邱小蘭，韓學(xué)東，施建華，任 毅

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院甲乳外科，江蘇 南京 223399)

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GDF3聯(lián)合檢測(cè)血清PSA與MUC1蛋白水平對(duì)乳腺癌診斷的臨床意義①

邱小蘭，韓學(xué)東，施建華，任 毅

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院甲乳外科，江蘇 南京 223399)

目的：探討GDF3聯(lián)合檢測(cè)血清PSA與MUC1蛋白水平對(duì)乳腺癌診斷的臨床意義。方法：選取2013年3月至2014年12月于甲乳外科已確診為乳腺癌的患者50例作為乳腺癌組；同期選取在我院住院的乳腺良性疾病患者50例作為乳腺良性疾病組；同期選取在我院體檢中心體檢的健康女性50例作為正常組。通過(guò)檢測(cè)兩組血清GDF3、PSA、MUC1和腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)水平，對(duì)比分析其敏感度、特異度和準(zhǔn)確度。結(jié)果：乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平均高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，CA15-3、CA125、CEA表達(dá)水平均高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；PSA+MUC1兩兩檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度均高于其他兩組(P<0.05)；血清GDF3、PSA、MUC1三者聯(lián)合其敏感度、特異度、準(zhǔn)確度高于1單項(xiàng)檢測(cè)以及兩兩檢測(cè)，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論：GDF3聯(lián)合檢測(cè)PSA和MUC1對(duì)乳腺癌的早期診斷更有確診意義。

乳腺癌； GDF3； PSA； MUC1； 腫瘤標(biāo)志物

據(jù)世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究中心發(fā)布數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，2008年全球女性乳腺癌新診斷病例約138.4萬(wàn)例，死亡45.9萬(wàn)例，且近年來(lái)其發(fā)病率呈年輕化及升高趨勢(shì)[1]。人生長(zhǎng)分化因子3(growth differentiation factor 3，GDF3)是轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)中的重要成員，研究發(fā)現(xiàn)其與脂肪生成、早期胚胎發(fā)育有重要關(guān)系，還在在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用[2]。目前尚未見(jiàn)到GDF3聯(lián)合檢測(cè)血清PSA與MUC1蛋白水平診斷乳腺癌，因此，本研究通過(guò)聯(lián)合檢測(cè)上述指標(biāo)，為乳腺癌的早期診斷尋求一種更好的方法。

1 資料與方法

1.1 臨床資料:收集本院甲乳外科2013年08月至2014年12月確診為乳腺癌的患者50例，乳腺良性疾病50例，同時(shí)隨機(jī)選取在我院體檢健康的50例正常人。研究對(duì)象均為女性，年齡45～70歲。乳腺癌組年齡45～69歲，平均58.24±6.46歲，二期29例，三期21例。乳腺良性疾病組年齡46～70歲，平均57.93±6.85歲，乳腺增生11例，乳腺纖維瘤26例，乳腺囊腫13例。正常人組年齡45～70歲，平均年齡57.84±6.79歲，為正常體檢患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)我國(guó)《中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范(2011版)》[3]。②乳腺癌患者自發(fā)病以來(lái)未進(jìn)行系統(tǒng)的化療、放療等治療；③患者及家屬志已簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重的心、肝、腎功能不全；②合并心肌梗死、心力衰竭者；③合并白血病等嚴(yán)重的原發(fā)疾病；④患有精神疾病，無(wú)法配合實(shí)驗(yàn)的患者。

1.2 研究方法:所有研究對(duì)象均在清晨空腹采集4mL肘靜脈血，若有研究對(duì)象需進(jìn)行乳腺手術(shù)，則在術(shù)前采集靜脈血。將靜脈血裝入未加抗凝劑的采血管中，靜置于室溫下20min，將采血管按3000r/min離心10min，待離心結(jié)束后將上層血清用Ependorff管裝入EP管中，每管0.5～1mL，分別編碼，放入-80℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.3.1 GDF3、PSA與MUC1采用雙抗體夾心法檢測(cè)患者血清GDF3、PSA與MUC1濃度水平。分次將GDF3、PSA與MUC1加入相應(yīng)抗體免疫實(shí)驗(yàn)微孔板，使其與HRP標(biāo)記的相應(yīng)抗體結(jié)合進(jìn)而形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，加底物TMB顯色，并不斷實(shí)現(xiàn)顏色的變化。采用全自動(dòng)酶標(biāo)儀測(cè)定標(biāo)本血清中的GDF3、PSA、MUC1濃度的吸光度(OD值)，最終通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線精確計(jì)算標(biāo)品中的GDF3、PSA、MUC1濃度。

1.3.2 PCA15-3、CA125與CEA:本研究采用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)所有研究對(duì)象血清中PCA15-3、CA125與CEA的濃度。采用有分離膠的真空管收集患者血清，將樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品在室溫(20℃左右)下平衡后并放置于ROCHE E601電化學(xué)分析儀的試劑盤(pán)內(nèi)在2h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.3.3 敏感度、特異度與準(zhǔn)確度的計(jì)算方法[4]:敏感度=真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性+假陰性)×100%；特異度=真陰性/(真陰性十假陽(yáng)性)×100%；準(zhǔn)確度=(真陽(yáng)性+真陰性)/(真陽(yáng)性+真陰性+假陽(yáng)性+假陰性)×100%

2 結(jié) 果

2.1 三組血清GDF3、PSA、MUC1水平比較:本研究顯示，乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平均高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；良性乳腺疾病組和正常組血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

表1 三組患者血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平比較

注：*P<0.05，與乳腺癌組比較 compared with breast cancer group；#P>0.05，與正常組比較 compared with control group

2.2 三組血清腫瘤標(biāo)志物水平比較:本研究中，乳腺癌組血清CA15-3、CA125、CEA水平高于良性乳腺疾病組和正常組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；良性乳腺疾病組和正常組血清CA15-3、CA125、CEA水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表2 三組血清腫瘤標(biāo)志物單項(xiàng)檢測(cè)比較

注：*P<0.05，與乳腺癌組比較 compared with breast cancer group

2.3 乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度情況:本研究顯示，乳腺癌組血清GDF3、PSA、MUC1單項(xiàng)檢測(cè)，其敏感度依次為：PSA>MUC1>GDF3，特異度依次為：MUC1>PSA>GDF3，準(zhǔn)確度依次為：PSA>MUC1>GDF3。見(jiàn)表3。

2.4 血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平聯(lián)合檢測(cè)其敏感度、特異度、準(zhǔn)確度情況:本研究顯示，血清GDF3、PSA、MUC1兩兩聯(lián)合檢測(cè)，PSA+MUC1的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度均高于其他兩組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；血清GDF3、PSA、MUC1三者聯(lián)合其敏感度、特異度、準(zhǔn)確度高于單項(xiàng)檢測(cè)以及兩兩檢測(cè)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表3 血清GDF3 PSA MUC1表達(dá)水平的敏感度特異度準(zhǔn)確度情況n(%)

表4 血清GDF3、PSA、MUC1聯(lián)合檢測(cè)其敏感度、特異度、準(zhǔn)確度情況n(%)

注：*P<0.05，與GDF3+PSA、MUC1+GDF3比較 Compared with GDF3+PSA and MUC1+GDF3;#P<0.05，與與GDF3+PSA、PSA+MUC1及MUC1+GDF3比較 Compared with GDF3+PSA ,PSA+MUC1 and MUC1+GDF3

3 討 論

本研究通過(guò)對(duì)乳腺癌患者、乳腺良性疾病患者以及正常人群血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平的聯(lián)合檢測(cè)，以判斷其對(duì)乳腺癌的早期診斷的特異性和靈敏度，為乳腺癌的早期診斷尋求一種更好的方法。

研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組PSA表達(dá)水平明顯高于其他兩組，可見(jiàn)PSA水平的升高與乳腺組織的惡變有重要關(guān)系，乳腺良性疾病患者血清PSA表達(dá)雖然高于對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，PSA水平隨乳腺癌的臨床分期加重，其水平也顯著降低，在本實(shí)驗(yàn)中并未進(jìn)行此方面研究。

上述表3可以看出，GDF3、PSA、MUC1兩兩檢測(cè)其敏感度、特異度和準(zhǔn)確度明顯優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)，其中PSA+MUC1聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度均高于其他兩組，提示PSA和MUC1的高度表達(dá)與乳腺癌相關(guān)性較大。表4提示，GDF3、PSA、MUC1三者聯(lián)合檢測(cè)其敏感度、特異度和準(zhǔn)確度達(dá)到最高。因此GDF3、PSA、MUC1三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)診斷乳腺癌效果最佳，故在臨床中聯(lián)合使用GDF3、PSA、MUC1診斷乳腺癌，避免漏診。

本研究通過(guò)對(duì)50例原發(fā)性乳腺癌患者的血清GDF3、PSA、MUC1表達(dá)水平單項(xiàng)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)，證實(shí)GDF3聯(lián)合檢測(cè)PSA和MUC1對(duì)乳腺癌的早期診斷更有確診意義。后續(xù)研究我們將對(duì)乳腺癌患者的血清GDF3、PSA、MUC1之間的影響機(jī)制以及其與腫瘤標(biāo)志物之間的聯(lián)合檢測(cè)是否更有意義進(jìn)行更深入的研究。

[1] 黃哲宙,陳萬(wàn)青,吳春曉.中國(guó)女性乳腺癌的發(fā)病和死亡現(xiàn)況-全國(guó)32個(gè)腫瘤登記點(diǎn)2003年至2007年資料分析報(bào)告[J].腫瘤,2012,32(6):435～439.

[2] 陳梁,李建華,李建輝,等.GDF3聯(lián)合CA125,CA153,CEA等血清指標(biāo)在乳腺癌診斷中的價(jià)值[J].環(huán)球中醫(yī)藥,2013(S2):178～179.

[3] 中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌專(zhuān)業(yè)委員會(huì).中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范(2011版)[J].中國(guó)癌癥雜志,2011,21(5):367～417.

[4] Moore R G，MacLaughlan S，Bast R C.Current state of biomarkerdevelopment for clinical application in epithelial ovarian cancer[J].Gy-necol Oncol，2010，116(2)：240～245.

① 【基金項(xiàng)目】江蘇省科技發(fā)展基金，(編號(hào)：BKY2004003)；南京醫(yī)科大學(xué)科技發(fā)展基金面上項(xiàng)目，(編號(hào):2012NJMU148)

1006-6233(2016)12-2026-03

A 【doi】10.3969/j.issn.1006-6233.2016.12.036