林開顏 張 晉 殷 立 白 梅 石曉燕 樊永娜 王 蓉 張 華 趙學發(fā) 劉三都*

（貴州省黔南州人民醫(yī)院，貴州 黔南 558000）

全自動毛細管血紅蛋白電泳對育齡夫婦地中海貧血篩查的診斷價值

林開顏 張 晉 殷 立 白 梅 石曉燕 樊永娜 王 蓉 張 華 趙學發(fā) 劉三都*

（貴州省黔南州人民醫(yī)院，貴州 黔南 558000）

目的 探討全自動毛細管血紅蛋白電泳法對育齡夫婦地中海貧血篩查的診斷價值。方法 選取2014年6月至2016年3月參加黔南州地中海貧血防控試點縣級醫(yī)療機構送檢符合地中海貧血篩查對象的17936例育齡夫婦孕前標本，進行毛細管血紅蛋白電泳測試，觀察血紅蛋白的異常組分布情況，進行分型；同時與血液常規(guī)檢測、基因診斷比較分析。結果 地中海貧血電泳篩查表型陽性對象中，毛細管電泳對α-地中海貧血篩查陽性率顯著高于血常規(guī)篩查；對β-地中海貧血篩查陽性率與血常規(guī)篩查無顯著性差異。結論 全自動毛細管血紅蛋白電泳在地中海貧血篩查中有較高價值，尤其是對β-地中海貧血篩查的準確率高于血常規(guī)篩查，能夠為育齡夫婦孕前地中海貧血篩查提供可靠依據(jù)，值得推廣。

地中海貧血；血紅蛋白電泳測試；診斷價值

地中海貧血（以下簡稱地貧）即珠蛋白生成障礙，屬于遺傳性溶血性貧血疾病，發(fā)病機制在于遺傳基因缺陷，導致血紅蛋白（Hb）中的珠蛋白鏈合成缺損，最終使患者處于貧血狀態(tài)[1]。全自動毛細管電泳技術能準確分離Hb正常和異常組分，可為地中海貧血及Hb病提供可靠的診斷依據(jù)，全自動毛細管Hb電泳測試能夠迅速明確Hb的異常情況，因此在地中海貧血的診斷上具有重要作用。近年來發(fā)展迅速，是分離Hb組分的首選方法。本文選取我州地中海貧血試點送檢的育齡夫婦孕前血標本進行分析，探討其診斷價值，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取2014年6月至2016年3月參加黔南州地中海貧血防控試點縣級醫(yī)療機構送檢送檢符合地中海貧血篩查對象的17936例待生育夫婦血標本，進行血常規(guī)、Hb電泳測試，觀察Hb的異常組分布情況，并進行基因分型。

1.2 方法

1.2.1 采集靜脈血4 mL，分兩管于EDTA-K2的抗凝管中，一管在采血機構檢測血常規(guī)；另一管保存于2～8 ℃冰箱中，1周內(nèi)冷鏈包轉送至黔南自治州人民醫(yī)院檢驗科進行Hb電泳。血液學初步篩查由縣級醫(yī)療機構血細胞自動計數(shù)儀測定，包括平均紅細胞容積（MCV）測定和平均紅細胞Hb含量（MCH），血常規(guī)篩查地中海貧血陽性判斷標準為血常規(guī)MCV＜80 f和（或）MCH＜27 pg[2]。

1.2.2 Hb毛細管區(qū)帶電泳標本的采集及處理用一次性真空采血管（含EDTA K2抗凝劑）抽取人群靜脈空腹血液2～3 mL，搖勻抗凝，置于2～8 ℃冰箱冷藏，7 d內(nèi)檢測。電泳操作采用法國sebia公司Capilaiys2全自動毛細管電泳儀及配套試劑行Hb電泳，根據(jù)Hb成分，進行地中海貧血表型陽性的分型。質控品取SEBIA公司提供的正常HbA2作室內(nèi)質控物。參加年度廣西自治區(qū)臨床檢驗中心室間質量評價成績合格。Hb電泳正常參考值[3]成人男女HbA2為2.5%～3.5%，且未出現(xiàn)異常Hb帶。如出現(xiàn)HbA2＜2.5%，或出現(xiàn)異常Hb條帶（HbH、Bart’s），判為α-地中海貧血表型陽性；如出現(xiàn)HbA2＞3.5%，和（或）HbF≥5.0%，則判為β-地中海貧血表型陽性。若出現(xiàn)其他異常Hb區(qū)帶則判為異常Hb病。

1.2.3 基因診斷對于待生育夫婦篩查表型均為陽性者，單獨采集標本送貴州省人民醫(yī)院檢驗科臨床分子生物學實驗室進行基因診斷。

1.3 觀察項目和指標：兩種初篩方法檢測地中海貧血表型陽性率，地平表型陽性分型，地中海貧血表型陽性基因檢測。

1.4 統(tǒng)計學方法：分析軟件采用SPSS18.0版本，其中電泳測試結果作為計數(shù)資料，采用χ2檢驗，P＜0.05視為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 Hb電泳和血常規(guī)篩查結果：17936例待生育夫婦中，Hb電泳法共篩查出地中海貧血表型陽性2415例（13.5%），其中α-地中海貧血表型陽性1479例（8.3%），β-地中海貧血表型陽性936例（5.2%）；血常規(guī)篩查出地中海貧血表型陽性2558例（14.3%），Hb電泳陽性檢出率占血常規(guī)陽性檢出率的94.4%（P＞0.05）。

2.2 Hb電泳篩查α-地中海貧血、β-地中海貧血表型陽性與血常規(guī)篩查表型陽性比較：兩種檢測方法對比：Hb電泳法檢出的α-地中海貧血表型陽性1479例中，血常規(guī)篩查的地中海貧血表型陽性例數(shù)為983例，占Hb電泳陽性檢出率的66.5%，兩種篩查方法陽性檢出率有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；Hb電泳法檢出的β-地中海貧血表型陽性936例中，血常規(guī)篩查的地中海貧血表型陽性數(shù)為871例，占Hb電泳陽性檢出率的93.1%，兩種篩查方法陽性檢出率無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.3 Hb電泳篩查α-地中海貧血、β-地中海貧血表型陽性結果與基因檢測結果比較：在17936例待生育夫婦中，選取全自動毛細管Hb電泳法地中海貧血篩查夫婦表型雙陽152例患者行基因檢測。其中，α-地中海貧血表型陽性數(shù)為79例，基因確診45例，與基因診斷符合率為56.96%；β-地中海貧血表型陽性數(shù)為73例，基因確認72例，與基因診斷符合率為98.63%，另外4例為a復合β型地中海貧血。見表2。

表1 兩種初篩方法對α地中海貧血、β-地中海貧血篩查表型陽性結果的比較（n）

表2 Hb電泳與基因檢測對地中海貧血分型結果比較（n）

3 討 論

Hb電泳是地中海貧血篩查的最主要方法。臨床上分離Hb組分的應用方法有醋酸纖維膜電泳法、瓊脂糖凝膠電泳法、全自動毛細管電泳法及高效液相色譜（HPLC）法。醋酸纖維膜電泳法和瓊脂糖凝膠電泳法因樣本處理復雜，人工操作步驟繁瑣，耗時長，且分析靈敏度及重復性均不佳，以逐漸被淘汰；高效液相色譜（HPLC）法操作簡單，自動化程度高，但成本較高，在臨床上應用受到一定限制；全自動毛細管電泳法具有操作簡便、重復性好、省時、高效等特點，且能準確分離Hb正常及異常組分含量，能為地中海貧血的診斷提供重要依據(jù)[4-5]，臨床上應用較為廣泛。本研究通過對17936例待孕育齡夫婦血標本進行血常規(guī)和Hb電泳分析，血常規(guī)篩查出地中海貧血表型陽性2558例（14.3%），Hb電泳篩查出地中海貧血表型陽性2415例（13.5%），平行比較二者地中海貧血篩查陽性結果，發(fā)現(xiàn)血常規(guī)分析對地中海貧血表型陽性檢出率略高于Hb電泳法，Hb電泳陽性檢出率占血常規(guī)陽性檢出率的94.4%。本研究結果提示血常規(guī)分析在地中海貧血篩查中靈敏度高于Hb電泳技術。文獻報道[6]Hb電泳聯(lián)合血常規(guī)指標進行地中海貧血篩查具有更好的準確性和特異性，可提高地中海貧血篩查的準確率。Hb電泳與血常規(guī)篩查α-地中海貧血、β-地中海貧血表型陽性結果比較顯示，血常規(guī)檢測陽性者與α-地中海貧血符合率為66.5%（P＜0.05），具有統(tǒng)計學意義；與β-地中海貧血符合率93.1%（P＞0.05），無統(tǒng)計學意義。

本研究應用血常規(guī)分析及Hb電泳對地中海貧血篩查時發(fā)現(xiàn)，Hb電泳對α-地中海貧血篩查陽性符合率明顯低于β-地中海貧血陽性符合率，這可能與α-地中海貧血表型較復雜有關。本文選取的152例Hb電泳篩查表型陽性者的基因檢測結果顯示，對α-地中海貧血、β-地中海貧血確診符合率分別為56.96%、98.63%，Hb電泳技術對篩查β-地中海貧血的確診率明顯高于α-地中海貧血，與相關的報道相似[7]。其主要原因為由于某些小細胞低色素性貧血如Hb病、缺鐵性貧血等，可引起MCV、MCH及A2的下降，導致α-地中海貧血篩查假陽性升高。

文獻報道[8]Hb電泳對β-地中海貧血具有較高的檢出率，原因是由于一些靜止性α-地中海貧血患者其MCV、MCH及HbA2均正常，通過Hb電泳不能篩查出這些患者，故導致α-地中海貧血檢出率降低。提示如何進一步提高對α-地中海貧血篩查的準確率值得研究。

綜上所述，全自動毛細管Hb電泳技術具有操作簡單、快捷、高效等優(yōu)點，能較準確地進行地中海貧血的篩查，可以用于大規(guī)模人群篩查地中海貧血，對孕前育齡夫婦健康篩查中提供有關地中海貧血臨床診斷信息以及地中海貧血的遺傳咨詢、優(yōu)生優(yōu)育等方面具有重要臨床價值。

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R556

B

1671-8194（2016）34-0028-02

國家衛(wèi)計委地中海貧血防控試點項目（貴州）-國衛(wèi)辦婦幼函【2015】874號

*通訊作者：E-mail： liusandu@126.com