳酸鈣、氨基酸葡萄糖、硫酸軟骨素為主要組分但不同配比的增加骨密度類保健食品的功效進(jìn)行驗(yàn)證，從配方角度進(jìn)行分析評(píng)價(jià)。方法 采用相當(dāng)于人體推薦劑量的5、10、30倍濃度分別將氨糖軟骨素片(0.33、0.67、2.00 g/kg)及骨密度強(qiáng)化膠囊(0.25、0.5、1.5 g/kg)摻入飼料給予大鼠90 d，同時(shí)分別設(shè)置與30倍劑量組鈣含量相同的碳酸鈣對(duì)照組。 測(cè)定大鼠體質(zhì)量、股骨質(zhì)量、股骨密度及股骨鈣含量等指標(biāo)，對(duì)比配方及結(jié)果進(jìn)行分析和討論。結(jié)果 股骨質(zhì)量，增加骨密度膠囊10、30倍劑量組與碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖軟骨素片30倍劑量組與碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；股骨中點(diǎn)骨密度，增加骨密度膠囊30倍劑量組與碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖軟骨素片30倍劑量組與碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；股骨遠(yuǎn)心端骨密度，增加骨密度膠囊10、30倍劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖軟骨素片10、30倍劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；股骨鈣含量，增加骨密度膠囊30倍劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖軟骨素片10倍、30倍劑量組與30倍碳酸鈣組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)； 飼料鈣含量，低鈣飼料實(shí)測(cè)鈣含量為1.2 mg/g。結(jié)論 2種配方的保健食品均具有增加骨密度功效，氨糖軟骨素片較增加骨密度膠囊配方更合理。

保健食品；骨密度；氨基葡萄糖；硫酸軟骨素

增加骨密度功能食品是市場(chǎng)需求較大的一類保健食品，其中以補(bǔ)鈣為主類別產(chǎn)品的配方較常見(jiàn)的即為鈣劑配合氨基葡萄糖鹽酸鹽、硫酸軟骨素進(jìn)行組方。氨基葡萄糖是一類廣泛存在于人和動(dòng)物軟骨、肌腱和韌帶中的天然氨基葡聚糖，同時(shí)也是構(gòu)成關(guān)節(jié)軟骨的主要成分[1-2]，硫酸軟骨能夠預(yù)防和改善骨關(guān)節(jié)病，對(duì)受損的軟骨組織進(jìn)行修復(fù)[3]。因其潛在的醫(yī)藥價(jià)值，2010 年《中華人民共和國(guó)藥典》將其列為防治心血管疾病和關(guān)節(jié)病的最佳藥物。同時(shí)硫酸軟骨素作為膳食補(bǔ)充劑和保濕劑，廣泛應(yīng)用于食品和化妝品領(lǐng)域[4-5]。市面上含這類組分的增加骨密度功能保健食品較多，但從配方角度研究評(píng)價(jià)的較少。本實(shí)驗(yàn)對(duì)2種配方的增加骨密度功能產(chǎn)品的效果進(jìn)行研究，同時(shí)對(duì)效果進(jìn)行對(duì)比，旨在為補(bǔ)鈣類產(chǎn)品的配方評(píng)價(jià)提供新的思路?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 受試物

增加骨密度膠囊(簡(jiǎn)稱膠囊)500 g，含氨基葡萄糖鹽酸鹽230 g、碳酸鈣180 g、硫酸軟骨素80 g，其他輔料10 g。氨糖軟骨素片(簡(jiǎn)稱氨糖)1 000 g，含氨基葡萄糖鹽酸鹽400 g、碳酸鈣300 g、硫酸軟骨素135 g，其他輔料165 g。本實(shí)驗(yàn)中所用膠囊為內(nèi)容物原料，氨糖為原料干粉。簡(jiǎn)稱僅代表名稱，試驗(yàn)中給藥均為干粉摻入飼料無(wú)劑型差異。

1.2 動(dòng)物及飼養(yǎng)環(huán)境

SPF級(jí)SD種大鼠，共50只，雌性，每組10只，體質(zhì)量60～75 g，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(京)2014-0013，由中國(guó)食品藥品檢定研究院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物資源中心提供，實(shí)驗(yàn)方案經(jīng)中國(guó)食品藥品檢定研究院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。大鼠按性別每籠1只，在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室飼養(yǎng)觀察3 d后用于試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室為屏障環(huán)境，全密閉狀態(tài)，3級(jí)過(guò)濾送風(fēng)，溫度22～24 ℃，相對(duì)濕度40%～60%，日光燈12 h照明，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(京)2011-0008。高壓滅菌木刨花屑為墊料?；A(chǔ)飼料及低鈣飼料均由北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供，飼料生產(chǎn)企業(yè)審查合格證號(hào)：京飼審(2009)06166。本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供純化水自由飲用。

1.3 儀器和試劑

原子吸收分光光度計(jì)、骨密度儀(單光子骨密度儀或雙能X線骨密度儀或相關(guān)儀器)、精密卡尺、動(dòng)物解剖器械、動(dòng)物天平、105 ℃烘箱。

硝酸(優(yōu)級(jí)純)、高氯酸(優(yōu)級(jí)純)、2%氧化鑭溶液、鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

1.4.1 飼料配制 (1)低鈣基礎(chǔ)飼料配方：參照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》2003年版第111頁(yè)。(2)用低鈣基礎(chǔ)飼料配制各劑量組：劑量組按1.4.2劑量設(shè)計(jì)擴(kuò)大10倍劑摻入。粉末內(nèi)容物送北京科澳協(xié)力飼料有限公司，采取先高后低，由少到多逐步加入，逐級(jí)稀釋的順序摻入低鈣大鼠飼料中，分別制作高、中、低、碳酸鈣對(duì)照組4個(gè)劑量的飼料各20 kg。

1.4.2 劑量分組及受試樣品給予途徑 實(shí)驗(yàn)設(shè)9個(gè)劑量組，骨密度30倍劑量組1.5 g/kg(人用推薦量30倍)，10倍劑量組0.5 g/kg(人用推薦量10倍)，5倍劑量組0.25 g/kg(人用推薦量5倍)，碳酸鈣對(duì)照組(與膠囊30倍鈣水平相同)。氨糖劑量組2.00 g/kg為(人用推薦量30倍)，10倍劑量組0.67 g/kg(人用推薦量10倍)，5倍劑量組0.33 g/kg(人用推薦量5倍)，碳酸鈣對(duì)照組(與氨糖30倍鈣水平相同)。同時(shí)設(shè)一個(gè)低鈣對(duì)照組(鈣含量1.5 g/kg飼料)，經(jīng)口給予受試樣品3個(gè)月，并記錄每只動(dòng)物的體質(zhì)量及飼料攝入量。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

1.5.1 體質(zhì)量測(cè)定 禁食12 h后，測(cè)定體質(zhì)量。每周1次。

1.5.2 股骨重量測(cè)定 動(dòng)物喂養(yǎng)3個(gè)月后處死，剝離出右側(cè)股骨，于105 ℃烤箱中烤至恒重，稱量骨干重。

1.5.3 骨鈣含量及飼料含鈣量測(cè)定 按原子吸收分光光度法測(cè)定。(1)樣品采集與制備：飼料樣品經(jīng)均勻混合并過(guò)20目篩，在烘箱中烘干，置干燥器中冷卻后稱重，磨細(xì)。取大鼠一側(cè)股骨在105 ℃烘箱中烘干至恒重后，置于三角瓶中進(jìn)行消化。(2)樣品消化：精確稱取均勻干試樣0.3～0.4 g(根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度確定)于消解罐中，加混合酸消化液(硝酸：雙氧水=6∶1)7 ml，于加熱器內(nèi)加熱消化0.5 h，100 ℃，然后置于微波消解儀內(nèi)消解約1 h，再在加熱器內(nèi)趕酸約3 h。待消解罐內(nèi)液體接近2 ml時(shí)，取下冷卻。用2%氧化鑭溶液洗并轉(zhuǎn)移至50 ml刻度離心管內(nèi)，并定容至刻度。取與消化試樣相同量的混合酸消化液，按上述操作做空試劑空白試驗(yàn)測(cè)定。(3)骨鈣計(jì)算：樣品鈣含量(mg/g)=校準(zhǔn)后濃度(mg/L)×50×稀釋倍數(shù)/1 000/樣品質(zhì)量(g)。

表1 各組動(dòng)物股骨質(zhì)量(x±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)股骨質(zhì)量(g)P值(與低鈣對(duì)照組比較)P值(與相應(yīng)碳酸鈣組比較)P值(氨糖和膠囊對(duì)應(yīng)劑量組比較)低鈣對(duì)照組100.3572±0.0230---骨密度碳酸鈣組100.4859±0.0425P<0.05--膠囊5倍劑量組100.4155±0.0289P<0.05P<0.05-膠囊10倍劑量組100.4599±0.0594P<0.05P>0.05-膠囊30倍劑量組100.4829±0.0506P<0.05P>0.05-氨糖碳酸鈣組100.5222±0.0330P<0.05--氨糖5倍劑量組100.4625±0.0588P<0.05P<0.05P<0.05氨糖10倍劑量組100.4702±0.0369P<0.05P<0.05P>0.05氨糖30倍劑量組100.5178±0.0409P<0.05P>0.05P>0.05

注：“-”表示未統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

表2 各組動(dòng)物股骨中點(diǎn)骨密度(x±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)中點(diǎn)骨密度(g/cm2)P值(與低鈣對(duì)照組比較)P值(與相應(yīng)碳酸鈣組比較)P值(氨糖和膠囊對(duì)應(yīng)劑量組比較)低鈣對(duì)照組100.161±0.015---骨密度碳酸鈣組100.256±0.015P<0.05--膠囊5倍劑量組100.178±0.017P<0.05P<0.05-膠囊10倍劑量組100.212±0.026P<0.05P<0.05-膠囊30倍劑量組100.263±0.029P<0.05P>0.05-氨糖碳酸鈣組100.276±0.017P<0.05--氨糖5倍劑量組100.235±0.021P<0.05P<0.05P<0.05氨糖10倍劑量組100.253±0.021P<0.05P<0.05P<0.05氨糖30倍劑量組100.275±0.029P<0.05P>0.05P>0.05

注：“-”表示未統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

1.5.4 股骨骨密度測(cè)定 用骨密度儀(DISCOVERY WI AAL286)測(cè)量股骨中點(diǎn)及股骨遠(yuǎn)心端的骨密度。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值<0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；F值≥0.05，P≤0.05，用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

2 結(jié)果

2.1 股骨重量測(cè)定

由表1可見(jiàn)，各劑量組股骨質(zhì)量均高于低鈣對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

骨密度劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組相比，5倍劑量組股骨質(zhì)量低于骨密度碳酸鈣組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，10、30倍劑量組與碳酸鈣組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組相比，5、10倍劑量組顯著低于氨糖碳酸鈣組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，氨糖30倍劑量組與氨糖碳酸鈣組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

氨糖5倍劑量組股骨重量大于骨密度相應(yīng)劑量組，2者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。10、30倍劑量組受試物差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 股骨骨密度測(cè)定

由表2可見(jiàn)，各劑量組股骨中點(diǎn)骨密度均高于低鈣對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

膠囊劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組相比，5倍、10倍劑量組低于其碳酸鈣組(P<0.05)，30倍劑量組與碳酸鈣組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖劑量組與相應(yīng)碳酸鈣組相比，5倍、10倍劑量組低于碳酸鈣組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，30倍劑量組與碳酸鈣組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

表3 各組動(dòng)物股骨遠(yuǎn)心端骨密度(x±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)遠(yuǎn)心端骨密度(g/cm2)P值(與低鈣對(duì)照組比較)P值(與碳酸鈣組比較)P值(氨糖和膠囊對(duì)應(yīng)劑量組比較)低鈣對(duì)照組100.117±0.022---膠囊碳酸鈣組100.261±0.033P<0.05--膠囊5倍劑量組100.178±0.024P<0.05P<0.05-膠囊10倍劑量組100.234±0.036P<0.05P>0.05-膠囊30倍劑量組100.260±0.036P<0.05P>0.05-氨糖碳酸鈣組100.273±0.03P<0.05--氨糖5倍劑量組100.217±0.03P<0.05P<0.05P<0.05氨糖10倍劑量組100.252±0.028P<0.05P>0.05P>0.05氨糖30倍劑量組100.276±0.02P<0.05P>0.05P>0.05

注：“-”表示未統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

表4 各組動(dòng)物股骨鈣含量(x±s)

注：“-”表示未統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

氨糖5倍和10倍劑量組中點(diǎn)骨密度大于膠囊度對(duì)應(yīng)劑量組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，30倍劑量組受試物差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

由續(xù)表3可見(jiàn)，各劑量組股骨遠(yuǎn)心端骨密度均高于低鈣對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

膠囊5倍劑量組低于其碳酸鈣組(P<0.05)，10、30倍劑量組與碳酸鈣組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。氨糖與相應(yīng)碳酸鈣組相比，5倍劑量組低于碳酸鈣組(P<0.05)，10倍、30倍劑量組與碳酸鈣組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

氨糖5倍劑量組遠(yuǎn)端骨密度大于膠囊相應(yīng)劑量組(P<0.05)，10倍、30倍劑量組受試物差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。

2.3 股骨鈣含量

由表4可見(jiàn)，除膠囊5倍劑量組骨鈣含量與低鈣對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其他各組骨鈣含量均高于低鈣對(duì)照組，其中膠囊10倍劑量組為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其他各組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

膠囊5倍、10倍劑量組骨鈣含量低于其碳酸鈣組(P<0.05)，30倍劑量組與碳酸鈣組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。氨糖5倍劑量組骨鈣含量低于碳酸鈣組(P<0.05)，10倍、30倍劑量組與碳酸鈣組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

氨糖5倍劑量組骨鈣含量、10倍組骨鈣含量均大于膠囊相應(yīng)劑量組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，30倍劑量組2受劑型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義(P>0.05)。

2.4 飼料鈣含量

低鈣飼料設(shè)計(jì)鈣含量為1.5 mg/g，實(shí)測(cè)含量為1.2 mg/g。每種飼料均在不同部位取3點(diǎn)，計(jì)算后取均值。

表5可見(jiàn)所有組別飼料的鈣含量實(shí)測(cè)值與用低鈣飼料計(jì)算所得的設(shè)計(jì)值都很接近，證明飼料加工工藝良好。

表5 實(shí)測(cè)飼料鈣含量(x±s)

組別取樣點(diǎn)編號(hào)取樣飼料鈣含量(mg/g)實(shí)測(cè)3點(diǎn)平均鈣含量(mg/g)以低鈣飼料1.2mg/g計(jì)算飼料理論鈣含量氨糖30倍劑量組15.3455.3604.16725.30735.427氨糖10倍劑量組12.8063.0952.18223.28733.191氨糖5倍劑量組11.8781.8831.65721.91431.858氨糖碳酸鈣組13.9633.9544.16723.99433.905膠囊30倍劑量組13.7123.5833.87523.52933.508膠囊10倍劑量組12.0542.0482.07722.04632.045膠囊5倍劑量組11.4731.4961.62721.47731.538膠囊碳酸鈣組14.0153.9703.87523.99633.899低鈣組對(duì)照組11.2221.203/21.17931.208

表6 實(shí)驗(yàn)大鼠鈣總攝入量(g，x±s，n=10)

組別膠囊氨糖總進(jìn)食量(g)實(shí)測(cè)鈣含量(mg/g)鈣總攝入量(g)總進(jìn)食量(g)實(shí)測(cè)鈣含量(mg/g)鈣總攝入量(g)低鈣對(duì)照組1481.0±109.71.2031.78±0.131481.0±109.71.20311.78±0.13碳酸鈣組1567.9±168.13.9706.22±0.671591.3±119.44.30236.88±0.725倍劑量組1528.8±107.81.4962.29±0.161472.2±189.31.88332.77±0.3610倍劑量組1457.5±178.32.0482.99±0.371329.0±66.833.09464.11±0.2130倍劑量組1520.6±166.13.5825.45±0.601441.5±165.24.27316.16±0.71

表7 2種樣品各組分日用推薦量(mg/d)

樣品氨基葡萄糖鹽酸鹽碳酸鈣離子鈣(碳酸鈣折算)硫酸軟骨素其他輔料氨糖16001200480540640膠囊13801080432480600

2.5 2種增加骨密度功能保健食品評(píng)價(jià)

增加骨密度膠囊和氨糖軟骨素片均具有增加骨密度功能；結(jié)合股骨重量、股骨中點(diǎn)及遠(yuǎn)心端骨密度、骨鈣含量3項(xiàng)指標(biāo)，提示氨糖軟骨素片的增加骨密度功效優(yōu)于增加骨密度膠囊，與兩受試物人用推薦量一致，具有劑量效應(yīng)關(guān)系。

3 討論

低鈣飼料實(shí)測(cè)鈣含量為1.2 mg/g低于1.5 mg/g的設(shè)計(jì)值，以此低鈣飼料為基礎(chǔ)飼料配置2種受試物高、中、低3種濃度的摻入飼料，依照配方可計(jì)算出設(shè)計(jì)鈣含量。比對(duì)實(shí)測(cè)值，可見(jiàn)設(shè)計(jì)濃度與實(shí)測(cè)濃度非常接近，證明飼料加工工藝良好。由表2～5結(jié)果可見(jiàn)無(wú)論是股骨重量、股骨中點(diǎn)及遠(yuǎn)心端骨密度還是骨鈣含量這些指標(biāo)，低鈣對(duì)照組均低于其他組別，證明低鈣模型成立。根據(jù)2010年國(guó)標(biāo)規(guī)定大鼠生長(zhǎng)繁育飼料鈣含量為10～18 mg/g[6]。通過(guò)表6可以看到即使是30倍劑量的鈣含量都遠(yuǎn)未達(dá)到正常飼料的含鈣量，在鈣量不足前提下2個(gè)產(chǎn)品均表現(xiàn)出了良好的增加骨密度功效，提示2個(gè)受試物均具有提高鈣吸收和利用功效。

由以上結(jié)果可見(jiàn)，同為5倍推薦劑量時(shí)，氨糖軟骨素片效果優(yōu)于增加骨密度膠囊。但推薦劑量增至10倍或更高時(shí)，兩者各項(xiàng)指標(biāo)并無(wú)明顯差別。提示增加骨密度膠囊的因其日用推薦量的鈣離子偏低，即使在5倍劑量濃度下鈣離子仍未滿足大鼠正常生理需求。而10倍以上劑量時(shí)，鈣離子達(dá)到了大鼠生理需求的“飽和”狀態(tài)，因此與氨糖軟骨素片效果比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。雖然這2個(gè)產(chǎn)品是以補(bǔ)鈣為主的增加骨密度類保健食品，但更希望看到復(fù)方產(chǎn)品在促進(jìn)鈣劑吸收及利用方面發(fā)揮作用，而不僅僅做為是“鈣片”使用。畢竟在正常飲食條件下鈣攝入缺乏的情況已經(jīng)很少出現(xiàn)。2個(gè)受試物在總鈣量均未達(dá)到大鼠鈣生理需求的“飽和”狀態(tài)下，效果差異并不能說(shuō)明誰(shuí)的日用推薦量更合理，因?yàn)檫@時(shí)起決定性作用的是總鈣用量。

因本實(shí)驗(yàn)的初衷并非對(duì)兩配方，因此沒(méi)有設(shè)置受試物相同鈣攝入量組進(jìn)行對(duì)比。但由于劑量設(shè)計(jì)和飼料加工的原因，最終結(jié)果顯示仍可以對(duì)兩配方的合理性進(jìn)行比較。由表4、5可見(jiàn)氨糖軟骨素片5倍組飼料實(shí)測(cè)飼料鈣含量為1.883 mg/g，實(shí)際鈣總攝入量為2.77 g；增加骨密度膠囊10倍劑量組實(shí)測(cè)飼料鈣含量為2.048 mg/g，實(shí)際鈣總攝入量為2.99 g。對(duì)比2個(gè)劑量組各項(xiàng)指標(biāo)。股骨中點(diǎn)骨密度，氨糖軟骨素片大于骨密度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。氨糖軟骨素片在實(shí)際飼料鈣含量及總鈣攝入量均低于骨密度膠囊的前提下，仍有一項(xiàng)指標(biāo)優(yōu)于骨密度。據(jù)此可以推斷氨糖軟骨素片的配比優(yōu)于增加骨密度膠囊。

本次驗(yàn)證的2個(gè)配方主要組分均為碳酸鈣、氨基葡萄糖鹽酸鹽、硫酸軟骨素。配比依照順序氨糖軟骨素片為1∶1.33∶0.45，增加骨密度膠囊為1∶1.28∶0.44?？梢钥吹桨碧擒浌撬仄c增加骨密度膠囊配比的最大區(qū)別在于氨基葡萄糖鹽酸鹽的含量更高。

氨基葡萄糖鹽酸鹽是一種天然的氨基單糖，甲殼素類物質(zhì)。是軟骨基質(zhì)和滑液中聚氨基葡萄糖的成分。可抑制因免疫而造成的蛋白多糖降解、外源性的氨基葡萄糖還可以刺激軟骨細(xì)胞合成蛋白多糖[7]。補(bǔ)充軟骨基質(zhì)丟失的成分，通過(guò)抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的表達(dá)，從而促進(jìn)軟骨的修復(fù)[8]。在補(bǔ)鈣功效保健食品中主要發(fā)揮螯合劑作用，使產(chǎn)品具有良好的生物和化學(xué)穩(wěn)定性、提升補(bǔ)鈣效果[9]。

硫酸軟骨素(CS)是存在于人和動(dòng)物的軟骨、肌腱、肌膜和血管壁中的一種酸性黏多糖，主要是由D-葡萄糖醛酸和N-乙?；被肴樘墙M成，根據(jù)硫酸基在半乳糖上位置不同有多種異構(gòu)體，主要為硫酸軟骨素A(CSA)和硫酸軟骨素C (CSC)。硫酸軟骨素是結(jié)締組織的重要組成部分,具有多種藥理作用。研究表明，硫酸軟骨素可通過(guò)刺激軟骨細(xì)胞合成蛋白聚糖、透明質(zhì)酸和Ⅱ型膠原，從而促進(jìn)骨細(xì)胞增生、誘導(dǎo)新骨形成、延緩骨衰老等作用[10]。目前臨床上主要用于治療骨關(guān)節(jié)炎，2003年歐洲風(fēng)濕病防治聯(lián)合會(huì)指南中推薦CS用于治療膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎[11]。硫酸軟骨素具有明顯的親軟骨性,可進(jìn)入軟骨組織,保護(hù)軟骨。研究表明，硫酸軟骨素能抑制關(guān)節(jié)炎大鼠基質(zhì)中金屬蛋白酶-9和白介素-1β的合成及水腫的產(chǎn)生，從而避免了軟骨損害的進(jìn)一步發(fā)展[12]。

由表7可見(jiàn)受試物日用推薦量氨糖軟骨素片為4 g/d高于增加骨密度膠囊3 g/d。輔料主要為賦形劑，無(wú)功效作用。在本實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是為了同時(shí)驗(yàn)證2個(gè)受試物各自是否具有增加骨密度功能。但通過(guò)前面對(duì)最終數(shù)據(jù)的分析，筆者得出一些有意義的結(jié)論。首先2個(gè)受試物均具有增加骨密度功效；因?yàn)榘碧擒浌撬仄娜沼猛扑]量較增加骨密度膠囊高，在用于嚴(yán)重缺鈣對(duì)象時(shí)效果會(huì)更好。但鑒于保健食品一般作為正常飲食以外的膳食補(bǔ)充劑使用，嚴(yán)重鈣缺乏的情況極少存在，因此2種產(chǎn)品的日用推薦量均在合理范圍；氨糖軟骨素片和增加骨密度膠囊分別提高一定給藥濃度，氨糖軟骨素片在實(shí)際鈣攝入量低于骨密度膠囊前提下增加骨密度效果更好，證明氨糖軟骨素片的配比更為合理，從配方角度分析主要原因是氨基葡萄糖鹽酸鹽的設(shè)計(jì)含量更為合理。

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(本文編輯：張陣陣)

Study on the efficacy of two kinds of functional health food for the enhancing of bone density

Zhang Luyong, Liu Ting, Liu Shibo

(NationalInstitutesforFoodandDrugControl,Beijing100050,China)

Objective To evaluate the efficacy of 2 kinds of functional health food for the enhancing of bone density with calcium carbonate, glucosamine and chondroitin sulfate as the main components but with different concentrations, and also to analyze their different formulae.MethodsThe rats were fed with the animal feed mixed with glucosamine chondroitin tablets with the concentration levels of 5, 10 and 30 times of the recommended human doses (i.e. at the dosages of 0.33 g/kg, 0.67 g/kg and 2.00 g/kg) and bone density-enhancing capsules (with dosages of 0.25 g/kg, 0.5 g/kg and 1.5 g/kg) for as long as 90 days. At the same time, the group of the animals given calcium carbonate with the concentration level as high as 30 times was set as the control group. Body weight, femur weight, femur bone density and calcium content and other indicators of the rats were detected, and then, analyses and discussions were made against the formulae and the detection results.ResultsStudy results indicated that there were no differences in femur bone weight for those animal groups of 10-time and 30-time bone density-enhancing capsules, as compared with that of the calcium carbonate group or the control group(P>0.05). There was also no difference for the 30-time dosage group of glucosamine chondroitin tablets, when compared with the calcium carbonate group(P>0.05). There were no differences in mid femur bone density for the animal group of 30-time bone density-enhancing capsules, as compared with that of the calcium carbonate group(P>0.05)There was also no difference for the 30-time dosage group of glucosamine chondroitin tablets, when compared with the calcium carbonate group(P>0.05). There were no differences in distal femur bone density for those animal groups of 10-time and 30-time bone density-enhancing capsules, as compared with that of the calcium carbonate group(P>0.05). There were no differences for the 10-time and 30-time dosage groups of glucosamine chondroitin tablets, when compared with the calcium carbonate group(P>0.05). No differences could be seen in femur calcium content for the 30-time bone density-enhancing capsule group, when compared with the calcium carbonate group(P>0.05). Neither differences could be noted for the 10-time and 30-time dosage groups of glucosamine chondroitin tablets, when compared with the 30-time calcium carbonate group(P>0.05). As for the calcium content in the feed, the actual measured calcium content in the low calcium feed was 1.2 mg/g.ConclusionThe health food of the 2 formulae all had the function to increase bone density, and the glucosamine chondroitin tablets were more superior to the bone density-enhancing capsules.

Health food; Bone density; Glucosamine; Chondroitin sulfate

100050 北京，中國(guó)食品藥品檢定研究院

R285

A

10.3969/j.issn.1009-0754.2016.06.014

2016-03-28)