[摘 要] 羊偽結(jié)核病是一種由偽結(jié)核棒狀桿菌引起的一種人畜共患慢性傳染性疾病，患病后顯著的臨床特征是在淋巴和肺臟等組織器官內(nèi)形成干酪狀膿腫，也被稱為干酪樣淋巴結(jié)炎。該種疾病對(duì)任何品種羊都具有傳染性，引起羊機(jī)體消瘦、生產(chǎn)能力下降，妊娠母羊出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎、僵尸胎，患病嚴(yán)重的造成母羊死亡。由于這種疾病外在癥狀不明顯，死亡率低，所以飼養(yǎng)戶經(jīng)常忽視該種疾病預(yù)防和免疫。最近幾年，隨著對(duì)羊偽結(jié)核病的診斷、預(yù)防、免疫的深入研究，并結(jié)合國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀，就羊偽結(jié)核病免疫方法進(jìn)行分析及闡述。

[關(guān)鍵詞] 羊養(yǎng)殖 偽結(jié)核病 免疫方法 研究分析

[中圖分類號(hào)] S826 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1003-1650 （2016）05-0261-01

羊偽結(jié)核病是由偽結(jié)核棒狀桿菌引起的一種人畜共患慢性傳染性疾病。顯著臨床特征是在淋巴結(jié)和肺臟中出現(xiàn)干酪狀膿腫，現(xiàn)階段，對(duì)羊偽結(jié)核病還沒有有效的診斷方法，為此，本文主要就羊偽結(jié)核病的免疫方法進(jìn)行了研究，現(xiàn)將研究結(jié)果喲報(bào)告如下：

1 實(shí)驗(yàn)材料和實(shí)驗(yàn)方法的選取

1.1 實(shí)驗(yàn)材料的選取

本次研究選取了新疆托里縣某羊養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)健康山羊和綿羊各12只，研究日期一共六個(gè)月，從2015年4月到2015年9月。測(cè)試羊的年齡為1～2年。本次研究過程羊的品種、年齡是之間的差異性無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 實(shí)驗(yàn)菌株的獲取

取自然患病山羊干酪狀膿腫，通過粉碎，離心處理，分離得到了羊偽結(jié)核病棒狀桿菌，將是分離得到二號(hào)菌株和十二號(hào)菌株經(jīng)過處理后用作菌苗制備，而九十九號(hào)菌株作為免疫攻毒實(shí)驗(yàn)菌株，用馬紅球菌用作菌苗制備的輔佐材料。

1.3 菌苗制備

將二號(hào)菌株和十二號(hào)菌株接種到肉湯培養(yǎng)基上，在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)一周，溫度恒定在37度左右。然后將培養(yǎng)基混合在一起，加入0.4%的甲醛溶液進(jìn)行滅活處理一周，將上層清液去除，保證沉淀物和上層清液比例維持在1：4左右，然后將輔助馬紅菌株加入混合物中，選取上層清液作測(cè)試菌株，將其放置于4度的培養(yǎng)環(huán)境下等待使用。

1.4 測(cè)試羊免疫接種

本次選擇的測(cè)試羊年齡在1～2歲之間，通過對(duì)羊進(jìn)行血清檢測(cè)，偽結(jié)核病呈現(xiàn)陰性，羊只身體健康，無其他疾病。將上述過程得到了滅火菌株以每只2ml的量注射到到測(cè)試羊的體內(nèi)，接種部位都為左環(huán)耳部皮內(nèi)注射。本次研究過程六只山羊和六只綿羊不進(jìn)行免疫接種，將其作為對(duì)照試驗(yàn)。

1.5 攻毒實(shí)驗(yàn)

攻毒實(shí)驗(yàn)研究過程中選取了將山羊和綿羊分為兩組進(jìn)行測(cè)試，詳細(xì)的情況見表1所示。

1.6 臨床檢查

在對(duì)山羊進(jìn)行免疫接種和攻毒實(shí)驗(yàn)之后，要定期對(duì)測(cè)試羊進(jìn)行體溫和臨床癥狀檢查，要詳細(xì)記錄羊的身體體征變化情況和全身反應(yīng)。每周定期采集測(cè)試羊的血液，進(jìn)行偽結(jié)核病抗血清檢測(cè)。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

2.1 測(cè)試羊免疫反應(yīng)分析

測(cè)試羊接種滅火菌株三天之后，都出現(xiàn)了體溫顯著升高的癥狀，羊精神萎靡、進(jìn)食量減退，大量飲水，癥狀在接種一周后逐漸消失。通過對(duì)測(cè)試羊接種部位進(jìn)行觀察分析，測(cè)試羊的接種部位出現(xiàn)了急性炎癥反應(yīng)，持續(xù)時(shí)間比較長(zhǎng)，而且有的羊呈現(xiàn)加重趨勢(shì)。4～5周左右，炎癥逐漸消退，并在接種滅火菌株的部位出現(xiàn)了黃豆大小的硬質(zhì)結(jié)節(jié)，一般兩周后住結(jié)節(jié)逐漸縮小消退。測(cè)試羊接種兩周之后，血清檢測(cè)出現(xiàn)了抗體陽性反應(yīng)。持續(xù)時(shí)間大概13周左右，然后轉(zhuǎn)為陰性，免疫接種第三周，從接種羊血液中就能夠檢測(cè)到淋巴細(xì)胞和分頁核細(xì)胞呈現(xiàn)不同程度的增多現(xiàn)象，持續(xù)時(shí)間為7～12周左右。

2.2 攻毒反應(yīng)

攻毒三天后，測(cè)試兩組羊均出現(xiàn)了不同程度的全身反應(yīng)，羊的體溫顯著升高，精神沉郁，食欲減退，對(duì)照組山羊和綿羊比免疫羊的癥狀表現(xiàn)的更為明顯，并且持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，對(duì)照組山羊和綿羊持續(xù)時(shí)間為3～4周左右，免疫羊持續(xù)時(shí)間大概為1周左右。對(duì)照組羊身體消瘦十分明顯，免疫羊癥狀出現(xiàn)三周后逐漸消退，并且身體素質(zhì)逐漸恢復(fù)。攻毒測(cè)試三天之后，免疫羊和對(duì)照組羊都出現(xiàn)了皮膚炎癥反應(yīng)，逐漸形成了花生豆大小的膿包，對(duì)照組羊的膿包消退時(shí)間比較長(zhǎng)，一般在6～8周左右開始才會(huì)逐漸消退，并且會(huì)在免疫部位形成疤痕。免疫羊膿包消除時(shí)間一般為4～6周左右。

3 討論

偽結(jié)核病是羊養(yǎng)殖過程中一種常見的而慢性傳染性疾病，偽結(jié)核棒狀桿菌寄生在羊體內(nèi)后所產(chǎn)生的溶血毒素對(duì)羊的淋巴結(jié)和肺臟器官產(chǎn)生危害，形成化膿性的壞死組織，因此，嚴(yán)重影響到羊的生長(zhǎng)和發(fā)育。羊患病之后無明顯的外表臨床癥狀，機(jī)體消瘦，飼養(yǎng)戶很容易將其與寄生蟲疾病混淆。羊的生產(chǎn)能力逐漸降低，會(huì)給飼養(yǎng)戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該種疾病在世界范圍廣泛發(fā)生。在我國(guó)羊養(yǎng)殖地區(qū)也廣泛存在，該種疾病還會(huì)給傳染給人力，給人類生命健康造成威脅。因此，為了更好防治該種疾病，很多畜牧獸醫(yī)研究人員積極嘗試疫苗的研制，試圖解決該種疾病所產(chǎn)生的免疫問題，但是從最近幾年的研究結(jié)果顯示，不容樂觀。隨著科學(xué)技術(shù)不斷發(fā)展和進(jìn)步，我們發(fā)現(xiàn)偽結(jié)核棒狀桿菌機(jī)體所產(chǎn)生的抗體能夠有效抑制病菌生長(zhǎng)和繁殖，而且還能夠中和病菌所產(chǎn)生的溶血毒素。通過對(duì)本次研究結(jié)果進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，本次制備的滅活菌株具有較高的免疫原性，通過耳背部接種注射之后，能夠激發(fā)羊機(jī)體對(duì)偽結(jié)核棒狀桿菌產(chǎn)生大量的免疫抗體，形成堅(jiān)強(qiáng)的免疫能力。通過日常記錄可以發(fā)現(xiàn)，接種四周之后，免疫羊身體內(nèi)的抗體可以抵抗2*108個(gè)該病菌的攻擊。接種六個(gè)月后可以對(duì)更高數(shù)量的該病菌產(chǎn)生攻擊力，免疫時(shí)間較長(zhǎng)。本次研究發(fā)展，有兩只免疫羊接種滅活菌株之后，肺部和淋巴結(jié)膿腫病變分別被局限于攻毒部位或者臨近的淋巴結(jié)附近。這種現(xiàn)象表明當(dāng)羊身體內(nèi)存在大量病菌時(shí)，經(jīng)過免疫的羊仍然可以有效的抵抗病原菌在身體內(nèi)的擴(kuò)散和傳播，最大程度的保護(hù)羊的內(nèi)臟器官健康。但是本次研究對(duì)于羊身體內(nèi)的膿腫是否經(jīng)過一段時(shí)間后可以被疾病徹底消除需要做進(jìn)步一的研究和探索。

參考文獻(xiàn)

[1]趙宏坤，范偉興，胡敬東，張志. 羊偽結(jié)核病研究進(jìn)展[J]. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2000，03：77-78.