鄭艷玲 洪 強(qiáng) 王前明
1例少見(jiàn)同時(shí)攜帶IgM和IgG型Lewis血型抗體病例報(bào)道
鄭艷玲1洪 強(qiáng)1王前明2
目的 鑒定孕婦血清中不規(guī)則抗體的特異性,測(cè)定抗體效價(jià),評(píng)價(jià)患者妊娠的預(yù)后和安全性。方法 采用鹽水法、聚凝胺法、抗人球蛋白法分別對(duì)血清標(biāo)本進(jìn)行抗體篩查試驗(yàn)、不規(guī)則抗體鑒定試驗(yàn)、血型鑒定試驗(yàn)及抗體效價(jià)測(cè)定。結(jié)果 該標(biāo)本血清抗體篩查試驗(yàn)陽(yáng)性,經(jīng)鑒定為抗-Lea抗體,4℃效價(jià)2,室溫效價(jià)1,37℃效價(jià)1,抗人球法的抗體效價(jià)<1。結(jié)論 該孕婦血清中同時(shí)攜帶IgM和IgG性質(zhì)的抗-Lea抗體,有可能引起新生兒溶血病,應(yīng)引起臨床足夠重視,采取相應(yīng)的預(yù)防措施,確保安全成功分娩。
孕婦;IgM;IgG;Lewis抗體
Lewis血型抗原不在紅系合成,是組織當(dāng)中血型物質(zhì)的一種。該物質(zhì)在人體分布比較廣泛,鞘糖脂的吸附作用是Lewis抗原的主要來(lái)源[1-2]。Lewis血型系統(tǒng)主要有Lea和Leb兩個(gè)抗原,國(guó)際輸血協(xié)會(huì)命名為L(zhǎng)E(ISBT007),包括四種表型,分別為L(zhǎng)e(a-b-)、Le(a-b+)、Le(a+b-)、Le(a+b+)。Lewis血型系統(tǒng)的抗體絕大多數(shù)為IgM型,含有這種抗體的人群Lewis分型主要為L(zhǎng)e(a-b-)[3],同時(shí)檢出IgM和IgG型Lewis血型抗體目前報(bào)道不多。筆者在1名孕婦產(chǎn)前檢查時(shí)發(fā)現(xiàn)其血清中存在IgM和IgG型Lewis血型抗體,現(xiàn)報(bào)告如下。
1.1 研究對(duì)象
患者31歲,漢族,孕3產(chǎn)0,既往無(wú)輸血史,藥物史不詳,現(xiàn)懷孕20周,進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)前檢查。
1.2 材料
十六系譜細(xì)胞(荷蘭Sanquin,批號(hào)8000227401);抗人球蛋白試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限公司,批號(hào)20155001);抗球蛋白卡(瑞士DiaMed,批號(hào)50531.04.05);三系抗篩細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限公司,批號(hào)20167010);抗Lea標(biāo)準(zhǔn)血清(荷蘭Sanquin,批號(hào)8000217628);抗Leb標(biāo)準(zhǔn)血清(荷蘭Sanquin,批號(hào)8000208620);聚凝胺(Poly)試劑(上海血液制品有限公司,批號(hào)20157504);離心機(jī)(日本KUBUTA KA-2200)。全部測(cè)試均按操作規(guī)程[4]進(jìn)行。試劑均在有效期內(nèi)。
1.3 方法
1.3.1 抗篩試驗(yàn) 在4℃和室溫條件下,該孕婦血清與三系抗篩細(xì)胞及自身細(xì)胞分別在鹽水與聚凝胺兩種介質(zhì)中反應(yīng),以確定其血清中是否含有不規(guī)則抗體,并初步鑒定。
1.3.2 不規(guī)則抗體鑒定 該孕婦血清與16系譜細(xì)胞及自身細(xì)胞在鹽水、抗人球蛋白介質(zhì)中反應(yīng),進(jìn)行抗體鑒定;經(jīng)2-巰基乙醇(2-Me)處理后與16系譜細(xì)胞及自身細(xì)胞在鹽水、抗人球介質(zhì)中反應(yīng),進(jìn)行IgG型抗體鑒定。
1.3.3 Lewis血型鑒定 用抗Lea、抗Leb標(biāo)準(zhǔn)血清鑒定患者Lewis血型,并選擇16系譜細(xì)胞中的Le(a-b+)及Le(a+b-)細(xì)胞分別作陰、陽(yáng)對(duì)照。
1.3.4 抗體效價(jià)測(cè)定 先將孕婦血清用生理鹽水倍比稀釋,然后從譜細(xì)胞中選擇Le(a+b-)的O型紅細(xì)胞與之反應(yīng),放入4℃冰箱內(nèi)10 min以檢測(cè)抗體4℃效價(jià);放置于室溫15 min以檢測(cè)抗體室溫效價(jià);放37℃水浴箱中3 min,以檢測(cè)抗體37℃效價(jià)。血清經(jīng)過(guò)2-Me滅活后,用經(jīng)典抗人球法檢測(cè)效價(jià)。
2.1 抗體篩查
對(duì)照三系抗篩細(xì)胞反應(yīng)的格局,該患者抗篩陽(yáng)性,血清中可能含有抗-Lea抗體,見(jiàn)表1。
2.2 不規(guī)則抗體鑒定
該孕婦血清與16系譜細(xì)胞在鹽水介質(zhì)中出現(xiàn)凝集,在4℃條件下凝集增強(qiáng)且格局與抗-Lea相符,說(shuō)明患者血清中含有IgM性質(zhì)的抗-Lea抗體;孕婦血清經(jīng)過(guò)2-Me滅活后,與16系譜細(xì)胞在抗人球卡上反應(yīng)的格局與抗-Lea相符,說(shuō)明該孕婦體內(nèi)含有IgG性質(zhì)的抗-Lea抗體,見(jiàn)表2。
2.3 Lewis血型鑒定
孕婦Lewis血型為L(zhǎng)e(a-b-)。
2.4 抗-Lea抗體效價(jià)檢測(cè)
孕婦血清中抗-Lea抗體4℃效價(jià)2,室溫效價(jià)1,37℃效價(jià)1,抗人球法的抗體效價(jià)<1。
Lewis血型抗原溶解于血漿中,被吸附到紅細(xì)胞表面,并表現(xiàn)為相應(yīng)的血型,該系統(tǒng)的抗體效價(jià)不高,親和力較低,所以經(jīng)常漏檢???Lea以IgM型抗體為主,很少引起嚴(yán)重的輸血反應(yīng)[5],主要原因是在37℃時(shí),IgM型的Lewis抗體無(wú)活性;此外,獻(xiàn)血者血液輸入到受者體內(nèi)以后,其紅細(xì)胞上的Lewis抗原會(huì)放散到血漿中,中和受血者血漿中的Lewis抗體。近年,也有報(bào)道認(rèn)為這種抗體可以結(jié)合補(bǔ)體,造成嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)[6-7]???Lea抗體只存在于Le(a-b-)的表型中,而表現(xiàn)型為L(zhǎng)e(a-b+)時(shí),不產(chǎn)生Lea抗體,這可能是由于血漿中含有少量Lea可溶性抗原中和所致[1]。本例患者的Lewis血型分型為L(zhǎng)e(a-b-),與上述觀點(diǎn)相符。
表1 抗體篩查試驗(yàn)反應(yīng)格局
表2 抗體鑒定試驗(yàn)反應(yīng)格局
本例患者為孕婦,懷孕期間由于血漿中脂蛋白濃度增加,較多的Lewis抗原決定簇吸附到血漿脂蛋白上,吸附到紅細(xì)胞表面上的則相應(yīng)較少[3],孕婦可短暫地出現(xiàn)Le(a-b-)表現(xiàn)型,從而導(dǎo)致Lewis抗體的產(chǎn)生。孕婦血清中存在IgG型抗體與否,以及其效價(jià)的高低,對(duì)于判斷是否發(fā)生新生兒溶血?。℉DN)具有重要的意義。孕婦血清中存在IgG類的紅細(xì)胞抗體時(shí),只要胎兒紅細(xì)胞具有相應(yīng)抗原,都可能發(fā)生HDN。因此,在檢出血清中含有抗-Lea抗體后,筆者又通過(guò)2-Me滅活I(lǐng)gM抗體的方法以確定孕婦體內(nèi)是否存在IgG型抗-Lea抗體,滅活后的血清與譜細(xì)胞的反應(yīng)格局與抗-Lea相符,證實(shí)了該孕婦體內(nèi)存在IgG型的抗-Lea抗體。
Lewis抗原只存在于胎兒分泌液中,一般不存在紅細(xì)胞上,因此抗-Lea抗體較少引起嚴(yán)重的HDN[3],但也有IgG型的抗-Lea抗體引起輕度新生兒溶血病的報(bào)道[8]。該患者血清中存在少見(jiàn)的IgG性質(zhì)的Lewis抗體,在37℃有活性,可通過(guò)胎盤,有可能引起HDN。同時(shí),鑒于該患者已經(jīng)流產(chǎn)3次,從已掌握的臨床資料并不能排除是由IgG型的抗-Lea抗體引起,所以應(yīng)該對(duì)該抗體引起重視。該孕婦孕20周,從效價(jià)檢測(cè)結(jié)果分析,孕婦體內(nèi)的抗-Lea抗體效價(jià)不高,但在懷孕后期孕婦體內(nèi)抗體效價(jià)升高較快,因此一定要隨訪監(jiān)測(cè)效價(jià)。本病例在孕28周隨訪時(shí),37℃抗體效價(jià)為4,已有升高,但胎兒未見(jiàn)異常,后期還應(yīng)縮短隨訪間隔周期繼續(xù)監(jiān)測(cè),如有胎兒溶血及時(shí)治療。此外,還需要引起注意的是,母體內(nèi)IgG抗體效價(jià)的高低與新生兒溶血病嚴(yán)重程度之間的關(guān)系并不緊密,還有許多其它影響因素,比如新生兒紅細(xì)胞上吸附Lewis抗原的多少、IgG亞類、胎盤的作用等。目前,新生兒溶血病的預(yù)防與治療方法主要有大劑量注射丙種球蛋白、口服茵陳沖劑治療、血漿置換、宮內(nèi)輸血等,可根據(jù)具體情況來(lái)選擇合理的治療方法。
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One Case of Pregnant Woman Detected With Lewis Blood Group Antibody of IgM and IgG
ZHENG Yanling1HONG Qiang1WANG Qianming2
1 The Department of Blood Transfusion,The First Affiliated Hospital of Xiamen Universyity,Xiamen Fujian 361003,China,2 Department of Laboratory
Objective To identify the specificity of antibody in the serum of pregnant. Methods Antibody screening test,irregular antibody identification test,blood type identification test and antibody titer determination have been performed on the samples of serum of pregnant. Results The result of serum antibody screening test is positive and after identification,it is anti-Leaantibody with 4℃ titer at 2,room temperature titer at 1,37℃ titer at 1 and antibody titer of comb test is smaller than 1. Conclusion There is anti-Leaantibody with IgG property in the serum of this pregnant with low antibody titer,but it should be emphasized during clinical to ensure successful birth.
Pregnant,IgM,IgG,Lewis antibody
R331
A
1674-9316(2016)23-0172-03
10.3969/j.issn.1674-9316.2016.23.095
1 廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科,福建 廈門 361003;2 檢驗(yàn)科
王前明,E-mail:jeany702319@163.com