趙宏艷，胡明華，從仁懷，肖凌云，劉梅潔，鞠大宏△

(1. 中國中醫(yī)科學(xué)院 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，北京 100700； 2. 中國中醫(yī)科學(xué)院 中醫(yī)基礎(chǔ)理論研究所，北京 100700； 3. 無限極(中國)有限公司，廣州 510627)

痰濁是津液代謝異常的病理產(chǎn)物，任何與津液相關(guān)的疾病原因都有可能導(dǎo)致痰濁證的產(chǎn)生，因此痰濁不僅是病理產(chǎn)物還是致病因素?！额愖C治裁·痰飲》云[1]：“飲惟停蓄腸胃，而痰則隨氣升降，遍身皆到。在肺則咳，在胃則嘔，在心則悸，在頭則眩，在背則冷，在胸則痞，在脅則脹，在腸則瀉，在經(jīng)絡(luò)則腫，在四肢則痹。”因此又有“百病皆生于痰”的說法，歷代醫(yī)家也都非常重視對“痰”的研究，并不斷 對其開展理論研究、臨床研究及實(shí)驗(yàn)研究?；谙惹暗难芯砍晒皩μ禎岬睦斫猓疚年U述了可應(yīng)用于痰濁研究的動(dòng)物模型，以期對闡明“痰濁”的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵提供借鑒。

1 脾虛證動(dòng)物模型

痰濁的產(chǎn)生與五臟有著密切的關(guān)系，其中以脾、肺、腎三臟為要。中醫(yī)理論認(rèn)為，“脾為生痰之源、肺為儲痰之器”，脾失健運(yùn)，轉(zhuǎn)輸無權(quán)，上不能升輸及肺以通調(diào)水道，下不能降歸助腎以蒸發(fā)開合，從而導(dǎo)致津液輸布與排泄的失常。因此，脾是痰濁產(chǎn)生的關(guān)鍵所在，脾虛則痰生，脾健則痰消，所以脾虛動(dòng)物模型應(yīng)可用于痰濁的研究。目前多采用大鼠制作脾虛動(dòng)物模型，常用的方法有瀉下法(大黃或番瀉葉等灌胃制作)、饑飽失常法、過食肥甘法、勞倦法、利血平法和復(fù)合法等[2-3]。該模型一般狀況可表現(xiàn)出便溏、肛門污穢、精神萎靡、倦怠、活動(dòng)減少、蜷縮、四肢無力、毛發(fā)欠光澤疏松、進(jìn)食不積極等癥狀[4]。此外，巴馬小型豬也可制作出穩(wěn)定的脾虛痰濁證[5]。脾虛證動(dòng)物模型除通過一般狀況的觀察外，還可通過外周血中D-木糖/胃泌素/抗利尿激素的水平、胃和回腸黏膜厚度及水通道蛋白3水平等判斷脾虛程度[6-7]。因此，通過對脾虛模型的研究，可從中醫(yī)理論的角度間接的對痰濁開展研究。

2 痰濁阻肺證動(dòng)物模型

肺的功能與肺中之氣、津等物質(zhì)代謝密切相關(guān)，肺失宣降可產(chǎn)生痰濁并滯留其中。1996年王九林等[8]就開始嘗試采用硫磺粉撒布于清艾條中煙熏及氨水刺激大鼠的方法，制作肺虛痰阻證動(dòng)物模型以探討痰證。目前痰濁阻肺證動(dòng)物模型常采用化學(xué)物質(zhì)刺激呼吸系統(tǒng)的方法[9-10]，具體方法是將二氧化硫、氨、丙烯醛、硫酸、枸櫞酸、辣椒素等刺激性化學(xué)物質(zhì)，氣霧吸入或直接注入呼吸道內(nèi)；也有將肥皂粉、淀粉或滑石粉直接吹入呼吸道內(nèi)的方法，咳嗽是該模型的主要癥狀。 除此之外，還可通過觀察呼吸道黏液分泌、肺功能指標(biāo)、氣道炎癥因子的變化等方法判斷痰濁阻肺證的程度[11-12]，因此痰濁阻肺動(dòng)物模型可用于痰濁證的研究。

3 肥胖和高脂血癥動(dòng)物模型

《臨證指南醫(yī)案》指出痰乃飲食所化[13]。飲食不節(jié)，嗜食肥甘，損傷脾胃，運(yùn)化失常，聚濕為痰。《丹溪手鏡》中也多次提到“肥人多濕痰”[14]，可見肥胖和高脂血癥符合中醫(yī)痰濁致病。目前常采用高油、高脂等肥甘厚膩食物喂養(yǎng)的方法制作肥胖和高脂血癥動(dòng)物模型[15-16]，這兩類動(dòng)物模型典型癥狀與臨床表現(xiàn)相似，即肥胖、腹部松軟、血脂升高。這些過多的脂肪組織和血中膏脂之病理狀態(tài)即是痰濁。因此，通過高油、高脂喂養(yǎng)建立的肥胖模型和高脂血癥動(dòng)物模型也是較為常用的痰濁證模型。

4 脂肪肝動(dòng)物模型

脂肪肝屬于中醫(yī)“肥胖、痰飲、積聚、脅痛”等范疇?！堆C論·臟腑病機(jī)論》[17]云：“木之性主于疏泄，食氣入胃，全賴肝木之氣以疏泄之，而水谷乃化”，說明肝主疏泄功能與水谷運(yùn)化的關(guān)系。肝失疏泄，可致脾失健運(yùn)、痰濁郁結(jié)、阻滯肝臟脈絡(luò)而形成脂肪肝，這是本病發(fā)生的機(jī)制。目前脂肪肝動(dòng)物模型多采用高脂飼料誘發(fā)、高淀粉誘發(fā)和先天性遺傳性脂肪肝3 種模型，這些模型動(dòng)物可見有不同程度的肥胖、血脂(TC、TG、LDL-C、FFA 顯著升高，HDL-C顯著降低)和肝功能(AST、ALT 升高)異常及肝細(xì)胞脂肪變性，有的模型血糖和轉(zhuǎn)氨酶也會增高[18-19]。這些病變的產(chǎn)生均可與痰濁密切相關(guān)，因此脂肪肝動(dòng)物模型可用于痰濁證的研究。

5 缺血性中風(fēng)動(dòng)物模型

《明醫(yī)雜著》說道：“所以古人論中風(fēng)偏枯、麻木、酸痛、不舉諸癥，以血虛、死血、痰飲為言，是論論其致病根源。此血病、痰病為本，而外邪為標(biāo)。[21]”朱丹溪?jiǎng)t直接指出：“中風(fēng)大率主血虛有痰，治痰為先，次養(yǎng)血行血。半身不遂，大率多痰。[22]”現(xiàn)代研究亦認(rèn)為，痰濁是形成缺血性中風(fēng)病的主要致病因素以及病理性產(chǎn)物[20]。目前，該病動(dòng)物模型制作方法有結(jié)扎頸總動(dòng)脈法、自身血凝栓子栓塞頸總動(dòng)脈的腦梗塞法和電凝法等[23-24]。造模后模型動(dòng)物可出現(xiàn)與中風(fēng)患者相類似的臨床表現(xiàn)，主要表現(xiàn)有體質(zhì)量減輕、精神倦怠、少動(dòng)、向一側(cè)傾斜、下肢外展內(nèi)收困難、跛足現(xiàn)象等。該疾病模型血液中血液黏度增高、血小板聚集性增高、脂類含量常升高，這是痰濁證的重要生化基礎(chǔ)[23-24]，所以缺血性中風(fēng)動(dòng)物模型可用于痰濁證的研究。

6 多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型

多囊卵巢綜合征是一種內(nèi)分泌紊亂性疾病，主要臨床表現(xiàn)為肥胖、月經(jīng)不調(diào)、不孕等。中醫(yī)古籍中也有類似此疾病的癥狀、病因及治療的記載。如《丹溪心法》指出:“若是肥盛婦人,稟受甚厚,恣于酒食之人,經(jīng)水不調(diào),不能成胎,謂之軀脂滿溢,閉塞子宮,宜行濕燥痰,用星、夏、蒼術(shù)、臺芎、防風(fēng)、羌活、滑石，或用導(dǎo)痰湯之類。[25]”《女科切要》也指出，痰閉子宮是經(jīng)準(zhǔn)而不孕的原因之一[26]。目前該疾病主要有3種造模方法，分別是雄激素(睪酮、脫氫表雄酮、雙氫睪酮)誘導(dǎo)的模型、雌激素與來曲唑誘導(dǎo)的模型、基因敲除小鼠和轉(zhuǎn)基因小鼠的模型，這些模型動(dòng)物最主要的病理改變是出現(xiàn)卵巢多囊[27-28]。肥胖和卵巢多囊化病理改變的本質(zhì)即是痰濁，因此多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型可用于痰濁證的研究。

7 圍絕經(jīng)期綜合征動(dòng)物模型

圍絕經(jīng)期綜合征是婦女在絕經(jīng)前后由于卵巢功能衰退的內(nèi)分泌變化所引起的一系列軀體和精神心理癥狀。目前該模型有3種制作方法，即去勢造模、 X線損傷術(shù)造模和自然圍絕經(jīng)期造模[29]。去勢造模動(dòng)物模型分為雙側(cè)卵巢全切和一側(cè)卵巢全切、另一側(cè)切除80%的方法。卵巢切除手術(shù)后第3～5天起，對大鼠進(jìn)行陰道涂片檢查，每天1次，連續(xù)5 d，若無動(dòng)情期反應(yīng)表明造模成功。X線損傷術(shù)造模是通過X光照射破壞卵巢所致癥狀來反映圍絕經(jīng)期的主要臨床表現(xiàn)。自然衰老的圍絕經(jīng)期大鼠，選擇11～14月齡大鼠，每天同一時(shí)間進(jìn)行陰道脫落細(xì)胞涂片，連續(xù)觀察15 d，篩選出無動(dòng)情期變化者作為自然衰老的圍絕經(jīng)期大鼠。這些方法制備圍絕經(jīng)期綜合征動(dòng)物模型，可以出現(xiàn)雌激素水平下降、子官質(zhì)量降低、體質(zhì)量增加、甘油三醋和膽固醇含量升高等臨床表現(xiàn)，與臨床表現(xiàn)相似。這些改變與痰濁致病密切相關(guān)，所以圍絕經(jīng)期綜合征可用于痰濁證候的研究。

8 絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥動(dòng)物模型

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥屬于中醫(yī) “骨痿”“骨痹”范疇，腎精不足是其主要病變機(jī)制?！毒霸廊珪分赋觯骸拔迮K之病，雖俱能生痰，然無不由乎脾腎。蓋脾主濕，濕動(dòng)則為痰；腎主水，水泛亦為痰。故痰之化無不在脾，而痰之本無不在腎。[30]”該疾病模型可采用切除動(dòng)物雙側(cè)卵巢的方法制作，一般3個(gè)月后即可成模。本課題組實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，動(dòng)物在切除卵巢后，體型明顯肥胖，骨密度降低，顯微鏡下可見骨髓腔擴(kuò)大、脂肪細(xì)胞明顯增多、骨小梁變細(xì)變少、分布稀疏、排列不整齊等，說明該模型出現(xiàn)脂質(zhì)代謝異常[31]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)也揭示絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥與脂代謝紊亂具有顯著相關(guān)性[32]，所以絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型可用于痰濁證的研究。

9 糖尿病動(dòng)物模型

糖尿病是1組以慢性高血糖為特征的代謝性疾病，臨床多表現(xiàn)為口渴、多飲、多食、多尿、消瘦等。該病有多種造模方法，目前主要分為實(shí)驗(yàn)性、自發(fā)性和轉(zhuǎn)基因糖尿病動(dòng)物模型[33]。傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)性糖尿病動(dòng)物模型，如化學(xué)損傷法、手術(shù)切除胰腺法等都能出現(xiàn)顯著的血糖升高，但高胰島素血癥和胰島素抵抗等都糖尿病特征卻不能表現(xiàn)出來。因此，近年來自發(fā)性和轉(zhuǎn)基因糖尿病動(dòng)物模型得到了廣泛的應(yīng)用[34-35]?！秲?nèi)經(jīng)》指出，“過食膏粱厚味，日久損傷脾胃，脾失健運(yùn)，水谷精微運(yùn)化失常，聚濕成痰”。進(jìn)一步發(fā)展，積熱內(nèi)蘊(yùn)，傷津耗液，津液虧虛，不能上承于口，發(fā)為“消渴”[36]。可見，痰濁是糖尿病的主要致病因素之一，因此糖尿病動(dòng)物模型可以用于痰濁證的研究。

10 腫瘤動(dòng)物模型

癥瘕積聚是痰濁形成的必然結(jié)果，《黃帝內(nèi)經(jīng)》中也早有徵瘕、積聚等病名。《丹溪心法》云：“凡人身上中下有塊者多是痰。[37]”近年來，許多醫(yī)家將痰證理論應(yīng)用到腫瘤的基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)踐中，并取得了一定成績，也為中醫(yī)從痰論治腫瘤提供了良好的理論指導(dǎo)與臨床方法[38-39]，因此腫瘤疾病相關(guān)模型可以用于痰濁證的研究。但腫瘤動(dòng)物模型造模方法多種多樣、種類繁多，在此不再贅述。

11 動(dòng)脈粥樣硬化及冠心病動(dòng)物模型的研究(痰瘀互結(jié)動(dòng)物模型)

動(dòng)脈粥樣硬化是以大動(dòng)脈內(nèi)膜的脂質(zhì)沉積、血管平滑肌細(xì)胞和結(jié)締組織增生、內(nèi)膜纖維性增厚及粥樣斑塊形成為主要特征，最后可導(dǎo)致動(dòng)脈壁增厚變硬失去彈性和管腔狹窄。中醫(yī)理論認(rèn)為，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊是由于痰濁凝結(jié)形成固定不移的有形斑塊，滯于血中而導(dǎo)致管腔的狹窄[40]。臨床對于動(dòng)脈粥樣硬化主要從“瘀血”角度進(jìn)行辨證論治。但是瘀本于血，痰本于津，津血同源，因此又導(dǎo)致痰瘀在病理上不可分割的關(guān)系-同源而互衍[41]?，F(xiàn)代研究亦顯示，痰證血液流變性顯著異常，主要表現(xiàn)為血液濃稠性、黏滯性、聚集性和凝固性增高[42]，因此痰瘀是痰濁的進(jìn)一步發(fā)展。

目前國內(nèi)外較為常用制作動(dòng)脈粥樣硬化模型的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是鼠類、家兔及豬，但鼠類最為常用。常用于制作動(dòng)脈粥樣硬化模型的鼠類有小鼠和大鼠，小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型有誘發(fā)型和基因工程型2種，而其中ApoE 基因敲除小鼠在我國使用最為廣泛。 我國學(xué)者對該模型小鼠血脂代謝特點(diǎn)、動(dòng)脈硬化斑塊特性、形成機(jī)制、模型制備等多方面進(jìn)行了大量研究[43]。大鼠有抗動(dòng)脈粥樣硬化特性，但由于大鼠具有經(jīng)濟(jì)效益比高、食 性與人相近、血容量和血管管徑均明顯增加等優(yōu)點(diǎn)，因此仍是較為理想的動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型，目前常采用機(jī)械損傷動(dòng)脈及免疫刺激法制備[44]。此外，小型豬和家兔也廣泛應(yīng)用于模型的制作，其中巴馬小型豬是國內(nèi)小型豬應(yīng)用最多的品種，高脂高膽固醇飼養(yǎng)法和高脂飼料加球囊拉傷法是這兩類動(dòng)物常用的制作方法。采用以上方法造模后，可見到以下不同程度的病理特征，如內(nèi)中膜增厚、泡沫細(xì)胞生成、纖維帽形成等。根據(jù)該疾病的病位及典型病理特征，說明其與中醫(yī)痰瘀互結(jié)證密切相關(guān)，因此該疾病模型可用于痰瘀互結(jié)證的研究。

冠心病是動(dòng)脈粥樣硬化導(dǎo)致器官病變的最常見類型，該疾病模型的制作方法可分為慢性模型和急性模型，慢性模型的制作方法主要有單純高脂飲食法、高脂飲食聯(lián)合藥物法(常采用注射腦垂體后葉素、麥角新堿、異丙腎上腺素等藥物誘發(fā)心肌缺血)、高脂飲食聯(lián)合冠脈結(jié)扎法、導(dǎo)管介入法、冠脈壓迫法，急性模型的制作方法有冠脈結(jié)扎法、藥物誘導(dǎo)法(常用的藥物有腦垂體后葉素和異丙腎上腺素)和介入栓塞法。 通過體質(zhì)量、生化指標(biāo)(血脂、血漿同型半胱氨酸-Hcy、腫瘤壞死因子、心肌標(biāo)記物、炎癥相關(guān)因子)、血液流變學(xué)、冠脈造影等指標(biāo)可評價(jià)模型的制備以及藥物的治療效果[45]。冠心病屬于中醫(yī)胸痹、真心痛范疇，分為多種證型，其中心血瘀阻證、痰濁內(nèi)阻證是冠心病中醫(yī)辨證中最常見的證型[46]。通過實(shí)驗(yàn)研究也發(fā)現(xiàn)，痰瘀互結(jié)是冠心病誘發(fā)的最重要因素，其病理表現(xiàn)主要體現(xiàn)在血脂代謝紊亂方面[47]，因此冠心病動(dòng)物模型也可用于痰瘀互結(jié)證的研究。

總的來說，痰濁是人體津液不歸正化而形成的病理產(chǎn)物，是臟腑參與、氣機(jī)變化和精血津液轉(zhuǎn)變綜合作用的結(jié)果。目前關(guān)于痰濁證的實(shí)驗(yàn)研究取得了一定的成果，但痰濁證界域?qū)掗煟瑑?nèi)容復(fù)雜，很多因素可導(dǎo)致痰濁證的發(fā)生。痰濁反過來也可導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，且痰濁證形成時(shí)多可見兼證形成，所以導(dǎo)致痰濁證動(dòng)物模型仍很難有統(tǒng)一的制作標(biāo)準(zhǔn)?；诠P者的理解，本文對可用于痰濁研究的動(dòng)物模型進(jìn)行探析，希望對開展痰濁研究有所啟示。

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析其原因，切不可操之過急，若多種西醫(yī)治療手段不效，可適時(shí)尋求中醫(yī)藥治療。

中藥具有“多角度-多環(huán)節(jié)-多靶點(diǎn)”的特點(diǎn)，將滋陰補(bǔ)陽方序貫與IVF-ET相結(jié)合，實(shí)際是中醫(yī)以人為本的整體觀念與西醫(yī)助孕技術(shù)的結(jié)合。中藥序貫治療對輔助生殖技術(shù)起到的作用，是從宏觀總體協(xié)調(diào)機(jī)體內(nèi)分泌環(huán)境，與西醫(yī)學(xué)的助孕技術(shù)微觀治療相輔相成。中醫(yī)藥通過調(diào)整月經(jīng)周期、平衡陰陽、調(diào)理氣血、改善體質(zhì)狀態(tài)，滲透在輔助生殖的各個(gè)環(huán)節(jié)，在輔助生殖技術(shù)的領(lǐng)地與西醫(yī)相協(xié)而行，一則充實(shí)自身，二則輔助他人，共同促進(jìn)人類的生殖健康與進(jìn)步[4-5]。

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