黃五平,李 江
(四川省自貢市中心血站,四川 自貢 643000)
丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、人類免疫缺陷性病毒(HIV),上述病原體主要經(jīng)血液傳播,故國外內(nèi)安全輸血領(lǐng)域為重要關(guān)注問題。輸血與采血機構(gòu)雖會對標本予以ELISA檢測抗-HCV、HBsAg、抗-HIV標志物,從而最大程度上降低傳播率,但因一般檢測劑存在窗口期,對于部分患者血液存在隱匿性或潛在期狀況,從而極易出現(xiàn)漏檢狀況發(fā)生。血液核酸檢測(NAT)屬于一種檢測核酸的方式,可有效縮短窗口期遺漏的問題,該方式已被廣大臨床、輸血采血機構(gòu)應用。
獻血者血液標本的質(zhì)量問題,一是:與相關(guān)人員疏忽并違背操作流程有關(guān);二是:與采血環(huán)境或采血器材有關(guān)。于檢驗工作中,需對檢測前血液標本質(zhì)量進行嚴格控制[1.2]。按相關(guān)的血液檢查前制度要求對獻血者做健康體檢、HBsAg、健康征詢等快速予以血液檢查,初期篩查合格的獻血者在前1天或者當天禁止飲酒或食高蛋白高脂飲食,若未嚴格遵循上述要求應暫時禁止獻血。
采集血液后,護士應于采血管上予以明確標示,同時,認真核對標本標簽、體檢標簽、血袋標簽。若標本發(fā)生溶血,紅細胞被破壞可釋放大量的血紅蛋白,其成分有鐵血紅素,可產(chǎn)生過氧化物酶物質(zhì),從而使ELISA呈假陽性結(jié)果,進而對抗Taq酶活性,PCR擴增效果顯著降低,導致顯示結(jié)果呈偏低現(xiàn)象[3.4]。血液屬于一種特殊成分,由各種血液物質(zhì)組構(gòu),血液需在規(guī)定正確條件下予以保存。如紅細胞可在2~6℃冷藏下可儲存1個月;血小板可于20~24℃環(huán)境下放置5天;新鮮冷凍血漿可于-18℃低溫環(huán)境中可放置1年,超出血液相應期限和儲存條件,血液會失去相應的用處。
真空無菌負壓管壓力過小、過大或不干燥、不潔凈,均可影響血液質(zhì)量;當壓力過小,可影響血液采集的量;當抗凝劑過少易導致標本發(fā)生凝血;分離膠式的真空無菌負壓管,其分離膠較不穩(wěn)定,故于夏季高溫中,可使血液核酸混樣;當真空式負壓管質(zhì)量較差時,在血液離心時,可能會導致采血管破裂。
核酸檢測對周圍環(huán)境敏感度極高,微小的污染就可導致檢驗失敗,從而浪費血液,故需加強血液標本實驗環(huán)境的控制。保持檢測環(huán)境的清潔,于各個實驗室的用品等備用工具,包括工作衣、一次性的帽子、口罩、鞋套、或防護服、無粉橡膠手套、鞋、等,應有明確標識,不可混用;配備相應防護器材,防止于檢測流程中細菌病毒感染。引起感染主要因素有其它污染、標本污染、設(shè)備污染,故需嚴格控制出入人員,減少實驗區(qū)內(nèi)走動次數(shù)、降低交叉污染發(fā)生率,檢測完成后需及時對實驗區(qū)以有效地清潔消毒和去污。
確保檢測工作過程的統(tǒng)一性,標本應符合檢測程序技術(shù)要求,在試劑使用時需嚴格按說明書要求進行,從而保證信息管理設(shè)備和系統(tǒng)運轉(zhuǎn)通暢。進行室內(nèi)質(zhì)控時,必須確保試劑貼有內(nèi)標,并保證試劑的放置符合要求,避免感染。同時,應用陰性對照,從而判定核酸實驗區(qū)有無污染;需保證每個檢測的批次有陽性對照,進而監(jiān)測提取核酸的有效性;且應積極參加衛(wèi)生委組織實驗室質(zhì)量的相關(guān)活動,以評判實驗的安全性與規(guī)范性。在完成核酸標本的采集后,必須在4個小時之內(nèi)進行離心處理,并于72小時之內(nèi)完成檢測。
采血護士需負責清點并收集血液標本,同時做好有關(guān)記錄,將采血管管口向上放置在試管架上的專用容器中。在運輸時,應減少標本振動,運輸后,應及時與檢驗科有關(guān)人員進行當面交接,雙方核對內(nèi)容包括標識、留樣量、標本數(shù)量是否保持清晰及規(guī)范完整,雙方核對無誤后應在交接單中簽字,若發(fā)現(xiàn)有疑問標本,需查找原因、加強溝通,防止出現(xiàn)問題。
國內(nèi)研究表明NAT技術(shù),用于獻血者中血液篩查可顯著縮短病毒窗口期,并有效提高輸血嚴格性和安全性,為此,為提高輸血及血液安全,NAT技術(shù)用于獻血者血液檢查中是可行和必要的。
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