■楊仕群趙延斌陽 剛舒 剛*

（1.宜賓職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川宜賓 644003;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，四川成都 611130）

藍(lán)孔雀為半草性非保護(hù)動(dòng)物，集食用、觀賞、保健為一體，可以商品化飼養(yǎng)，具開發(fā)價(jià)值。藍(lán)孔雀肉的蛋白質(zhì)含量為28%，脂肪約為1%，富含十幾種氨基酸及多種維生素[1]。藍(lán)孔雀國(guó)內(nèi)的養(yǎng)殖企業(yè)不多，全國(guó)僅有少數(shù)幾個(gè)省、市引種，養(yǎng)殖存欄不足8萬只，不能滿足市場(chǎng)需求，開發(fā)前景廣闊。藍(lán)孔雀養(yǎng)殖存在著飼料轉(zhuǎn)化率低、免疫能力低，幼雛成活率低等方面的問題。

竹葉黃酮為竹葉提取物的主要活性成分，是一種天然抗氧化劑，具有類似超氧化物歧化酶與谷胱甘肽過氧化物酶的作用。竹葉中黃酮類化合物含量豐富，平均含量在2%左右。而據(jù)研究發(fā)現(xiàn)，黃酮類化合物能增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的非特異免疫功能和體液免疫功能，可以通過影響巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞（NK）、LAK細(xì)胞、細(xì)胞因子以及胸腺來進(jìn)行免疫調(diào)節(jié)。竹葉黃酮屬于黃酮類化合物，也具有免疫調(diào)節(jié)作用并被證實(shí)。黃芩中的化學(xué)成分主要為黃酮類成分，從黃芩中獲得黃酮和黃酮醇類化合物四十多種，黃酮類成分是其發(fā)揮藥理活性的基礎(chǔ)，其中黃芩苷、黃芩素、漢黃芩苷和漢黃芩素是最主要的活性成分。

竹葉黃酮和黃芩苷作為植物提取物都具有清除自由基、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化、抗菌、抗癌等作用[2-3]。我國(guó)對(duì)竹葉黃酮和黃芩苷的藥理作用的研究雖然很多，但是在對(duì)孔雀生長(zhǎng)性能的應(yīng)用研究鮮見報(bào)道。本試驗(yàn)擬選擇藍(lán)孔雀幼雛為試驗(yàn)動(dòng)物，旨在觀察竹葉黃酮和黃芩苷對(duì)其生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)的影響，其結(jié)果可為竹葉黃酮和黃芩苷在藍(lán)孔雀養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

1日齡雌性藍(lán)孔雀幼雛45只(由邛崍孔雀園提供)。

1.1.2 藥物配方

含量為85%竹葉黃酮（由西安四季生物科技有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào)20150221）；含量為85%黃芩苷（由北京生泰爾生物科技有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào)20150221）。

1.1.3 藥品及試劑

總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶（CAT）生化試劑盒均由南京建成生物公司提供。

1.1.4 主要試驗(yàn)儀器

Thermo706超低溫冰箱、SAF-680T酶標(biāo)儀、T200電子天平、DT5離心機(jī)、動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)備。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物分組與處理

將45只一日齡雌性藍(lán)孔雀，隨機(jī)分為3組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5只。第1組飼喂添加0.5%竹葉黃酮的基礎(chǔ)日糧，第2組飼喂添加0.5%黃芩苷的基礎(chǔ)日糧，第3組飼喂基礎(chǔ)日糧作為空白對(duì)照組。本試驗(yàn)的孔雀在相同環(huán)境的舍籠中飼養(yǎng)，自由采食和飲水，舍內(nèi)溫度、濕度與光照等按照常規(guī)飼養(yǎng)管理要求進(jìn)行，在整個(gè)試驗(yàn)期進(jìn)行常規(guī)的防疫和衛(wèi)生消毒，試驗(yàn)期28 d。

1.2.2 日糧

采用玉米-豆粕型粉狀基礎(chǔ)日糧，由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)育禽場(chǎng)提供?；A(chǔ)日糧的組成和營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.2.3.1 體重及采食量的測(cè)定

試驗(yàn)期第1、7、14、21、28 d早晨用電子天秤空腹稱量全體孔雀幼雛的體重，稱重前空腹8 h，同時(shí)每天記錄余料量。計(jì)算各重復(fù)試驗(yàn)孔雀幼雛的平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.2.3.2 血樣的采集

試驗(yàn)期第14、28 d清晨喂料前，對(duì)全體試驗(yàn)孔雀幼雛進(jìn)行采集翅下靜脈血液，每只孔雀5 ml，分裝于干凈采血管中，立即放入37℃恒溫箱中，斜放靜置2 h，離心(4 000 r/min)15 min，分離出血清于-20℃保存待測(cè)。

1.2.3.3 血清生化指標(biāo)

總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶（CAT）按試劑盒說明操作。

1.2.3.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

用Excel 2003初步整理試驗(yàn)數(shù)據(jù)后，統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS 19.0進(jìn)行單因素方差分析，試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，多重比較采用Duncan's法，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛體重的影響（見表2）

表2 藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛體重的影響（g）

由表2可知，第1 d對(duì)照組與竹葉黃酮組和黃芩苷組無顯著性差異(P＞0.05)；第7、14、21、28 d竹葉黃酮組和黃芩苷組體重顯著高于于對(duì)照組(P＜0.05)。

2.2 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛日增重的影響（見表3）

表3 藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛日增重的影響（g）

由表3可知，1～2周竹葉黃酮組和黃芩苷組日增重與對(duì)照組無顯著性差異(P＞0.05)；3～4周竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；整個(gè)試驗(yàn)期1～4周平均日增重竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

2.3 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛日采食量的影響(見表4)

表4 藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛日采食量的影響（g）

由表4可知，1～2周竹葉黃酮組和黃芩苷組的采食量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；3～4周竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；1～4周竹葉黃酮組和黃芩苷組顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

2.4 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛料重比的影響（見表5）

表5 藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛料重比的影響

由表5可知，1～2周竹葉黃酮組與黃芩苷組藍(lán)孔雀幼雛料重比顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)；3～4周竹葉黃酮組和黃芩苷組藍(lán)孔雀幼雛料重比顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)；1～4周竹葉黃酮組與黃芩苷組藍(lán)孔雀幼雛料重比顯著低于對(duì)照組(P＜0.05)。

2.5 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛抗氧化血清生化指標(biāo)的影響（見表6）

表6 藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛血清抗氧化生化指標(biāo)的影響(U/ml)

由表6可知，2周時(shí)，竹葉黃酮組和黃芩苷組總抗氧化能力略高于對(duì)照組(P＞0.05)；竹葉黃酮組的超氧化物歧化酶指數(shù)顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，黃芩苷組顯著高于竹葉黃酮組和對(duì)照組(P＜0.05)；竹葉黃酮組和黃芩苷組過氧化氫酶指數(shù)略高于對(duì)照組(P＞0.05)。4周時(shí)，竹葉黃酮組和黃芩苷組總抗氧化能力顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)；竹葉黃酮組的超氧化物歧化酶活性顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)，黃芩苷組顯著高于竹葉黃酮組和對(duì)照組(P＜0.05)；竹葉黃酮組和黃芩苷組的過氧化氫酶活性顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。

3 討論

3.1 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛生長(zhǎng)性能的影響

竹葉黃酮具有清除自由基、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、調(diào)節(jié)血脂、抗氧化、抗菌、抗病毒、抗衰老、抗癌和保護(hù)肝臟等功效[4]；竹葉黃酮的特性符合人們對(duì)天然抗氧化劑的追求，已被用作多功能食品和綠色飼料添加劑、膳食補(bǔ)足劑[5]，竹葉黃酮在提取工藝及抗氧化組分等有效成分方面的研究較多，小動(dòng)物研究主要集中在抗輻射、抗氧化、抗衰老、抗疲勞、增強(qiáng)免疫力功能[2]，以及對(duì)心、腦血管藥理活性和肝損傷的保護(hù)作用，腸道的吸收動(dòng)力學(xué)[6]等。黃芩苷具有廣譜抗菌、抗炎、抗細(xì)菌生物膜、清除氧自由基及抗氧化、抗腫瘤、抗病毒等作用[7]。動(dòng)物生長(zhǎng)性能的體現(xiàn)在日增重、飼料轉(zhuǎn)化率等方面[8]。用竹葉黃酮和黃芩苷飼喂藍(lán)孔雀幼雛后，在一定程度上促進(jìn)了藍(lán)孔雀的消化吸收能力，提高飼料轉(zhuǎn)化率，從而提高了孔雀的生長(zhǎng)性能。

3.2 日糧中添加藥物對(duì)藍(lán)孔雀幼雛血清抗氧化生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)中抗氧化能力、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶是評(píng)價(jià)禽類最主要的抗氧化能力指標(biāo)。超氧化物歧化酶為自由基清除劑，是有效的抗衰老制劑，是一種廣泛存在于動(dòng)植物、微生物中的金屬酶，含有銅和鋅兩種離子，需氧[9]。SOD能清除具有毒性而損壞細(xì)胞的超氧陰離子自由基(致衰老物質(zhì))[10]，提高免疫力，使機(jī)體免受炎癥、腫瘤的侵犯，而延緩機(jī)體的衰老[11]；能催化生物體內(nèi)超氧自由基(·O2-)發(fā)生歧化反應(yīng)，從而清除·O2-，在生物體的自我保護(hù)系統(tǒng)中起著極為重要的作用，是機(jī)體內(nèi)·O2-的天然消除劑[12]。在免疫系統(tǒng)中也有極為重要的作用。過氧化氫酶是一種酶類清除劑，又稱為觸酶，是以鐵卟啉為輔基的結(jié)合酶，存在于細(xì)胞的過氧化物體內(nèi)[13]。它可催化H2O2分解成氧和水的酶，清除體內(nèi)的H2O2[14]，從而使細(xì)胞免于遭受H2O2的毒害，是生物防御體系的關(guān)鍵酶之一[15]。過氧化氫酶存在于所有已知的動(dòng)物的各個(gè)組織中，特別在肝臟中以高濃度存在；過氧化氫酶是過氧化物酶體的標(biāo)志酶，約占過氧化物酶體酶總量的40%[16]。一般認(rèn)為，以上三項(xiàng)指標(biāo)的提高是由于其自身組織細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育和分裂增殖所導(dǎo)致[17]，是機(jī)體抗氧化能力增強(qiáng)和免疫功能增強(qiáng)的表現(xiàn)；指標(biāo)數(shù)據(jù)的降低是免疫抑制所致，表明機(jī)體的免疫狀況變差，抗氧化能力下降?？寡趸芰χ笖?shù)的提高表明組織細(xì)胞老化速度慢，抗氧化能力增強(qiáng)，免疫力增強(qiáng)[18]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，相對(duì)于對(duì)照組，竹葉黃酮組和黃芩苷組的抗氧化指數(shù)均不同程度有所提高，說明竹葉黃酮和黃芩苷在一定程度上有增強(qiáng)藍(lán)孔雀幼雛抗氧化能力的作用。

4 結(jié)論

在飼料中添加0.5%竹葉黃酮和黃芩苷，可以提高提高藍(lán)孔雀幼雛的生長(zhǎng)性能，并能改善血清中的抗氧化性能。