韓海榮 王國芳 劉德全

中藥石連飲對肥胖大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)（LHA）神經(jīng)細胞自發(fā)放電的影響

韓海榮1王國芳2劉德全3

目的 探討中藥石連飲對肥胖大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)（LHA）神經(jīng)細胞自發(fā)放電的影響。方法 采用神經(jīng)細胞微電極記錄肥胖組和正常組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況；將肥胖組大鼠隨機分為石連飲組和純凈水組，觀察其LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況。結(jié)果 肥胖組LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電頻率高于對照組（P＜0．05），石連飲組低于純凈水組（P＜0．05）。結(jié)論 中藥石連飲能有效降低肥胖大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電的頻率。

石連飲；下丘腦；自發(fā)放電

隨著社會的發(fā)展及人們生活方式的轉(zhuǎn)變，肥胖人群體呈逐年增長趨勢。肥胖不僅降低了患者的生活質(zhì)量，而且也會引發(fā)糖尿病、高血壓等疾病，對患者生命構(gòu)成威脅。現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)［1］，肥胖病的發(fā)病與中樞神經(jīng)系統(tǒng)多種腦區(qū)的神經(jīng)細胞活動相關(guān)。國外有研究認為［2］，損傷LHA會引起大鼠厭食拒食，起到控制體重的作用。國內(nèi)研究顯示［3］：LHA神經(jīng)細胞放電頻率增高時，大鼠攝食量大增。本研究觀察石連飲對肥胖大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)（LHA）神經(jīng)細胞自發(fā)放電的影響，探討其對單純性肥胖的作用機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

肥胖大鼠制備選取1月齡剛斷乳的健康SD雄性大鼠250只（由徐州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供），體重60～100 g。其中200只大鼠使用高脂飼料（飼料配方：基礎(chǔ)飼料70%、蛋黃粉10%、豬油8%、奶粉5%，白砂糖5%、膽固醇2%）喂養(yǎng)，50只大鼠采用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)。持續(xù)喂養(yǎng)4個月后，從基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)大鼠中任意選出30只作為正常組，從高脂飼料喂養(yǎng)大鼠中選出體重超過正常組大鼠體重20%的120只作為肥胖組?；A(chǔ)飼料購自山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司動物中心提供，高脂飼料為實驗組自行配置。

1.2 方法

研究方法從肥胖組120只大鼠中任選30只大鼠和正常組大鼠檢測下丘腦外側(cè)區(qū)（LHA）神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況，并進行比較。將肥胖組剩余90只大鼠隨機分為石連飲組和純凈水組，每組45只，繼續(xù)采用高脂飼料喂養(yǎng)；同時，石連飲組采用石連飲（將飲片煎藥取汁，濃縮至生藥含量3.3 g/ml使用，12 g/kg）灌胃，純凈水組采用純凈水（12 g/kg）灌胃。用藥第3 d、第7 d、第14 d時，每組各取15只大鼠檢測LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況，并進行比較。

LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電頻率檢測對大鼠采用20%氨基甲酸乙酯（8 ml/kg）腹腔注射麻醉后，固定，插氣管，開顱暴露腦組織，去除腦硬膜。根據(jù)《Paxions＆Watson大鼠腦圖》［4］確定下丘腦外側(cè)區(qū)LH的位置，下丘腦外側(cè)區(qū)LH坐標為前囟后2.56 mm，用微電極操縱器將玻璃微電極插入LHA距腦表面深7 mm處引導(dǎo)神經(jīng)元放電，微電極引導(dǎo)的電信號經(jīng)放大器放大后，經(jīng)電腦神經(jīng)脈沖信號處理模塊轉(zhuǎn)換成脈沖信號，記錄電信號放電頻率［5］。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 肥胖組和正常組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況

正常組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電的平均頻率為（5.97± 1.85）Hz，肥胖組的平均放電頻率為（19.26±4.17）Hz，肥胖組大鼠LHA神經(jīng)細胞平均放電頻率高于正常組（P＜0.05）。

2.2 石連飲組和純凈水組大鼠實驗過程中日攝食量情況

用藥前，兩組大鼠的日攝食量接近（P＞0.05）；用藥第3 d、第7 d、第14 d中，石連飲組大鼠日攝食量逐漸減少，純凈水組則增加，且兩組大鼠的攝食量在用藥第3 d、第7 d、第14 d的3個時間段的差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 石連飲組和純凈水組大鼠實驗過程中日攝食量情況比較

表1 石連飲組和純凈水組大鼠實驗過程中日攝食量情況比較

組別 例數(shù)（n） 用藥前 用藥中第3 d 第7 d 第14 d石連飲組純凈水組30 30 t P 7．14±1．37 7．09±1．42 1．305 0．920 6．25±1．30 7．97±1．51 4．127 0．046 5．44±1．31 9．38±1．96 5．692 0．036 5．97±1．85 11．52±2．33 8．374 0．031

表2 石連飲組和純凈水組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況比較

表2 石連飲組和純凈水組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況比較

組別 例數(shù)（n） 用藥前 用藥中第3 d 第7 d 第14 d石連飲組純凈水組30 30 t P 19．20±4．35 19．56±4．42 0．973 1．285 17．00±4．30 20．04±4．51 4．623 0．041 12．63±3．27 19．87±4．46 7．145 0．033 6．85±2．14 21．14±4．40 12．089 0．005

2.3 石連飲組和純凈水組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電情況

用藥前，兩組大鼠的LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；用藥第3 d、第7 d、第14 d中，兩組大鼠的LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電頻率差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

3 討論

肥胖患者通常都有食欲旺盛、易饑餓等臨床特點，同時還伴有倦怠乏力、嗜睡寡言等癥狀，屬于中醫(yī)胃強脾弱范疇。中藥通過健脾、降低食欲和減少攝食量來達到減肥效果。方劑組成：麻黃、黃芪、黃連和石膏組成，君藥為石膏，辛甘大寒，可清胃熱；臣藥為黃連，性寒，可清胃熱、胃燥濕；佐藥為麻黃，味辛、溫，可發(fā)散胃中郁火；黃芪性味甘，微溫，補脾胃，治療“脾弱”。諸藥合用，即可消胃中火，又能健脾，從而實現(xiàn)治療肥胖的目的。嚴志康［6］等人的研究顯示，石連飲可以降低高脂血癥模型大鼠高敏CRP水平，升高高脂血癥模型大鼠脂聯(lián)素（ADPN）的水平，對肥胖病具較高的療效高，且無毒副作用。

國外Oomura［7］的研究表明，大鼠在饑餓的狀態(tài)時，LHA放電頻率升高。在本次研究中，肥胖組大鼠LHA神經(jīng)細胞平均放電頻率高于正常組（P＜0.05）。說明肥胖大鼠比正常大鼠更容易饑餓。在本次研究中，石連飲組大鼠日攝食量隨著用藥時間延長而減少，且低于純凈水組大鼠，說明石連飲的應(yīng)用使肥胖大鼠的攝食量得到有效控制。其內(nèi)在機制可能是：石連飲通過消除胃中邪火，補充脾胃之氣，從而降低肥胖患者食欲，使其攝食量得到有效控制［8］。本次研究還顯示：用藥第3 d、第7 d、第14 d中石連飲組大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電頻率低于純凈水組，說明使用石連飲的大鼠饑餓感下降，從而有利于控制食欲。

綜上，中藥石連飲可能通過有效降低肥胖大鼠LHA神經(jīng)細胞自發(fā)放電的頻率來減輕饑餓感，從而控制食欲來實現(xiàn)減肥的目的。

［1］ 劉志誠，孫鳳岷，韓燕，等． 針刺對肥胖大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)單胺類遞質(zhì)和ATP酶活性的影響［J］． 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2000，20（7）：521．

［2］ Anand BK，Brobeck JR． Hypothalamic con t rol of f ood in take in rats and cats［J］． Yal e J Biol Med，2009，24（5）：123-128．

［3］ 杜永平，張月萍，胡三覺，等． 運脾復(fù)方對幼齡厭食大鼠下丘腦外側(cè)區(qū)和腹內(nèi)側(cè)區(qū)神經(jīng)元自發(fā)放電的影響［J］． 神經(jīng)解剖學(xué)雜志，2012，28（2）：183-186．

［4］ 隋汝波，李熙東，賈媛媛，等． 電刺激大鼠小腦頂核對下丘腦神經(jīng)元放電活動的影響［J］． 神經(jīng)解剖學(xué)雜志，2010，26（6）：599-603．

［5］ 徐放明，劉志誠． 針刺對2型糖尿病大鼠弓狀核神經(jīng)細胞自發(fā)放電的影響［J］． 針刺研究，2013，28（1）：26-29．

［6］ 嚴志康，楊智杰． 石連飲對高脂血癥大鼠血脂、超敏 C 反應(yīng)蛋白、脂聯(lián)素的調(diào)節(jié)作用［J］． 湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2014，16（3）：12-14．

［7］ Oomura Y，Ono T，Ooyama H，et al． Glucose and osmosensitiveneurones of the rat hypothalamus［J］． Nature，1969，222（5190）：282-284．

［8］ 劉德全，劉翠，朱凡河，等． 中藥石連飲對肥胖大鼠瘦素、胰島素及神經(jīng)肽Y 的影響［J］． 臨床研究，2016，24（4）：24-25．

Effects of Shilianyin on Spontaneous Discharges of Neurons in the Lateral Hypothalamic Area（LHA）in Obese Rats

HAN Hairong1WANG Guofang2LIU Dequan3
1 Teaching Office，Affiliated Luoyang Central Hospital of Zhengzhou University，Luoyang He'nan 471000，China，2 Pharmacology Teaching and Research Section，Ji'ning Medical University，Ji'ning Shandong 272069，China，3 Third Ward of Neurology Department，Affiliated Luoyang Central Hospital of Zhengzhou University，Luoyang He'nan 471000，China

Objective To investigate the effects of traditional Chinese medicine（TCM）shilianyin on spontaneous discharges of neurons in the lateral hypothalamic area（LHA）in obese rats． Methods The obese rats were randomly divided into shilianyin group and pure water group，to observe the neuronal spontaneous discharge in LHA situation． Results The frequency of spontaneous discharge of LHA nerve cells in pure water group was significantly higher than shilianyin group（P＜0．05），and the shilianyin group was significantly lower than that of pure water group（P＜0．05）．Conclusion The frequency of spontaneous discharge of LHA neurons in obese rats could be decreased by the shilianyin．

Shilianyin，Hypothalamus，Spontaneous discharge

R-33

A

1674-9316（2016）23-0181-02

10．3969/j．issn．1674-9316．2016．23．099

山東省教育廳項目（課題名稱：石連飲抑制食欲作用的機理研究；課題編號：J06L58）

1 鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院教學(xué)辦，河南 洛陽 471000

2 山東省濟寧醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，山東 濟寧 272069

3 鄭州大學(xué)附屬洛陽中心醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)三區(qū)，河南 洛陽 471000

劉德全，E-mail：27509124@qq．com