摘要:以紫枝玫瑰(Rosa rugosa ‘Zi zhi’)為試驗(yàn)材料,采用同時(shí)蒸餾萃取和氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),研究了不同濃度NaCl脅迫處理對(duì)玫瑰精油香氣成分及含量的影響。結(jié)果表明,無脅迫的清水處理(0 mmol/L)共檢出31種香氣成分,25 mmol/L 和50 mmol/L處理分別檢出35和42種香氣成分,而100 mmol/L處理香氣成分僅為20種;50 mmol/L處理醇類、醛類、酯類、酚類、萜烯類和烷烴類化合物總量均低于25 mmol/L處理,只有酸類化合物總量略有增加??傮w上,雖然輕度和中度NaCl脅迫會(huì)降低玫瑰精油中各香氣成分的含量,但其種類更加豐富,精油品質(zhì)并未受到影響。
關(guān)鍵詞:玫瑰(Rosa rugosa Thunb.)精油;NaCl脅迫;芳香成分;含量
中圖分類號(hào):S685.12 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2016)13-3364-04
DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.13.023
土壤鹽堿化是影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和破壞生態(tài)環(huán)境的一個(gè)重要因素,在世界范圍內(nèi)廣泛存在。據(jù)統(tǒng)計(jì),全世界鹽堿地面積大約為9.54億hm2;中國(guó)鹽堿地面積大約為3 460萬hm2,鹽堿化耕地760萬hm2,約占總耕地面積的20%[1]。隨著工業(yè)的發(fā)展,耕地面積不斷減少,鹽堿地作為一個(gè)可以開發(fā)利用的土地后備資源而受到重視,開發(fā)和利用鹽堿地具有現(xiàn)實(shí)而深遠(yuǎn)的生態(tài)、社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益。
玫瑰(Rosa rugosa Thunb.)是薔薇科薔薇屬落葉灌木,品種繁多,花香宜人,既是園林綠化的優(yōu)良樹種,也是珍貴的中藥材和香料工業(yè)、食品工業(yè)的重要原料,由其鮮花提取的玫瑰精油價(jià)格昂貴,用途廣泛,素有“液體黃金”之美稱[2]。若能在廣袤的鹽堿地上種植高附加值的玫瑰,將極大促進(jìn)中國(guó)鹽堿地的開發(fā)利用,有效促進(jìn)鹽堿地區(qū)農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)調(diào)整,促進(jìn)高效生態(tài)農(nóng)業(yè)及特色旅游業(yè)的發(fā)展。
玫瑰野生種天然分布于中國(guó)吉林圖們江河口、遼寧南部海岸及山東東部沿海海岸[3],其特殊的生存環(huán)境造就其耐鹽性。但由于長(zhǎng)期對(duì)觀賞性狀的定向選擇和甜土地栽培的長(zhǎng)期適應(yīng)性進(jìn)化,玫瑰栽培品種的耐鹽性有所下降。因此,評(píng)價(jià)玫瑰栽培品種對(duì)鹽堿地的適應(yīng)性,并進(jìn)一步研究鹽脅迫對(duì)玫瑰精油含量及其化學(xué)組分的影響具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本研究以玫瑰主栽品種紫枝玫瑰為試驗(yàn)材料,研究不同程度NaCl脅迫對(duì)其精油芳香成分及含量的影響,旨在為玫瑰在鹽堿地區(qū)的開發(fā)利用提供參考。
1 材料與方法
1.1 材料
試驗(yàn)材料為三年生紫枝玫瑰,于2013年12月盆栽定植,營(yíng)養(yǎng)土及盆器大小均一致。試驗(yàn)采用澆灌NaCl溶液的方法進(jìn)行鹽脅迫處理。NaCl濃度分別設(shè)為25、50、100 mmol/L(分別命名為T25、T50和T100),以澆清水處理的為對(duì)照(T0)。每處理10盆,盆底配接水盤,避雨栽培。于2014年3月底開始澆鹽水,視土壤干旱及含鹽量情況每5~7 d澆一次。5月初盛花期采摘?jiǎng)倓偸㈤_的鮮花提取精油并檢測(cè)分析。
1.2 方法
1.2.1 玫瑰精油的提取與保存 玫瑰精油提取采用同時(shí)蒸餾萃取法。80 g玫瑰花瓣與蒸餾水按質(zhì)量比4∶1放入燒瓶,接入到同時(shí)蒸餾萃取裝置的右端,恒溫油浴加熱,溫度為120 ℃。左端接入裝有50 mL二氯甲烷的燒瓶,恒溫水浴加熱,溫度為60 ℃。蒸餾萃取4 h后,取下裝有二氯甲烷的燒瓶,加入無水硫酸鈉進(jìn)行干燥,密閉過夜,過濾,濾液60 ℃水浴下用Vigreux精餾柱(韋氏分餾柱)濃縮至2 mL,再用氮?dú)獯祾咧梁阒?,得到精油產(chǎn)物。將得到的玫瑰精油置于玻璃瓶放入冰箱中避光保藏,以備GC-MS分析用。
1.2.2 精油成分的定性定量分析 在提取得到的玫瑰精油中加入一定量二氯甲烷回溶,使其終濃度為20 mg/mL,并加入3-壬酮為內(nèi)標(biāo),使其終濃度為1 μL/mL,取1 μL混合物直接打入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(Trace DSQ II,美國(guó)Thermo公司),進(jìn)行香氣成分定性定量分析。色譜條件及定性定量方法按照文獻(xiàn)[4]進(jìn)行。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同濃度NaCl脅迫對(duì)玫瑰精油各香氣成分及其含量的影響
試驗(yàn)得到不同濃度NaCl脅迫下紫枝玫瑰精油中芳香組分的總離子圖,各組分質(zhì)譜經(jīng)計(jì)算機(jī)譜庫(NIST/WILEY)檢索及資料分析,檢出的主要芳香成分及相對(duì)含量見表1。
從表1可以看出,T0、T25、T50和T100處理玫瑰植株后提取的玫瑰精油中分別鑒定出31、35、42和20種香氣成分,隨著NaCl脅迫程度的增加,檢測(cè)出的精油化學(xué)成分呈先增加后減少的趨勢(shì),T50處理檢出成分最多,而T100處理檢出的成分急劇下降,較T50處理減少了22種。檢出的主要成分有醇類、醛類、酮類、酯類、酸類、酚類、萜烯類和烷烴類,4個(gè)處理下共有的香氣成分為芳樟醇、α-松油醇、香茅醇、香葉醇、苯甲醇、苯乙醇、橙花醇、庚醛、(Z)-檸檬醛、(E)-檸檬醛、乙酸苯乙酯、乙酸香葉酯、棕櫚酸、丁香酚、順式-羅勒烯、α-法呢烯和二十烷。
清水處理下(T0)共檢出芳香成分31種,醇類化合物含量最高,達(dá)111.54 μg/g,是主要的香氣成分。含量最高的芳香成分是苯乙醇,為65.53 μg/g。香茅醇和香葉醇的含量也較高,含量分別為29.03 μg/g和8.43 μg/g。萜烯類化合物總含量?jī)H次于醇類,達(dá)20.68 μg/g。乙酸橙花酯、α-松油烯、γ-松油烯、樟烯在其他各處理下均未檢測(cè)到,含量均較低。
25 mmol/L NaCl處理(T25)共檢測(cè)出35種芳香成分,其中有13種成分在清水處理下未檢測(cè)到,金合歡醇、2-己烯醛、香茅酸、3-蒈烯在其他各處理均未檢測(cè)到。醇類化合物是主要香氣成分,總含量為72.39 μg/g。其他成分含量較多的有苯乙醇、香茅醇和香葉醇,含量分別為58.75、9.39、1.35 μg/g,棕櫚酸和二十烷的含量也較高,分別為2.36 μg/g和8.18 μg/g。
50 mmol/L NaCl處理共檢測(cè)出芳香成分42種,醇類化合物是主要香氣成分,總含量為27 μg/g。含量最多的是苯乙醇,達(dá)15.48 μg/g,含量較多的有香茅醇、香葉醇、油酸和二十烷,分別為4.53、3.55、3.45、3.30 μg/g。正壬醇、糠醇、6-甲基-5-庚烯-2-酮、2-壬烯、甲酸苯乙酯、油酸、硬脂酸是50 mmol/L NaCl處理的特有成分,在其他各處理中均未檢測(cè)到。
100 mmol/L NaCl處理共檢測(cè)出芳香成分20種,主要為醇類化合物,總含量為37.42 μg/g,其中苯乙醇的含量最高,達(dá)29.93 μg/g,其次為香茅醇,其含量為5.14 μg/g,這兩種成分是該處理的主要香氣成分,其他成分含量均較低。
2.2 不同濃度NaCl脅迫下玫瑰精油香氣成分種類及其總量的變化
2.2.1 醇類化合物的變化 從表2可以看出,醇類化合物是各處理下玫瑰精油的主要芳香成分。伴隨著NaCl濃度的加大,醇類化合物含量先減少后增加,清水處理下醇類化合物的含量為111.54 μg/g,25 mmol/L NaCl處理為72.39 μg/g,50 mmol/L NaCl處理為27.00 μg/g,100 mmol/L NaCl處理為37.42 μg/g。
檢測(cè)出的醇類化合物主要包括苯乙醇、香茅醇、香葉醇和橙花醇。與對(duì)照相比,苯乙醇在25 mmol/L NaCl處理含量略有下降,當(dāng)NaCl濃度增加至50 mmol/L時(shí),含量迅速降至15.48 μg/g,當(dāng) NaCl濃度繼續(xù)增加至100 mmol/L時(shí),苯乙醇含量反而上升到29.93 μg/g。另一種玫瑰精油的主要成分香茅醇呈現(xiàn)同樣的變化規(guī)律,但其在25 mmol/L NaCl處理下即迅速下降至9.39 μg/g,當(dāng)NaCl濃度增加至100 mmol/L時(shí),其含量較50 mmol/L處理上升了13.47%。NaCl脅迫處理下,香葉醇和橙花醇的含量也較對(duì)照明顯降低,25 mmol/L NaCl處理,橙花醇含量較對(duì)照降低了70%,香葉醇含量降低了84%, 50 mmol/L NaCl處理二者的含量較25 mmol/L處理略有上升,但當(dāng)NaCl濃度升至100 mmol/L時(shí),二者的含量又下降。
2.2.2 酯類化合物的變化 酯類化合物是玫瑰精油的另一類重要芳香成分。從表1可以看出,紫枝玫瑰鮮花精油中酯類化合物主要包括乙酸香茅酯、乙酸苯乙酯、乙酸香葉酯等,但其含量不高。不同程度的NaCl脅迫均降低玫瑰精油中酯類化合物的含量,且酯類化合物總量隨脅迫程度增加而降低。
2.2.3 萜烯類化合物的變化 紫枝玫瑰花精油中含有大量的萜烯類化合物,清水處理檢出的主萜烯類化合物總量達(dá)20.68 μg/g。25 mmol/L NaCl濃度處理下,萜烯類化合物含量迅速下降,只有2.29 μg/g,此后隨著NaCl濃度的加大,含量繼續(xù)下降,50 mmol/L NaCl處理時(shí),萜烯類化合物降至1.16 μg/g,100 mmol/L NaCl處理時(shí)含量降到0.20 μg/g。
D-檸檬烯、β-水芹烯、反式-羅勒烯、萜品油烯、β-月桂烯、順式-羅勒烯均在清水處理中含量最高,此后迅速下降;10-二十一(碳)烯在25 mmol/L NaCl處理中含量最高;α-松油烯、γ-松油烯只在清水處理中檢測(cè)到,3-蒈烯只在25 mmol/L NaCl處理中檢測(cè)到。
2.2.4 其他化合物含量的變化 除醇類、酯類、萜烯類化合物外,玫瑰精油中還檢測(cè)出醛類、酮類、酸類、酚類、烷烴類化合物。與清水處理相比,T25處理醛類化合物總量增加1倍多,此后隨著NaCl處理濃度的增加而持續(xù)下降。酮類化合物只在T50處理中檢測(cè)到6-甲基-5-庚烯-2-酮1種物質(zhì),且含量很低;酸類化合物在清水處理中含量較低,為0.43 μg/g,隨著NaCl濃度的加大呈先升高后降低的趨勢(shì),T50處理下含量最高,為4.75 μg/g;酚類化合物只檢出丁香酚1種成分,其含量隨著NaCl脅迫程度的增加呈持續(xù)下降的趨勢(shì);烷烴類化合物檢測(cè)出二十烷、十六烷和十五烷3種,其中十六烷只在清水處理中檢出,且含量較低,十五烷只在清水處理與T50處理下檢出,且含量較低,二十烷含量隨鹽濃度的加大呈下降趨勢(shì),清水處理下含量最高,為13.68 μg/g。
3 小結(jié)與討論
目前中國(guó)耕地資源已得到比較充分的挖掘,常規(guī)耕地生產(chǎn)力水平進(jìn)一步提升面臨瓶頸,而鹽堿地的高效利用將對(duì)提升中國(guó)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)能力產(chǎn)生重要影響。根據(jù)土壤中所含鹽分和堿分的多少,可將鹽堿地劃分為輕度(含鹽堿0.1%~0.25%)、中度(含鹽堿0.25%~0.45%)和重度(含鹽堿0.45%~0.8%)三大類[5]。研究表明,適度的鹽處理能提高蘋果果實(shí)的糖酸含量,長(zhǎng)期適度的鹽脅迫能提高巨峰葡萄果實(shí)的著色、糖酸含量和果實(shí)硬度,高鹽降低了以上指標(biāo)但增加了果實(shí)重量,不過香氣對(duì)鹽比較敏感。適度的鹽處理能提高番茄果實(shí)的硬度、耐壓力和產(chǎn)量,改善果實(shí)品質(zhì),包括可溶性總糖、還原糖、維生素C和氨基酸含量等;對(duì)草莓進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的鹽處理,在維持其干物質(zhì)含量、總糖和甜度的基礎(chǔ)上,顯著提高了其抗壞血酸、花青素和各種氨基酸的含量;鹽脅迫還能提高柑橘的糖酸含量,優(yōu)化其風(fēng)味[6]。
本研究表明,NaCl脅迫會(huì)對(duì)玫瑰精油芳香成分的種類與含量產(chǎn)生明顯影響。無鹽脅迫的清水處理共檢出31種香氣成分,而25 mmol/L和50 mmol/L NaCl處理下則分別檢出35和42種香氣成分,至100 mmol/L NaCl處理時(shí)香氣成分的種類明顯降低,僅有20種,說明輕度或中度鹽脅迫有利于豐富玫瑰精油中的香氣成分;50 mmol/L處理下醇類、醛類、酯類、酚類、萜烯類和烷烴類化合物的總量均低于25 mmol/L處理,只有酸類化合物總量略有增加??傮w上看,輕度和中度NaCl脅迫盡管豐富了玫瑰精油香氣成分,但各芳香成分的含量降低。
值得注意的是,100 mmol/L重度NaCl脅迫下,醛類、酮類、酯類、酸類、酚類、萜烯類和烷烴類化合物含量均比50 mmol/L處理降低,而醇類化合物的總量卻明顯升高。醇類化合物只有苯乙醇和香茅醇的含量增加,其他醇類物質(zhì)的含量均較50 mmol/L處理下低,即重度NaCl脅迫下玫瑰精油中醇類化合物總量的增加主要?dú)w于苯乙醇和香茅醇含量的增加。田間形態(tài)觀察表明,100 mmol/L處理的玫瑰植株取樣時(shí)已表現(xiàn)出鹽害癥狀,但其花朵和果實(shí)數(shù)量明顯較25 mmol/L和50 mmol/L處理多,這可能是由于植物體自身的保護(hù)性反應(yīng),原本正常生長(zhǎng)的玫瑰植株在開始重度鹽脅迫處理后,植株感知到外部惡劣的生長(zhǎng)條件,出于植物種族延續(xù)的天性,植株會(huì)強(qiáng)化生殖生長(zhǎng),并大量釋放苯乙醇等香氣成分,以吸引蜜蜂等昆蟲授粉,這可能是導(dǎo)致其含量增加的原因之一。另外的原因可能是由于重度NaCl脅迫下花朵衰老程度加劇,從而導(dǎo)致醇類物質(zhì)含量增加。具體原因有待進(jìn)一步分析。
總之,雖然輕度和中度NaCl脅迫會(huì)降低玫瑰精油中各香氣成分的含量,但其種類更加豐富,精油品質(zhì)并未受到影響,因此均衡產(chǎn)量和品質(zhì),尤其是從加強(qiáng)對(duì)鹽堿地合理利用的角度看,認(rèn)為在進(jìn)行針對(duì)性評(píng)測(cè)的基礎(chǔ)上,在輕度或中度鹽堿地種植玫瑰,發(fā)展玫瑰產(chǎn)業(yè)可以推廣與應(yīng)用。
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